氨基胍和泰能对大鼠重症急性胰腺炎细菌易位的影响

发布时间：2020-04-16 01:35

【摘要】： 背景和目的:重症急性胰腺炎(SAP)病情凶险,发展迅速,常累及多个脏器,由于缺乏有效的特异性治疗方法,目前并发症和病死率仍较高。SAP按病程一般分为急性反应期(病程2周以内)、全身感染期( 2周～2个月及以上)和残余感染期(晚期并发症及后遗症期,多发生在2个月后)。目前综合治疗措施的进步使大多数SAP患者能安全度过急性反应期,但进入全身感染期后却常常合并多器官功能不全综合征(MODS ) ,成为最主要的死亡原因。据报道, SAP并发胰腺和胰周感染率可高达4 0%～7 0% ,由此发生脓毒症则病死率可超过20%～50%[1]。因此防治细菌易位在重症急性胰腺炎的治疗中具有十分重要的作用。目前认为感染坏死胰腺和胰周的病原菌主要来源于肠道。Deitch认为细菌易位是肠道遭受三重打击后发生的[2]。第一重打击可能是缺血、缺氧。第二重打击是肠道血流量的恢复,伴随中性粒细胞迁移到肠道微循环中,释放细胞因子。缺血-再灌注还能损伤肠相关淋巴样组织(GALT)和肠上皮细胞。第三重打击是肠屏障完整性的丢失,使肠道有毒物质和细菌能透过肠壁。细菌易位的机制主要包括:1.肠黏膜物理屏障功能的丧失;2.免疫功能抑制;3.肠动力降低;4.肠道菌群失衡。细菌易位的途径目前尚不明确,可能是通过淋巴管、血液等途径易位到肠外组织。SAP时抑制型一氧化氮合成酶(iNOS)被激活,产生大量的NO,大量的NO通过多种途径损伤肠道粘膜。如肠道细胞长期接触NO可引起细胞旁分泌或自分泌功能紊乱;抑制细胞呼吸;引起局部血流分布不均;导致氧化过亚硝酸盐生成过多。上述途径导致肠道损伤,肠道屏障功能紊乱,引起细菌易位[3,4]。此外由iNOS产生的NO能够破坏胰腺微循环,引起胰腺缺血、坏死。胰腺感染与胰腺坏死的发生密切相关。胰腺感染很少发生在未坏死的组织[5]。抑制iNOS的活性及预防性的使用抗生素在理论上能有效预防SAP细菌易位,因此本实验通过构建SAP动物模型,研究选择性iNOS抑制剂氨基胍和抗生素泰能对肠外组织细菌感染的影响,从而探讨它们对细菌易位的影响及细菌易位的可能途径,为SAP临床治疗提供更有力的理论基础和依据。 方法:①实验动物随机分为正常对照组、SAP组、SAP+氨基胍组、SAP+泰能组和SAP+氨基胍+泰能组;②采用胰腺实质内注射牛磺胆酸钠的方法制作SAP模型,利用氨基胍和泰能对模型进行干预,术后48h时采集标本;③利用血清淀粉酶和光镜下胰腺组织病理学的改变对SAP模型进行评价;④利用光镜下肠粘膜的改变对肠道粘膜损伤进行评估;⑤利用化学比色法检测胰腺组织MPO表达水平;⑥利用酶学分光光度法测定血D-乳酸水平;⑦对门静脉血、胰腺、肠系膜淋巴结、肝脏、腹水进行细菌培养。 结果:①利用胰腺实质内注射牛磺胆酸钠的方法,复制了SAP大鼠模型,经检测血清淀粉酶和组织学观察证实模型符合SAP实验诊断标准;②胰腺组织MPO水平SAP组较正常组显著升高(P0.05),SAP+氨基胍组、SAP+泰能组、SAP+氨基胍+泰能组又较SAP组显著降低(P0.05);③血清D-乳酸水平SAP组和SAP+泰能组较正常组水平显著升高(P0.05),SAP组和SAP+泰能组血清D-乳酸水平无统计学差异(P0.05),SAP+氨基胍组和SAP+氨基胍+泰能组较SAP组和SAP+泰能组显著降低(P0.05);④细菌培养正常组各脏器培养未见细菌生长。SAP组各脏器均培养出细菌,其中腹水阳性率最高,其次为胰腺,再次为肠系膜淋巴结(MLN),肝脏和血液阳性率较低。SAP+氨基胍组、SAP+泰能组、SAP+氨基胍+泰能组各脏器细菌培养阳性率均较低,但腹水仍最高,其次为胰腺、MLN、肝脏、血液。检出的细菌经鉴定后均为肠源性细菌,主要是大肠杆菌,其次为阴沟肠杆菌、粪肠球菌、奇异变形杆菌、屎肠球菌。 结论:(1)氨基胍能保护肠道粘膜,防止SAP肠道通透性增加,阻止肠道细菌透过肠粘膜,从而抑制细菌易位,减少胰腺感染几率;(2)泰能可抑制肠道细菌易位,防止胰腺感染。但不能减轻SAP肠道粘膜损伤,对肠道粘膜通透性无改善作用;(3)SAP时感染胰腺的细菌为肠源性细菌。
【图文】：

25一、胰腺组织HE染色图4 正常组，胰腺腺泡排列规则，无坏死、出血、炎症细胞浸润 ×400图5 SAP组 可见明显的胰腺组织坏死、出血、大量炎症细胞浸润 ×400图6 SAP＋氨基胍组 胰腺腺泡排列稍紊乱，间质水肿、血管明显充血，炎症细胞浸润不明显 ×400图7 SAP＋泰能组 可见胰腺组织坏死、间质明显水肿，但无炎症细胞浸润 ×400图8 SAP＋氨基胍＋泰能组 胰腺腺泡排列稍规则、血管充血、但无炎症细胞浸润 ×400

胰腺腺泡排列规则，无坏死、出血、炎症细胞浸润 ×400图5 SAP组 可见明显的胰腺组织坏死、出血、大量炎症细胞浸润 ×400图6 SAP＋氨基胍组 胰腺腺泡排列稍紊乱，，间质水肿、血管明显充血，炎症细胞浸润不明显 ×400图7 SAP＋泰能组 可见胰腺组织坏死、间质明显水肿，但无炎症细胞浸润 ×400
【学位授予单位】：第三军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R576

【参考文献】

相关期刊论文 前7条

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2 解基良,张志尧,吴咸中;MODS时肠道细菌移位及承气方剂对其影响的病理形态学观察[J];中国中西医结合外科杂志;2000年03期

3 王兴鹏,王冰娴,吴恺,徐选福;细胞凋亡在急性坏死型胰腺炎早期肠黏膜上皮细胞死亡中的作用[J];中华消化杂志;2001年05期

4 吴育连,董鑫,黄昌拼,苏昆仑,谢秋萍;重症急性胰腺炎死亡相关因素分析[J];中华普通外科杂志;2005年11期

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6 邓群,吴承堂,黎沾良,熊德鑫,梁延杰,陆连荣,孙小庆;急性坏死性胰腺炎并发感染防治方法的实验研究[J];中华外科杂志;2000年08期

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本文编号：2629240