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安庆地区急性散发性戊型肝炎病毒感染的基因型研究

发布时间:2020-05-01 11:02
【摘要】: 目的了解安庆地区急性散发性戊型肝炎生化指标的变化特点,分析戊型肝炎病毒(HEV)各生物标志物之间的相关性及其基因型和流行病学特点,为预防戊型肝炎的流行提供依据。方法收集2007年-2009年临床检测为急性散发性肝炎患者的系列血清,用酶联免疫(ELISA)试剂检测HEV-IgG抗体、HEV-IgM抗体,用RT-PCR法检测HEV RNA载量,比较各指标间的相关关系,并将部分扩增产物进行测序和基因分型。结果在46例安庆地区临床确诊为急性散发性戊型肝炎患者中,HEV-IgG抗体滴度有升高趋势的36例,HEV-IgM抗体阳性的41例,RNA阳性者39例。HEV-IgM抗体变化与HEV-IgG抗体变化的符合率为88.2%,HEV-IgM抗体变化与HEV RNA阳性的符合率为85.3%,HEV-IgG抗体变化与HEV RNA阳性的符合率为83.8%;分别扩增HEV RNA ORF1区域494-nt核苷酸片段和ORF2区域150-nt核苷酸片段各27条和15条,系统进化分析显示均为HEV基因Ⅳ型。结论1.HEV感染早期,同时进行HEV-IgG抗体HEV-IgM抗体和核酸的检测有助于戊性肝炎的诊断。2.安庆地区急性散发性HEV流行株以Ⅳ型病毒株为主。
【图文】:

琼脂糖电泳,产物,图谱,阳性对照


HEvoRFZ部分基因片段RT一nPcR产物的琼脂糖电泳图谱

重组克隆,酶切鉴定


小量制备和限制性内切酶Pstl和EcoRI的酶切,,2%琼脂糖凝胶电泳若扩增出长度和目的片段大小相同的约为189bp的目的片段的条带和长度约为2692bp的载体片段的条带,则可能为阳性重组克隆。 HEVRNA检测为阳性的标本均克隆成功(见图3)。 2345250b15Db图3重组克隆的Ps湃口EcoRI的酶切鉴定注 :M:150bpDNAmarker1一5:含有插入片段的重组质粒的Pst拜口EcoRI的酶切35
【学位授予单位】:安徽医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R512.6

【参考文献】

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本文编号:2646578

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