蛋白酶抑制剂短期腹腔灌洗治疗重症急性胰腺炎的实验观察

发布时间：2020-05-06 08:30

【摘要】： 目的: 建立牛磺胆酸钠诱导的重症急性胰腺炎大鼠模型,观察乌司他丁短期腹腔灌洗治疗重症急性胰腺炎的效果,并初步研究其机制。方法: 将80只Wistar大鼠随机分为5组,每组各16只:假手术对照组(A组)、SAP模型组(B组)、乌司他丁组(C组)、生理盐水腹腔灌洗组(D组)、乌司他丁腹腔灌洗组(E组)。SAP动物模型建立采用Aho等的方法,2 %戊巴比妥钠(0.3ml/100 g)腹腔注射麻醉,上腹正中切口入腹,显露胰腺组织,用4号头皮针于十二指肠乳头附近经十二指肠壁穿刺逆行插入胰胆管向内注射5%牛磺胆酸钠溶液(0.1 ml/100 g),约5-10min后肉眼可见胰腺组织充血、水肿、出血、坏死等改变,表明大鼠SAP动物模型制备成功。术后禁食不禁水。于各种处理后6h、24 h取血液、腹水、胰腺组织测定IL-1β、TNF-α、淀粉酶、胰蛋白酶、NF-κB、TLR4水平,并作胰腺病理检查。结果: 1、病理观察结果:A组:胰腺无明显病理变化。B组:胰腺出血、坏死明显,多处可见皂化斑,有血性腹水,胃肠腔胀气明显。镜下可见大片实质坏死,红细胞明显渗出,炎症细胞广泛浸润。C组:胰腺出血、坏死减轻,可见少量皂化斑,偶有血性腹水及胃肠腔胀气。镜下实质坏死面积、红细胞渗出及炎症细胞浸润均较B组明显减少。D组:大体及镜下改变较B组无显著变化。E组:大体及镜下较B组显著改善,与C组相比情况也有明显改善。上述各组病理改变随时间延长进行性加重,即24 h时均重于6 h时。胰腺病理评分结果: E组 C组 B组,B、D间无显著性差异。 2、腹水淀粉酶、胰蛋白酶检测结果:B组与A组比较有显著性差异,说明建模成功。除A组外,E组结果好于其他各组,其次为C组,D组与B组相比无明显差异。 3、血IL-1β、TNF-α的检测结果:B组与A组比较有显著性差异,说明建模成功,而治疗上D组与B组比较无明显差异,C、E组分别与B组比较有显著性差异,同时C、E组间也有显著性差异,E组结果好于C组。 4、NF-κB在胰腺组织中的表达结果:A组胰腺腺泡细胞核几乎无NF-κB表达,仅少量腺泡细胞胞浆可见表达,B组胰腺腺泡细胞核和胞浆可见NF-κB强表达明显强于其他各组。表达强度顺序:B组〉C组〉E组〉A组,D、B组无明显差异。 5、TLR4在胰腺组织中的表达结果:A组主胰管上皮及胰腺血管内皮细胞有表达,位于细胞胞膜及胞浆内,胰腺腺泡细胞胞浆有少量弱表达。B组表达阳性率显著高于其他各组。表达强度顺序:B组〉C组〉E组〉A组,D、B组无明显差异。 6、SAP大鼠NF-κB、TLR4的表达平均光密度值与相应大鼠胰腺病理评分相关分析结果:NF-κB和大鼠胰腺病理评分的相关系数为0.9360,P=0.000;TLR4和大鼠胰腺病理评分的相关系数为0.9065,P=0.000。提示NF-κB、TLR4的表达平均光密度值与大鼠胰腺病理评分呈显著的正相关关系。同时在控制评分后NF-κB和TLR4的相关系数为0.6009,P=0.009,说明两者呈一定程度的正相关。结论: 1、在SAP大鼠中NF-κB及TLR4表达均有明显增加,并呈一致性(r=0.6009),并且与胰腺病理损伤关系密切(rNF-κB=0.9360, rTLR4=0.9065),在SAP发病机制中具有重要的枢纽作用。 2、乌司他丁腹腔灌洗较本实验其他方法更能抑制淀粉酶、蛋白酶的激活,减轻TL R4、NF-κB的表达,从而降低TNF-α、IL- 1β的水平,减轻胰腺组织及全身的损害。 3、蛋白酶抑制剂腹腔灌洗治疗重症急性胰腺炎的方法简单、有效、可行。
【学位授予单位】：第三军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R576

【参考文献】