PERK参与重症急性胰腺炎大鼠脾淋巴细胞自噬和凋亡的作用及机制研究

发布时间：2020-05-28 22:59

【摘要】：目的:研究PERK参与重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠脾淋巴细胞自噬和凋亡的作用及其分子机制。方法:成年雄性SPF级SD大鼠50只,随机分为假手术组(SO组)、SAP组。SAP组大鼠采用5%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射法建立SAP模型,SO组大鼠仅翻动胰腺后关腹。SO组术后24h取材,SAP组术后6h、12h、18h、24h取材,HE染色观察胰腺组织病理损伤程度并进行评分,紫外分光光度计测定血清淀粉酶、脂肪酶,透射电镜观察大鼠脾淋巴细胞自噬体,流式细胞术检测脾淋巴细胞凋亡率和自噬率,RT-qPCR、Western blot检测脾淋巴细胞PERK、自噬相关基因(Beclin1、LC3)及凋亡相关基因Caspase-3mRNA及蛋白的表达水平,ELISA法检测大鼠血清自噬相关基因(Beclin1、LC3)及凋亡相关基因Caspase-3含量。结果:(1)与SO组相比,SAP组PERK的表达水平随时间延长逐渐升高,在各时间点均有统计学意义(P0.05)。(2)与SO组相比,透射电镜下脾淋巴细胞自噬体数量随时间延长逐渐增加;与SO组相比,SAP组脾淋巴细胞自噬率随时间延长逐渐升高,在各时间点均有统计学意义(P0.05);SAP组脾淋巴细胞凋亡率较SO组升高(P0.05),6h达高峰,随后下降,但仍高于SO组。PERK蛋白水平与淋巴细胞自噬率、凋亡率呈正相关(P0.05),随着PERK表达水平升高,脾淋巴细胞自噬率、凋亡率升高,提示SAP时PERK信号通路激活,使淋巴细胞自噬、凋亡增加。(3)与SO组相比,自噬相关基因(Beclin1、LC3)表达明显升高,在各时间点均有统计学意义(P0.05),脾淋巴细胞PERK蛋白水平与脾淋巴细胞自噬相关基因(Beclin1、LC3)蛋白水平呈正相关(P0.05),随着PERK表达水平升高,脾淋巴细胞自噬相关基因(Beclin1、LC3)蛋白表达水平升高,可能是其脾淋巴细胞自噬增强的重要原因;与SO组相比,凋亡相关基因Caspase-3表达水平明显升高,在各时间点均有统计学意义(P0.05),脾淋巴细胞PERK蛋白水平与脾淋巴细胞凋亡相关基因Caspase-3蛋白水平呈正相关(P0.05),随着PERK表达水平升高,脾淋巴细胞凋亡相关基因Caspase-3蛋白表达水平升高,可能是其脾淋巴细胞凋亡增强的重要原因。结论:(1)SAP大鼠脾淋巴细胞PERK表达水平明显升高,淋巴细胞自噬及凋亡增加。(2)PERK高表达,使自噬相关基因Beclin1、LC3及凋亡相关基因Caspase-3表达水平升高,可能是SAP脾淋巴细胞自噬、凋亡增强的重要原因。
【图文】：

SO 组胰腺腺泡结构基本完整，偶见水肿和炎性细胞浸润；SAP 组可见胰腺腺泡水肿及结构破坏，间质内可见红细胞渗出、炎症细胞浸润，，小叶间隔及腺泡间隔增宽，腺泡细胞有广泛空泡化、坏死，脂肪液化，偶见腺泡消失，且随着时间的延长，病变呈进行性加重（图 2-1）。根据 Schmidt 评分标准，与 SO 组相比，SAP 组各时间点胰腺病理组织学评分有显著性增加（P＜0.05）（图 2-2）。

与 SO 组相比aP＜0.05图 2-2 大鼠胰腺病理损伤评分Figure 2-2 Rat pancreatic pathological injury score酶和脂肪酶水平粉酶和脂肪酶水平较低；SAP 组血清淀粉酶和脂肪h 有统计学意义（P＜0.05）；SAP 组与 SO 组相比0.05）（表 2-1）。表 2-1 大鼠血清中淀粉酶和脂肪酶水平（U/L）（ ±s）Table 2-1 Amylase and lipase levels in rat serum (U/L) ( ±s)
【学位授予单位】：右江民族医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R576

【参考文献】

相关期刊论文 前5条

1 杜奕奇;李维勤;毛恩强;;中国急性胰腺炎多学科诊治共识意见[J];临床肝胆病杂志;2015年11期

2 刘奔;潘频华;;细胞自噬与脓毒症[J];中国感染控制杂志;2014年12期

3 周振华;张树友;;急性胰腺炎分子学发病机制的研究进展[J];现代医药卫生;2014年08期

4 余杨梓;傅强;李静;;免疫失衡在重症急性胰腺炎患者继发全身感染中的作用[J];天津医药;2012年07期

5 关丽英;许彩民;潘华珍;;内质网应激介导的细胞凋亡[J];生物化学与生物物理进展;2007年11期

本文编号：2685961