骨髓间充质干细胞对溃疡性结肠炎小鼠肠黏膜修复作用的探究

发布时间：2020-05-30 19:30

【摘要】：目的:探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)对溃疡性结肠炎小鼠模型中受损肠黏膜的修复作用。方法:BALB/C雌性小鼠随机分为正常对照组、实验组1(DSS+PBS)、实验组2(DSS+BMSCs),正常对照组正常饮水,其余2组每天饮用4%的葡聚糖硫酸钠(Dextran sodium sulfate,DSS)水溶液,造模第8天正常对照组和实验组分别用磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS)、BMSCs进行干预治疗,并于BMSCs注射后第2、5、9、12、16天处死各组5只小鼠,留取标本。根据小鼠的临床表现进行疾病活动指数评分,以评估疾病的活动情况;HE染色检测小鼠肠黏膜的损伤及炎症浸润情况,免疫组化、酶联免疫吸附剂实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、实时荧光定量(Quantitive Real-time,qRT)-PCR分别检测结肠组织中间质表皮转化因子(c-Mesenchymal epithelial transition factor,c-Met)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、肝细胞生长因子激活因子(hepatocyte growth factor activator,HGFA)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、干扰素(Interferon,IFN)-γ和结肠组织紧密连接蛋白的表达。结果:实验组2及实验组1小鼠DAI评分和结肠组织学损伤评分均高于正常对照组,且干细胞干预第9天、12天实验组2评分低于实验组1(P0.05);实验组1小鼠结肠组织中c-Met、EGFR、PCNA表达明显低于正常对照组和实验组2;BMSCs可影响结肠黏膜组织中紧密连接蛋白的表达;除干细胞注射后第2、9天外,实验组2 HGF的表达均明显高于实验组1(P0.05);HGFA在实验组1中表达先下降后上升,但其在三组间的表达无明显规律性差异;实验组2 IFN-γ的表达明显低于实验组1(P0.05),而TNF-α仅于实验后期低于实验组1;结论:BMSCs对DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠模型的肠黏膜损伤有促进修复作用。
【图文】：

小鼠,血便,粪便,棉签

棉签均置于酒精灯上加温片刻，待冷却（约 1min）%联苯胺冰醋酸溶液及 3%过氧化氢液各 2 滴，计时，观察颜色及深浅，然后判定结果。见表 1，图 1表 1 粪便潜血检测Table1 assessment for occult blood in faeces变化变化快慢结果判定或深绿色立即出现最强阳性反应（++++）浅蓝后渐深蓝或深绿色 30s 内强阳性反应（+++）色 30s~1min 阳性反应（++） 1~2min 弱阳性反应（+）色 2~5min 痕迹反应（±）无变化 5min 以后阴性反应（-）涂粪棉签呈蓝色，而对照棉签颜色不变，为阳性反应；如两支棉签均呈蓝色，为假棉签均不变色，为阴性反应。A B

体重下降,情况,水样便,隐血

大便性状大便隐血/肉眼血正常正常松散隐血阳性稀便肉眼血便方法：联苯胺法，见表 1：1.正常大便：成型大便；2.松散大便：不粘附于肛门的呈肛门的呈稀水样便。浓度 DSS 喂养小鼠体重下降结果，，3%DSS 组造模时间长，7%DSS 组小鼠体重进行性下降养小鼠体重减轻较其他组平稳；且结合各组构建结肠炎所致肝损伤小鼠模型的药物浓度
【学位授予单位】：桂林医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R574.62

【参考文献】