PDTC干预下大鼠急性酒精性肝损伤中NF-κB作用机制的研究

发布时间：2020-06-13 19:57

【摘要】： 目的：本研究通过短时期大量酒精灌胃的方法建立急性酒精性肝损伤动物模型,同时给予腹腔注射NF-kB阻断剂PDTC,探讨在PDTC干预下大鼠急性酒精性肝损伤中NF-kB的作用机制及对炎性介质表达的影响。方法： 1.Wistar大鼠(清洁级)60只随机分为三组,模型组、PDTC干预组和对照组。模型组给予55%酒精8g/kg.d,分二次灌胃,共14天,于第三天起再给予生理盐水腹腔注射；PDTC干预组于酒精灌胃第三天起,于酒精灌胃前30分钟给予PDTC腹腔注射,50mg/kg.d,余操作同模型组；对照组给予等量的生理盐水灌胃及腹腔注射。实验第7天和第14天末次灌胃及腹腔注射后12小时处死动物,心脏采血分离血清,采血后立即取肝组织用10%中性福尔马林固定。 2.利用全自动生化分析仪检测血清ALT和AST值,用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血清中NF-kB、TNF-α水平。肝组织常规石蜡包埋,切片做HE染色和免疫组化染色(SABC法),观察肝组织病理变化和NF-kB、TNF-α的表达和分布。结果： 1.大鼠血清ALT、AST值比较：实验第7天和第14天,模型组与对照组和干预组与模型组比较血清ALT值(P0.01)和AST值(P0.01)均有明显变化；模型组第7天与第14天比较血清ALT和AST值明显升高(P0.01)。 2.病理学检查： HE染色结果：实验第7天与第14天,对照组肝小叶结构正常；第7天模型组肝细胞肿胀,中央静脉周围肝细胞可见大小不等的脂肪变性,部分处可见点状坏死,炎症细胞浸润；第7天干预组肝细胞脂肪变性减轻,未见坏死,炎症细胞浸润减轻；第14天模型组肝细胞可见灶状坏死,炎症细胞浸润增多；第14天干预组偶见点状坏死,炎症细胞浸润增较模型组明显减少。 3.免疫组化染色结果 (1) NF-kB主要在中央静脉周围肝细胞呈阳性表达,实验第7天和第14天,模型组与对照组比较阳性面积百分比(P均0.01)明显增高,干预组与模型组比较阳性面积百分比(7天P0.05,14天P0.01)明显降低；模型组第14天与第7天比较面积百分比明显增高(P0.05) (2)TNF-α主要在中央静脉周围肝细胞呈阳性表达,实验第7天和第14天,模型组与对照组比较阳性面积百分比(P均0.01)明显增高；干预组与模型组比较阳性面积百分比(7天P0.01,14天P0.05)明显降低；模型组第14天与第7天比较面积百分比明显增高(P0.05) (3)肝组织中TNF-α的表达与NF-kB表达呈正相关(r=0.573,P0.05)。 4.大鼠血清NF-kB水平和TNF-α水平比较： (1)实验第7天和第14天,对照组与模型组和模型组与干预组比较血清NF-kB水平(P0.01)和血清TNF-α水平(P0.01)均有明显变化。实验第7天与第14天模型组比较血清NF-kB和TNF-α水平明显升高(P0.01)。 (2)实验第7天和第14天,模型组血清NF-kB和TNF-α水平呈正相关(r=0.874,P0.01：r=0.856,P0.01)。结论： 1、在大鼠急性酒精性肝损伤中PDTC能有效阻断NF-kB的活化； 2、在大鼠急性酒精性肝损伤中NF-kB和TNF-α在肝组织中的表达和血清中的含量都呈正相关关系； 3、NF-kB可通过激活TNF-α在大鼠急性酒精性肝损伤过程中发挥作用。
【图文】：

对照组

对照组7天NF.kBx100

PDTC干预下大鼠急性酒精性肝损伤中NF-κB作用机制的研究

模型组7天N田屯BX100
【学位授予单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R575

【参考文献】