急性肝损伤小鼠体中移植细胞的动态分布研究

发布时间：2020-07-10 15:46

【摘要】：目的建立一种简便的方法以定量分析移植细胞在动物脏器中的动态分布情况,并且利用该方法比较人肺癌细胞系A549细胞和人脐带血单个核细胞(human umbilical cord blood mononuclear cells, huMNCs)在四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导的小鼠急性损伤肝脏中定植能力的差异,探讨huMNCs在急性损伤小鼠肝脏中定植能力。方法用羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(Carboxyfluorescin Diacetate Succinimidyl Ester, CFSE)标记活细胞,测定不同条件下荧光信号值与细胞数量间的相关性。采用CC1410mL/kg腹腔注射制作小鼠肝损伤模型,随机分为肝损伤A549移植组(A组),肝损伤huMNCs移植组(B组),正常小鼠A549移植组(C组),正常小鼠huMNCs移植组(D组)和肝损伤动物盐水对照组(E组)。用CFSE标记细胞,动物注射CC14后24h经脾脏缓慢注入CFSE染色的huMNCs或A549细胞悬液100ul,细胞数量5×106。对照组同法注入等体积生理盐水。各组动物分别于注射细胞后3h、6h、12h、24h处死,肝、脾、肺等脏器制成匀浆,取50u1测定荧光信号值,计算相应脏器样品所含染色细胞数,并换算成所占注入细胞总量的百分比。结果肝脏中染色细胞滞留百分比A、C组之间各时间点数据比较差异无统计学意义(t3=1.793, p3=0.147; t6=0.896p6=0.421; t12=0.070, p12=0.948; t24=1.136, p24=0.338)。A组间3h,24h(45.86%±0.90%,0.83%±0.09%)与B组(44.16%±0.57%,0.85%±0.07%)数据比较差异无统计学意义(t3=2.770, p3=0.0503; t24=0.309, p24=0.773)。 B组3h,24h (44.16%±0.57%,0.85%±0.07%)与D组(44.12%±6.03%,0.88%±0.07%)数据比较差异无统计学意义(t3=0.076, a=0.942; t24=0.397, p24=0.712)。A组6h,12h细胞滞留百分比(29.00%±0.58%；2.96%±±0.36%)低于B组(60.15%±1.54%,20.74%±0.97%),数据比较差异有统计学意义(t6=32.738, p6=0.00; t12=29.829, p12=0.00).B组6h,12h细胞滞留百分比(60.15%±1.54%,20.74%±0.97%)高于D组(15.74%±0.90%,7.56%0±1.91%),数据比较差异有统计学意义(t6=42.989, p6=0.00, t12=23.184, p12=0.00).脾脏染色细胞定植百分比各时间点各组间数据比较差异无统计学意义(tab3=0.990, tab6=0.238, tab12=1.874, tab24=1.955, tac3=1.151,tac6=0.159, tac12=0.103,tac24=1.099, tbd3=2.107, tbd6=2.082, tbd12=1.021, tbd24=1.444,p均0.05)肺脏染色细胞定植百分比各时间点各组间数据比较差异无统计学意义(tab3=0.922,tab6=0.301,tab12=1.078,tab24=0.500, tac3=0.764, tac6=0.029, tac12=0.805, tac24=1.224, thd3=0.513,tbd6=1.098, thd12=1.162, tbd24=0.707,p均0.05)。结论huMNCs能够在受损肝脏中有一定程度的定植,但定植时间短暂,细胞输入12小时后在肝脏中的滞留情况不再有差异。染色细胞在脾和肺中短暂滞留后迅速消散。
【学位授予单位】：浙江中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R575

【参考文献】