原发性胆汁性肝硬化患者外周血T细胞microRNA表达谱及其调控机制的研究

发布时间：2020-07-30 19:08

【摘要】： 本研究旨在探讨原发性胆汁性肝硬化中T细胞microRNA(miRNA)表达谱及其调控机制。首先采用芯片和定量PCR技术分析并验证原发性胆汁性肝硬化中T细胞miRNA的表达谱;然后培养自身抗原PDC-E2特异性T细胞,研究特定miRNA对其自身反应性的调控作用;接着建立原发性胆汁性肝硬化小鼠模型,研究特定miRNA对小鼠PBC样病变的调控作用;最后通过生物信息学预测和生物学实验验证,探讨特定miRNA可能的靶基因及其作用位点。结果表明,与正常对照组相比,PBC患者T细胞中有23个miRNA低表达,仅有2个miRNA高表达;miR-1et-7b、miR-17-5p、miR-20a和miR-346表达可抑制自身抗原特异性T细胞增殖和IFN-γ、TNF-α的分泌,而miR-129和miR-451可促进细胞增殖和IFN-γ、TNF-α的分泌;在小鼠中输入Ad-miR-17-5p或Ad-miR-346可延缓由poly I:C诱发产生的PBC样病变;miR-17-5p、miR-346的靶基因分别为TNFRSF21、BCL-6,作用位点分别为TNFRSF21 3'UTR区335-342位和BCL-63'UTR区576-583及893-900位。
【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R575.2
【图文】：

A.分离后T细胞;B.分离洗脱液中T细胞PBMC经过磁珠分离得到的CD3+T细胞，经流式细胞仪检测纯度达到96.3%。如图1一1所示，经磁珠分离后T细胞纯度达到963%，分离洗脱液中T细胞仅占0.3%，经磁珠分离所得到的T细胞完全符合后续的实验要求。 3.2RNA的纯度与浓度

%琼脂糖凝胶电泳鉴定总RNA的完整性

T细胞miRNA芯片杂交后的扫描图像

【引证文献】

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本文编号：2775957