细胞角蛋白8负调控NF-κB信号通路诱导结肠炎发生

发布时间：2020-07-31 21:35

【摘要】：NF-κB信号通路广泛参与了多种生物学过程的调控，包括细胞增殖、存活、凋亡、免疫反应、炎症等，该信号通路的异常活化可导致多种疾病。角蛋白CK8是中间纤维的组成成分，其过表达与肿瘤发生密切相关。前期我们发现CK8可抑制TNF诱导的NF-κB信号通路的活化，提示CK8是NF-κB通路的负调因子。本研究对CK8在负调控NF-κB通路中的作用及分子机制进行了深入研究，并探讨其负调NF-κB通路所介导的生理病理学意义。 本文首先引进了CK8-/-小鼠，并对其基因型及表达进行了鉴定。发现敲除CK8可导致小鼠发生严重的结肠炎伴随结肠增生，同时多脏器出现炎细胞浸润。同时，我们进一步利用CK8敲除小鼠从体内水平验证了CK8对NF-B通路的负调控作用。利用AOM+DSS诱导的结肠癌模型，评价了CK8敲低小鼠在结肠癌发生中的作用，结果表明CK8敲低对诱导剂更加敏感，肠系膜淋巴结中CD4+CD69+T细胞比例明显增多，提示CK8敲除可能在结肠癌发生过程中发挥重要作用。 我们进一步对CK8负调控NF-κB信号通路的作用机制进行了深入研究。利用碱性磷酸酶报告基因实验发现CK8可以剂量依赖的方式抑制TNF诱导的NF-κB信号通路活化；CK8过表达可抑制TNF诱导的IκB磷酸化的影响；EMSA实验证实CK8可降低NF-B的DNA结合能力；Realtime PCR实验证实过表达CK8抑制NF-κB下游靶基因如IL-1的表达。此外，还发现CK8对Toll样受体5（TLR5）的激动剂鞭毛蛋白CLB502诱导的NF-κB活化也有明显的抑制作用，并具有剂量依赖效应；进一步发现CK8对NF-κB通路的抑制作用发生在IKK复合体水平。我们还发现CK8可通过调控E3泛素连接酶对NEMO的泛素化修饰，进而实现对NF-κB的负调控作用。 为进一步探讨CK8负调控NF-κB通路的作用机制，构建了人CK8RNAi慢病毒载体，为后续实验奠定了基础。为验证CK8敲除小鼠表型的特异性，我们还进一步制备了小鼠CK8过表达慢病毒。 综上，本研究明确了细胞角蛋白CK8对NF-κB信号通路的负调控作用，揭示CK8抑制TRAF2与NEMO之间相互作用可能是其发挥作用的重要机制，同时发现CK8缺失可导致小鼠体内NF-κB信号通路异常活化，小鼠自发发生结肠炎伴随结肠增生。
【学位授予单位】：天津大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R574.62

【共引文献】

相关期刊论文 前10条

1 曹文波;莫赛军;柯少瑞;张宏波;杨胜利;;钙结合蛋白S100A8和S100A9在慢性炎症相关肿瘤发生中的调控作用[J];癌变.畸变.突变;2013年05期

2 王一;黎燕;沈倍奋;陈国江;;炎症:肿瘤的推进器[J];国际药学研究杂志;2014年01期

3 凌昊;赵霞;;Th17及相关细胞因子在哮喘中的作用研究[J];长春中医药大学学报;2014年05期

4 Hong-Mei Xu;;Th1 cytokine-based immunotherapy for cancer[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2014年05期

5 林凯璇;赵晓航;;氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸钠模型在炎症性肠病和癌形成物质的生物测定运用[J];转化医学杂志;2013年05期

6 汤楚华;牛忠英;;Th17细胞相关因子在口腔免疫系统中的作用[J];口腔生物医学;2014年01期

7 黄川;袁铿;;Th17细胞相关细胞因子与肿瘤[J];南昌大学学报(医学版);2014年01期

8 方絮;林晓萍;;IL-23/IL-17炎性轴与牙周炎关系的研究进展[J];口腔医学;2014年06期

9 杨景英;陈学利;吴文钦;曾今诚;徐军发;;白细胞介素-12家族与感染性疾病相关研究进展[J];临床检验杂志;2014年06期

10 王亚民;钱俊波;葛振明;樊锦河;仇建伟;赵程进;陆飞;施颖琦;刘春慧;;IL-23受体基因多态性与炎症性肠病疗效关系的研究[J];南通大学学报(医学版);2014年05期

相关会议论文 前2条

1 范胜军;李学军;;Layered signaling regulatory networks analysis of gene expression involved in malignant tumorigenesis of non-resolving ulcerative colitis via integration of cross-study microarray profiles[A];第十一届全国博士生学术年会（生物医药专题）论文集（中册，墙报P1-P24）[C];2013年

2 程晓蕾;陈宏;;Th17细胞与变态反应性疾病的研究现状[A];第六次全国中西医结合变态反应学术大会论文汇编[C];2013年

相关博士学位论文 前10条

1 刘东伯;塞来昔布抑制鼻咽癌细胞增殖的分子机制研究[D];华中科技大学;2013年

2 申玲玲;金荞麦抗类风湿性关节炎药理作用研究[D];华中科技大学;2013年

3 林婧;重症肌无力危象患者血清IL-17水平及其临床意义研究[D];华中科技大学;2013年

4 王少鑫;CUEDC2在结肠炎相关肿瘤中作用机制的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2013年

5 郭靓;炎性因子OSM诱导乳腺癌恶性演进的分子机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2013年

6 泰文娇;番荔枝酰胺衍生物FLZ的神经保护作用机制研究[D];北京协和医学院;2013年

7 张洪菊;CUEDC2在慢性粒细胞白血病细胞伊马替尼耐药中的作用[D];北京协和医学院;2013年

8 丁松明;肿瘤微环境不同成分在肝癌侵袭转移中的作用研究[D];浙江大学;2013年

9 张丽;半胱氨酸甲基化阻断NF-κB信号通路中对泛素链的识别[D];北京协和医学院;2013年

10 李楠;小鼠巨噬细胞S100A9/NF-κB/SAA3/miR-204环路在炎症相关性结肠癌发展中的作用[D];中南大学;2013年

相关硕士学位论文 前10条

1 王冬;核因子-κB在去甲斑蝥素诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡中的作用[D];河北医科大学;2013年

2 赵轶;白介素-6、23、17在鼻息肉中的相关性研究[D];山西医科大学;2013年

3 王海霞;HBV宫内感染胎盘组织TLR4及HBD-2的表达[D];广西医科大学;2013年

4 郝鑫;DNA微阵列筛查预测鼻咽癌患者预后基因的研究[D];广西医科大学;2013年

5 刘秉春;Th17/IL-17在金黄色葡萄球菌小鼠乳腺感染模型中的动态变化及功能初探[D];内蒙古大学;2013年

6 黄泓泰;两种G20株CA16病毒颗粒的生物学特性的分析[D];北京协和医学院;2013年

7 付婷;EB病毒转化淋巴母细胞中相关基因表达的检测与分析[D];南华大学;2013年

8 周璐;白氏文昌鱼IKK基因的克隆及其免疫功能分析[D];南京师范大学;2013年

9 马大鹏;mTOR在TLR信号通路中对前炎症细胞因子表达的调控机制研究[D];南华大学;2013年

10 王媛;Jagged-1抑制Th17细胞分化的机制初探[D];暨南大学;2013年

本文编号：2777034