乙肝病毒转基因小鼠对营养性脂肪肝炎更敏感

发布时间：2020-09-02 15:19

　　随着人们生活水平的不断提高,非酒精性脂肪肝已成为与病毒性肝炎、肝癌等疾病一起成为威胁人们肝脏健康的疾病之一。世界上约有1/4慢性乙肝患者患有与脂肪肝相关的疾病。利用缺少甲硫氨酸和胆碱的高脂饲料(MCD)可以诱发非酒精性脂肪性肝炎和转有乙肝表面抗原的转基因小鼠(HBs-Tg)可以在一定程度上模拟正常的人类乙肝病毒携带者,本研究建立了营养性的非酒精性脂肪性肝炎联合乙肝的小鼠模型来研究病毒感染对营养性脂肪性肝炎的影响。本研究采用缺乏甲硫氨酸和胆碱的高脂饲料喂养HBs-Tg小鼠建立稳定的脂肪性肝炎联合乙肝病毒的啮齿动物模型。本文检测了体重变化,通过H-E染色观察肝脏病理学的变化,利用油红O染色检测肝脏内脂肪堆积情况并用免疫组化方法观察肝脏细胞增殖现象。MCD可以引起不明原因的体重下降。研究发现MCD喂养可导致HBs-Tg小鼠肝脏内出现较多的大泡型脂肪泡(直径25μm)并且有较野生型C57/B6小鼠更多的脂肪堆积。此外,MCD喂养30天后HBs-Tg小鼠肝脏内可检测到更多的增殖细胞核抗原(PCNA),这可能是由于肝脏细胞损伤而造成的代偿作用的结果。所有结果表明HBs-Tg小鼠对MCD引起的营养性脂肪性肝炎较野生型小鼠更加敏感。本研究建立的非酒精性脂肪肝炎联合乙肝的啮齿动物模型为研究非酒精性脂肪肝疾病提供了一种新的动物模型。本模型成功在10天时引起肝脏内脂肪肝炎和肝细胞增殖。本模型将为研究慢性乙肝病毒性肝炎怎样影响非酒精性脂肪肝炎的领域中做出贡献。并且本研究证明了HBs-Tg小鼠对于MCD饲料造成的非酒精性脂肪肝更加的敏感。
【学位单位】：中国科学技术大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2009
【中图分类】：R575.1
【部分图文】：

发病机制,氧化应激反应,慢性疾病,多基因

第 1 章绪论多基因性，目前对于非酒精性脂肪肝的具体发病机制还不是十分清楚，但是研究者普遍认为肝脏内脂肪的过度堆积和氧化应激反应的升高在非酒精性脂肪性肝炎的形成过程中扮演了重要角色。1.2.1 “二次打击”理论1988 年，非酒精性脂肪肝致病机制的“2 次打击”假说被提出，在众多的理论中，“二次打击”理论(Day, 2002; Anstee and Goldin, 2006; Ma and Li, 2006;Namikawa et al., 2006; Yamazaki et al., 2007; Park, 2008; Musso et al., 2009; Syn etal., 2009; Tessari et al., 2009)是解释这种慢性疾病发病机制与发病进程的比较好的也是引用比较多的一个理论，虽然这个理论现在仍然面临许多挑战和质疑。

溶酶体,内质网,线粒体,脂肪酸

图 2 脂肪酸通过溶酶体、线粒体和内质网引起活性氧簇的增加离脂肪酸在肝脏内的过度堆积会引起溶酶体、线粒体和内质网产生，活性氧簇通过脂质过氧化而引起一系列的后续反应，如由于氧化致的细胞凋亡，星形细胞被活化进而促使胶原蛋白合成增多而导致及炎症反应等。游离的脂肪酸会增加肝组织的氧耗，使微粒体还原的脂质过氧化反应加强从而进一步加重肝损伤。低密度载脂蛋白合成或分泌障碍外界环境方面，饮食因素也是可以导致肝脏脂肪变性的：含有大量的日常饮食可以增加肝脏内脂肪的囤积和血浆中胰岛素的含量，引(Yki-Jarvinen, 2005; Cave et al., 2007)，同时也可影响线粒体的功能

折线图,小鼠,饲料,野生型

而喂食标准饲料的HBs-Tg小鼠则体重一直稳步上升（图3A）。我们比较了每只野生型、HBs-Tg 小鼠喂食 MCD 饲料后各自体重下降的绝对值，发现 HBs-Tg 小鼠与野生型小鼠体重下降程度无显著性差异（图 3B）。图 3 喂食 MCD 饲料后野生型 C57BL/6 小鼠与 HBs-Tg 小鼠均发生体重下降Note: (A) 喂食 MCD 饲料与标准饲料后随时间变化的两种小鼠的体重折线图。（B）喂食 MCD饲料与标准饲料后，四组实验组中每只鼠的体重增加与减少的绝对值。体重变化数值均为平均值，每组小鼠数量为 5 只。

【引证文献】