外源性转化生长因子-β1对肝星状细胞中Smad3和Smad7早期表达的影响

发布时间：2020-09-03 20:48

　　 目的探讨外源性TGF-β1对大鼠肝星状细胞系(HSC-T6)信号通路中相关蛋白的影响，为抑制TGF-β1诱导的肝纤维化提供实验依据。 方法（1）HSC-T6培养基中加/不加外源性TGF-β1(10ng/ml)，诱导2h后应用RT-PCR法检测TGF-β/Smad信号通路中各组蛋白mRNA的表达；（2）选用同样的方法检测加入外源性TGF-β1后不同时间点Smad7mRNA的表达；（3）将阴性对照质粒（ctrl）、Smad3小干扰质粒（siRNA-Smad3）分别转染HSC-T6，各组再根据加/不加外源性TGF-β1分为(+)组和(-)组，RT-PCR法检测Smad3、Smad7mRNA的表达；（4）Western印迹法分析外源性TGF-β1对不同时间点Smad3、Smad7蛋白表达的影响。 结果（1）外源性TGF-β1能诱导TGF-β/Smad信号通路中Smad7mRNA的高表达（2.990±0.101，t=-33.962，P=0.001），但对TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ、Smad3、Smad4、Smad6mRNA的表达均无明显影响（均P＞0.05）；（2）外源性TGF-β1处理HSC-T6后，Smad7mRNA的表达迅速增高，于2h达峰值，为0h的2.99倍，随后开始逐渐下降，Smad7的表达量与0h相比均无明显变化（均P＞0.05）；（3）与阴性对照组相比，siRNA-Smad3组Smad3mRNA的表达明显下降（0.532±0.169，t=4.810，P=0.041），同时siRNA-Smad3（-）组Smad7mRNA的表达较ctrl（-）组明显降低，siRNA-Smad3（+）组Smad7mRNA的表达较ctr（l+）组也明显降低（F=9.787，P=0.02）；(4)不同时间点Smad3蛋白表达水平均无明显变化（均P＞0.05）；Smad7蛋白表达与PCR的结果一致，呈时间依赖。 结论外源性TGF-β1可诱导HSC-T6中Smad7早期短时高表达;Smad3可能是外源性TGF-β1诱导Smad7表达的关键调节因子，TGF-β1通过活化Smad3调节Smad7的表达。
【学位单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2013
【中图分类】：R575.2

【共引文献】

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