Wnt1、β-catenin及LGR5在慢性浅表性胃炎中的表达

发布时间：2020-09-15 14:10

　　 目的:Wnt/β-catenin信号通路是经典的信号通路,其不仅可以调控和影响干细胞的自我更新和分化,还参与细胞增殖、分化、运动及凋亡等一系列过程,其异常激活或基因的异常表达与肿瘤发生发展紧密联系,Wntl作为Wnt大家族中的成员之一,在整个通路中它充当启动因子,研究证实Wnt1与多种肿瘤的发生密切相关,β-catenin,一种Mr 92,000蛋白,对钙粘着蛋白为基础的上皮细胞粘附起作用,同时也是Wnt信号的主要调节物,其异常表达与肿瘤患者不良预后相关。Lgr5(leucine-rich repeat-containing g-protein coupled receptor 5)又名GPR49,属于G蛋白耦联受体家族,是最新发现的一种Wnt通路的靶基因,而且还是一种人类潜在的结肠癌干细胞标志物,已经有研究表明lgr5在不同肿瘤组织中都大量表达,如食管癌、肝癌、结肠癌、基底细胞癌及卵巢癌等等,慢性浅表性胃炎(chronic superficial gastritis,CSG)是多种诱因引起的慢性胃粘膜炎症,属于消化系统最普遍的疾病之一,治疗不及时或治疗不佳极易进一步发展为慢性萎缩性胃炎甚至发生癌变,本研究通过建立大鼠慢性浅表性胃炎的模型,观察Wnt1、β-catenin及lgr5在大鼠慢性浅表性胃炎胃组织中表达情况,便于在早期发现其与胃癌发展的相关性,起到早期发现并预防胃炎向胃癌进一步发展。方法:1建立动物模型:随机选取30只成年雄性7周龄Wistar大鼠进行编号、称重,按随机数字表顺序分为3组,即空白组,对照组、模型组,每组10只,空白组:不做任何处理,正常饲养。对照组:0.9%生理盐水每日10ml/kg自由饮用6个月。模型组:0.02%氨水自由饮用(现配),饥饱失常(进食2天,禁食1天)。2造模成功后,将大鼠麻醉处死,采用HE染色,免疫组化、western blot和RT-PCR检测各组中Wnt1、β-catenin以及lgr5的蛋白及基因的表达水平。结果:1 HE染色结果空白组和对照组显示为正常腺胃组织,未见异常改变,模型组胃窦粘膜固有膜、粘膜肌及粘膜下大量炎细胞浸润。2 Western blot结果:在蛋白水平Western blot进一步验证表明模型组中Wnt1、lgr5蛋白表达较空白组显著增高(P0.05),但空白组和对照组间表达量差异不显著,无统计学意义(P0.05)。3免疫组化结果:Wnt1、β-catenin及Lgr5免疫阳性产物染色结果:Wnt1及Lgr5阳性产物主要定位于细胞的胞质和胞浆中,空白组和对照组组免疫阳性产物表达量较低,两者之间差异不显著,模型组表达量较正常组和盐水组显著增加(P0.05),β-catenin的染色显示空白组和对照组免疫阳性产物表达量较高,两者之间无显著差异(P0.05),模型组表达量较空白组和对照组显著减少(P0.05)。4 RT-PCR结果:与空白组与对照组相比,模型组中Lgr5m RNA表达量增加(P0.05),而空白组和对照组组间差异不显著,无统计学意义(P0.05)。结论:1 Wnt/β-catenin信号通路中代表分子的异常表达或通路异常激活与肿瘤发生发展密切相关,Wnt1及lgr5在慢性浅表性胃炎组织中的表达量均高于对应的空白组及对照组,而β-catenin表达为模型组较正常组及对照组偏低,提示Wnt通路在炎性刺激的作用下可能已经激活。2 Lgr5是Wnt通路的一种靶基因,与肿瘤的发生发展密切相关,在我们研究中模型组中lgr5表达明显高于空白组和对照组,所以我们推测持续的炎症刺激Lgr5表达增加,Lgr5也可能为一种炎性促肿瘤重要因子。
【学位单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2015
【中图分类】：R573.31

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本文编号：2819063