肢体缺血预处理对肝硬化兔肝脏缺血再灌注损伤的影响

发布时间：2020-09-25 21:40

　　 [目的] 肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)是造成肝脏术后肝衰竭或肝脏移植术后移植肝脏无功能的主要原因之一。如何预防肝脏缺血再灌注损伤成为了目前研究的热点与难点,而临床肝癌切除术或者肝脏移植术患者一般都伴有肝硬化,如何预防伴有肝硬化肝脏缺血再灌注损伤更具有现实意义。本研究拟探讨术前无创的肢体缺血预处理(LIPC)对肝硬化兔肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)的影响。 [方法] 1.造模及分组选取新西兰兔32只,采用500mL/L的CCl4-橄榄油溶液0.3mL/kg颈背部皮下注射法制造兔肝硬化模型。造模阶段中,因CCl4急性中毒死亡2只。造模12周后,从剩下的30只肝硬化兔中随机选2只,在全麻下开腹,并切取小块肝组织,制作病理切片,观察肝硬化病理改变,明确肝硬化兔模型成功建立。 2.干预 ◎假手术组(sham group,S组)：开腹仅分离肝蒂、但是控制开腹时间为2.5h。(无缺血再灌注损伤处理也无保护性干预) ◎缺血再灌注损伤组(ischemia/reperfusion group, I/R组)：开腹分离肝蒂,阻断入肝血流30min、开放2h。 ◎肝脏缺血预处理组(ischemic preconditioning group, IPC组)：开腹分离肝蒂,阻断入肝血流10min、开放10min后再次阻断入肝血流30min、开放2h。 ◎肢体缺血预处理组(limb ischemic preconditioning group, LIPC组)：手术前24h采用压脉；带捆扎兔单侧后肢(后肢皮肤呈紫色、股动脉搏动消失)5min、开放5min,重复3次。开腹分离肝蒂,阻断入肝血流30mmin、开放2h。3.指标检测比较各组肝硬化兔干预后血清ALT、AST改变以及肝组织中ALT、AST、MDA ET-1改变水平。比较各组实验后肝硬化兔TNF-α改变水平。 [结果] 1.从大体来看,IR组、IPC组、LIPC组的肝脏病理损伤程度较S组重,IPC组及LIPC组的病理改变较相似,但是与I/R组相比较,损伤均较轻。 2.相对于S组,IR组、IPC组、LIPC组的兔肝脏都出现了不同程度的损伤,ALT、AST、 MDA、SOD、TNF-α、ET-1等指标都出现了不同程度的改变,IPC组、LIPC组与IR组相比损伤减轻,各项指标均存在明显差异(P0.05),IPC组与LIPC组两组之间差别并不显著(P0.05),两者损伤程度相似。 [结论] 本研究证实了肢体缺血预处理能够缓解肝硬化兔肝脏缺血再灌注损伤。目前,肢体缺血预处理的保护作用机制仍不太明确,本研究显示其机制可能与增强SOD活力、清除氧自由基、减少ET-1释放,改善肝脏的微循环、减少TNF-α释放有关。
【学位单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2013
【中图分类】：R575.2
【文章目录】：
目录
摘要
Abstract
前言
第一部分研究背景与立项依据
    1 肝脏缺血再灌注损伤
        1.1 定义及机制
        1.2 肝脏血供生理特点
        1.3 防治措施进展
    2 造模
第二部分实验研究
    1 材料和方法
        1.1 实验动物
        1.2 主要试剂及配置
        1.3 主要仪器设备
    2 实验方法
        2.1 造模
        2.2 分组与干预
        2.3 留取血标本、肝组织标本
        2.4 制备肝组织匀浆
        2.5 观察指标与指标测定
    3 统计学分析
    4 实验结果
        4.1 实验干预前各组兔体重水平及血清ALT、AST基线对比
        4.2 数据正态性检验结果
        4.3 实验干预后各组肝硬化兔病理改变
        4.4 实验干预后各组肝硬化兔血清ALT、AST变化
        4.5 实验干预后各组肝硬化兔肝组织ALT、AST变化
        4.6 实验干预后各组肝硬化兔肝组织SOD变化
        4.7 实验干预后各组肝硬化兔肝组织MDA变化
        4.8 实验干预后各组兔肝组织ET-1表达变化
        4.9 实验干预后各组肝硬化兔肝组织免疫组化TNF-α变化
    5 讨论
        5.1 肝硬化兔模型的建立与评价
        5.2 肢体缺血预处理保护作用时间窗
        5.3 肢体缺血预处理保护机制探讨
    6 结论
    7 不足与展望
参考文献
攻读硕士学位期间取得的学术成果
致谢

【参考文献】