脂联素及其受体在各型慢性乙型肝炎患者肝组织的表达和意义

发布时间：2020-11-05 23:25

　　 目的:乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)感染呈世界性流行,每年约有100万人死于HBV感染所致的肝硬化、肝衰竭和肝细胞癌。研究发现,在急、慢性HBV感染过程中,都存在以促炎和抗炎细胞因子失衡为特征的炎症损伤过程。脂联素是近年发现的一类具有保护作用的脂肪细胞因子,其主要作用为调节能量代谢、提高胰岛素的敏感性、抗炎和抗肝纤维化作用。研究证实非酒精性脂肪性肝炎( Non-alcoholic Steatohepatitis,NASH)患者血清脂联素水平降低,并与肝脏炎症坏死、脂肪变和纤维化相关。但脂联素与慢性HBV感染的关系,及其对慢性乙型肝炎(Chronic Hepatitis B,CHB)预后、转归影响尚无确切报道。 本研究通过检测各型慢性乙型肝炎患者血清脂联素水平,结合肝组织脂联素、脂联素受体2 mRNA和蛋白的表达,以探讨脂联素和脂联素受体2在各型慢性乙型肝炎发病过程中的变化特点及临床意义。 方法:收集2009年01月-2010年12月我院门诊和住院CHB(中度)、乙型肝炎肝硬化(Liver Cirrhosis,LC)、慢性重型乙型肝炎(Chronic Severe Hepatitis B,CSHB)患者各20例。诊断均符合2005年中国《慢性乙型肝炎防治指南》和2006年中国《肝衰竭诊疗指南》标准。选择同时期本院正常健康体检者20名做为血清学健康对照。 应用全自动化分析仪检测患者门诊首日或入院次日空腹血糖(Fasting Blood Glucose, FBG)、血清胆固醇(Cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride, TG)、白蛋白(Albumin)、丙氨酸氨基转移酶(Alanine Aminotransferase,ALT)、总胆红素(Total Bilirubin,TBiL)、凝血酶原活动度(Prothrombin Activity,PTA)水平;酶联免疫法检测HBV血清学标志物:HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb;定量PCR分析检测血清HBVDNA载量。检测抗-HAV、抗-HCV、抗-HEV、抗-HIV,以除外其他嗜肝病毒及HIV感染。 应用双抗体夹心酶联免疫吸附法(Enzyme Linked ImmunosorbentAssay,ELISA)检测血清脂联素水平,严格按照说明书进行操作。 HE染色观察肝组织普通病理变化,Masson三重染色观察肝组织纤维化程度。采用Power VisionTM二步法对肝组织进行脂联素和脂联素受体2免疫组织化学染色,棕黄色着色为阳性表达,用多功能病理图象分析仪测定脂联素和脂联素受体2表达面积百分比,每张片子取中央和四周五个区域,20倍物镜下计算平均面密度(阳性面积与统计场面积百分比)。 逆转录聚合酶链反应(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)检测肝组织脂联素和脂联素受体2 mRNA的表达。 应用SPSS17.0统计软件对实验数据进行分析。 结果: 1各组患者人口学与生化学指标的比较 三组不同类型的慢性乙型肝炎患者在年龄、性别构成比、体重指数(Body Mass Index,BMI)、TC、TG均无统计学差异(P0.05)。与正常对照组相比,CHB组、LC组和CSHB组患者血清ALT、TBiL渐次升高,白蛋白、PTA逐渐下降,尤其以CSHB组变化显著。 2各组患者血清脂联素水平的变化 CSHB组(0.821±0.149)和LC组(0.718±0.090)均较正常对照组(0.587±0.147)血清脂联素水平明显升高,F=13.296,P0.05。CHB组(0.616±0.126)与正常对照组(0.587±0.147)比较差异无统计学意义(P0.05)。 3肝组织普通病理学的变化 正常对照组HE染色显示:肝细胞索以中央静脉为中心呈放射状排列,细胞形态正常,肝板结构完整。Masson染色:肝窦、中央静脉周围及汇管区未见纤维组织沉积;CHB患者HE染色显示:小叶内可见点灶状肝细胞变性、坏死,坏死灶及肝窦内以淋巴细胞为主的炎性细胞浸润,汇管区扩大,部分界板损伤。Masson染色可见:扩大汇管区内轻重不等的纤维组织沉积;LC患者HE染色突出表现为:肝板排列紊乱,假小叶形成。汇管区大小不一,可伴有程度不等的炎细胞浸润及界面炎。Masson染色显示:纤维间隔彼此交叉、连接,分割包绕正常肝细胞形成假小叶结构;CSHB患者HE染色表现为:肝细胞大块、亚大块状坏死,坏死区细胞结构脱失,伴大量炎性细胞浸润,部分坏死区可见残存和/或再生肝细胞岛,小胆管增生,可见胆栓。Masson染色显示:小叶结构紊乱不清,坏死区内纤维支架塌陷,周围组织可见大量胶原纤维增生。 4肝组织脂联素和脂联素受体2 mRNA表达的变化 与正常对照组(0.091±0.018)(0.075±0.016)相比,三组不同类型的慢性乙型肝炎患者脂联素和脂联素受体2 mRNA表达均明显升高,且以CHB0.123±0.019)(0.106±0.018)组、LC(0.196±0.017)(0.167±0.016)组、CSHB(0.245±0.028)(0.223±0.020)组顺序依次递增,各组间比较差异均有统计学意义。F值分别为45.675和63.386,P值均小于0.05。 5肝组织脂联素和脂联素受体2蛋白表达部位与强弱的变化 正常肝组织仅可见少量脂联素表达于肝细胞浆,随着CHB向LC、CSHB进展,脂联素表达逐渐增多。对比观察脂联素表达部位发现,CHB和LC组,脂联素主要表达在肝细胞胞浆。CSHB患者脂联素主要表达在肝窦间质细胞,在肝细胞少量表达。肝组织脂联素受体2表达量特点与脂联素变化一致,但表达部位均在肝细胞浆。对正常对照组(4.044±0.815)(2.804±0.622)、CHB组(5.545±0.613)(4.775±0.458)、LC组(6.553±0.614)(5.678±0.539)和CSHB组(8.482±0.772)(7.654±0.272)脂联素和脂联素受体2蛋白表达进行统计学检测,差异具有统计学意义。F值分别为45.675和63.386,P值均小于0.05。 6相关性分析 CHB组肝组织脂联素mRNA和蛋白水平与肝脏炎症评分正相关,相关系数为r =0.745、r =0.891,P值均小于0.05。CSHB组:肝组织脂联素mRNA和蛋白水平与ALT正相关,相关系数为r =0.702、r =0.583, P值均小于0.05。与白蛋白负相关,相关系数为,r = -0.683、r = -0.641,P值均小于0.05。 CHB、LC和CSHB患者血清脂联素水平、肝组织脂联素mRNA和蛋白表达水平与血清HBVDNA水平均无相关,相关系数分别为r=-0.094、r=-0.131、r=-0.014、r=-0.254、r=-0.349、r=0.380、r=0.189、r=-0.302、r=-0.195,P值均大于0.05。 结论: 1血清脂联素水平在CHB组、LC组和CSHB组患者顺序依次升高,提示血清脂联素水平可以作为一个肝病严重程度的预测指标。 2肝组织脂联素mRNA和蛋白水平与CHB患者肝脏炎症评分、LC患者肝脏纤维化评分和CSHB患者血清ALT水平均为正相关,与CSHB患者白蛋白负相关,提示脂联素在各型慢性乙型肝炎疾病进展过程中发挥重要作用。 3脂联素在正常肝细胞胞浆少量表达;CHB和LC患者,脂联素主要表达肝细胞胞浆;CSHB患者,脂联素主要表达在肝窦间质细胞,肝细胞胞浆少量表达。 4血清和肝组织脂联素与CHB、LC和CSHB患者血清HBV DNA水平无相关性,提示脂联素对HBV DNA的复制和清除无明显影响。
【学位单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2011
【中图分类】：R512.62
【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
前言
材料与方法
结果
附图
附表
讨论
结论
参考文献
综述 脂联素与慢性乙型肝炎的研究进展
    参考文献
致谢
个人简历

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相关期刊论文 前1条

1 ;肝衰竭诊疗指南[J];中华肝脏病杂志;2006年09期

本文编号：2872339