中药胃肠舒片促胃肠动力作用机制的实验研究

发布时间：2020-11-19 16:19

　　 [目的] 通过观察中药胃肠舒片对阿托品致胃肠动力障碍小鼠胃排空和肠推进、左旋精氨酸(L-Arg)致胃肠动力障碍大鼠胃肠激素分泌水平、大鼠胃肠平滑肌细胞内NO释放及eNOS mRNA表达的影响,从不同层次、不同角度逐步深入地探讨其促胃肠动力的作用机制。 [方法] 实验一选择标准清洁级昆明种小白鼠50只,随机分为空白对照组、阿托品模型组、胃肠舒+阿托品组、西沙必利+阿托品组、木香顺气丸+阿托品组。空白对照组和阿托品模型组给生理盐水,其余各组分别用等容积的受试药液灌胃,连续5d,禁食18h后,于第六天空白对照组腹腔注射生理盐水,其它组均腹腔注射硫酸阿托品注射液致胃肠动力障碍动物模型,以葡聚糖蓝(BD)2000为标记物,观察胃排空率和肠推进率。 实验二选择标准清洁级SD大白鼠40只,随机分为正常对照组、L-Arg模型对照组、L-Arg加胃肠舒组、L-Arg加西沙比利组。除正常对照组外,其余三组腹腔注射L-Arg制备胃肠动力障碍动物模型。正常对照组给生理盐水灌胃,其余各组分别给等容积的受试药物灌胃。腹主动脉采血,放射免疫法测定血浆MTL、SP、SS。 实验三组织块法原代培养胃肠平滑肌细胞,鉴定成功后,取对数生长期的第三代传代培养的胃肠平滑肌细胞,随机分为胃肠舒大、中、小剂量组,西沙必利组和正常对照组。正常对照组等量培养基干预,其余各组用相应受试药物干扰细胞24h,①流式细胞仪检测一氧化氮(NO)释放；②提取细胞总RNA,应用逆转录一聚合酶链式反应(RT-PCR)法,半定量分析内皮型一氧化氮合酶(eNOS) mRNA表达水平。 [结果] 1.阿托品模型组胃排空率和肠推进率均显著低于空白对照组(P0.01),中药胃肠舒片和西沙必利对阿托品所致胃肠动力障碍小鼠的胃排空和肠推进具有显著促进作用(PO.01)。 2. L-Arg模型对照组MTL、SP、SS含量均显著降低、与正常对照组比较有统计学意义(P0.01),用药后胃肠舒组血浆MTL、SP、SS水平显著升高,与L-Arg模型对照组比较有显著性意义(P0.05)。 3.胃肠舒大、中剂量组与正常对照组比较,胃肠平滑肌细胞NO释放的荧光强度明显减弱(P0.01,P0.05), eNOSmRNA表达水平显著降低(P0.01,P0.05)。 [结论] 中药胃肠舒片促胃肠动力作用机理可能是：①通过对抗阿托品对M受体的拮抗作用,增加胃肠道兴奋性神经递质乙酰胆碱(Ach)分泌,乙酰胆碱作用于M受体后,激活磷脂C (PLC)β偶联G蛋白,水解磷脂酰肌醇二磷酸,产生三磷酸肌醇(IP3)和甘油二酯(DAG), IP3作为第二信使可以使胞内钙离子(Ca2+)浓度升高,Ca2+信号系统引发一系列反应,使胃肠平滑肌收缩,从而促进胃肠动力。②通过调节血浆中胃肠激素的协调平衡而促进胃肠动力。③通过升高血浆MTL和SP含量,使胃肠平滑机细胞内Ca2+浓度增加,Ca2+信号系统引发一系列生理功能而促进胃肠平滑肌收缩效应。④通过抑制胃肠平滑肌细胞eNOS mRNA表达而抑制细胞内NO生成,进而抑制相关酶的活化,拮抗cGMP生成,使胞内Ca2+增多,Ca2+信号系统引发一系列生理功能而促进胃肠平滑肌收缩。
【学位单位】：滨州医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2011
【中图分类】：R285.5;R57
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
中英文词汇对照表
前言
课题研究依据
课题研究内容
第一部分 中药胃肠舒片对胃肠动力障碍小鼠胃排空及肠推进运动的影响
    材料和方法
    结果
    讨论
第二部分 中药胃肠舒片对胃肠动力障碍大鼠胃肠激素的影响
    材料与方法
    结果
    讨论
第三部分 胃肠舒对胃肠平滑肌细胞一氧化氮释放及内皮型一氧化氮合酶mRNA表达的影响
    材料与方法
    结果
    讨论
胃肠舒片促胃肠动力作用机制的实验研究总结
参考文献
综述论文
    参考文献
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致谢

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本文编号：2890216