克罗恩病患者接受第二次粪菌移植治疗的时机研究
发布时间：2020-12-03 10:31
背景与目的:克罗恩病（Crohn’s disease,CD）是一种肠道慢性非特异性炎性疾病,属于炎症性肠病范畴。近年来,肠道微生态成为治疗的新靶点。越来越多的证据表明,粪菌移植（Fecal microbiota transplantation,FMT）已经成为CD一种有前景的治疗选择。CD的疾病特征是临床缓解和复发交替出现,多次FMT治疗有利于维持患者长期临床缓解。但是,FMT治疗CD的有效频率目前仍不明确。本研究旨在评估使用第二次FMT维持活动期CD患者长期临床缓解的最佳时机。方法:本研究为随机、开放、单中心临床研究,纳入1870周岁至少接受过两次FMT治疗的活动期CD患者。患者签署知情同意书后,收集病史、人口学资料、体格检查、实验室检查等相关数据。经入选标准和排除标准筛选合格的受试者将接受长期随访,分别于FMT治疗前、治疗后第3天、第7天以及之后的每3个月的监测点对患者进行随访评估,同步对比患者在不同时间点的临床缓解率、临床有效率及安全性。使用16S rRNA基因测序技术分析9名患者及其各自供体的肠道菌群组成。使用核磁共振氢谱（nuclear magnetic...
【文章来源】：南京医科大学江苏省
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
研究设计的流程图
南京医科大学硕士学离纯化系统”（GenFMTer，法迈特公司,南京）来富集和纯化新鲜粪菌，此法为微滤加离心富集法（MicrofiltrationplusCentrifugation,MPC）。自 2014 年以所有粪菌制备过程均在 GMP（Good Manufacturing Practice）级别的实验室2）完成。一般程序主要包括微滤，离心，清洗，丢弃和稀释。我们提出了小时 FMT 方案（one-hourFMTprotocol）”，即从供体完成排便到实验室分离新鲜粪菌，再到输注到患者肠道的时间控制在一小时以内[20]。
图 3 经内镜肠道植管术（Transendoscopic Enteral Tubing,TET）。（A）鼻空肠 TET 途径概念图[30]；（B）结肠 TET 途径概念图[29]。4. 标本处理4.1 16S rRNA 基因测序和处理使用 QIAamp DNA Stool Mini 试剂盒从粪便样品中提取细菌 DNA。通过具有 HF 缓冲液的 Phusion 高保真 PCR 主混合物（NewEnglandBiolabs，England），使用用于V4-V5高变区的条形码引物对细菌16SrRNA基因序列进行PCR扩增。来自每个样品的产物以相等的摩尔比混合，然后使用 IlluminaMiSeq 平台按照标准 Illumina 测序方案进行测序。 序列读取通过使用 Trimmomatic（版本 0.35）和 FLASH 程序（版本 1.2.11）进行质量控制。使用软件：mothur（版本 1.33.3），UPARSE（使用版本 v8.1.1756）和 R（版本 3.2.3）的组合分析 16S rRNA 基因序列。操作分类单位（OTU）聚类在 97％的相似性和使用 UPARSE 管道进行过滤。使用 mothur 计算用于 -多样性分析的
【参考文献】：
期刊论文
[1]粪菌移植体系[J]. 张发明. 科技导报. 2016(20)
[2]Serum and urine metabolomic fingerprinting in diagnostics of inflammatory bowel diseases[J]. Tomasz Dawiskiba,Stanislaw Deja,Agata Mulak,Adam Zabek,Ewa Jawień,Dorota Pawelka,Miroslaw Banasik,Agnieszka Mastalerz-Migas,Waldemar Balcerzak,Krzysztof Kaliszewski,Jan Skóra,Piotr Bar,Krzysztof Korta,Kornel Pormańczuk,Przemyslaw Szyber,Adam Litarski,Piotr Mlynarz. World Journal of Gastroenterology. 2014(01)
[3]Fecal microbiota transplantation for severe enterocolonic fistulizing Crohn’s disease[J]. Fa-Ming Zhang,Hong-Gang Wang,Min Wang,Bo-Ta Cui,Zhi-Ning Fan,Guo-Zhong Ji. World Journal of Gastroenterology. 2013(41)
[4]炎症性肠病诊断与治疗的共识意见(2012年·广州)[J]. 胃肠病学. 2012(12)
本文编号：2896291
【文章来源】：南京医科大学江苏省
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
研究设计的流程图
南京医科大学硕士学离纯化系统”（GenFMTer，法迈特公司,南京）来富集和纯化新鲜粪菌，此法为微滤加离心富集法（MicrofiltrationplusCentrifugation,MPC）。自 2014 年以所有粪菌制备过程均在 GMP（Good Manufacturing Practice）级别的实验室2）完成。一般程序主要包括微滤，离心，清洗，丢弃和稀释。我们提出了小时 FMT 方案（one-hourFMTprotocol）”，即从供体完成排便到实验室分离新鲜粪菌，再到输注到患者肠道的时间控制在一小时以内[20]。
图 3 经内镜肠道植管术（Transendoscopic Enteral Tubing,TET）。（A）鼻空肠 TET 途径概念图[30]；（B）结肠 TET 途径概念图[29]。4. 标本处理4.1 16S rRNA 基因测序和处理使用 QIAamp DNA Stool Mini 试剂盒从粪便样品中提取细菌 DNA。通过具有 HF 缓冲液的 Phusion 高保真 PCR 主混合物（NewEnglandBiolabs，England），使用用于V4-V5高变区的条形码引物对细菌16SrRNA基因序列进行PCR扩增。来自每个样品的产物以相等的摩尔比混合，然后使用 IlluminaMiSeq 平台按照标准 Illumina 测序方案进行测序。 序列读取通过使用 Trimmomatic（版本 0.35）和 FLASH 程序（版本 1.2.11）进行质量控制。使用软件：mothur（版本 1.33.3），UPARSE（使用版本 v8.1.1756）和 R（版本 3.2.3）的组合分析 16S rRNA 基因序列。操作分类单位（OTU）聚类在 97％的相似性和使用 UPARSE 管道进行过滤。使用 mothur 计算用于 -多样性分析的
【参考文献】：
期刊论文
[1]粪菌移植体系[J]. 张发明. 科技导报. 2016(20)
[2]Serum and urine metabolomic fingerprinting in diagnostics of inflammatory bowel diseases[J]. Tomasz Dawiskiba,Stanislaw Deja,Agata Mulak,Adam Zabek,Ewa Jawień,Dorota Pawelka,Miroslaw Banasik,Agnieszka Mastalerz-Migas,Waldemar Balcerzak,Krzysztof Kaliszewski,Jan Skóra,Piotr Bar,Krzysztof Korta,Kornel Pormańczuk,Przemyslaw Szyber,Adam Litarski,Piotr Mlynarz. World Journal of Gastroenterology. 2014(01)
[3]Fecal microbiota transplantation for severe enterocolonic fistulizing Crohn’s disease[J]. Fa-Ming Zhang,Hong-Gang Wang,Min Wang,Bo-Ta Cui,Zhi-Ning Fan,Guo-Zhong Ji. World Journal of Gastroenterology. 2013(41)
[4]炎症性肠病诊断与治疗的共识意见(2012年·广州)[J]. 胃肠病学. 2012(12)
本文编号：2896291
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/xiaohjib/2896291.html
最近更新
教材专著
