miR-101调控mTOR信号通路介导自噬参与肝脏缺血/再灌注损伤的机制研究

发布时间：2020-12-05 10:55

　　目的:肝脏缺血/再灌注损伤（LIRI）是肝脏移植以及肝脏外科手术中常见的并发症,对肝脏外科手术的效果以及术后患者肝功能的恢复有着巨大的影响。多少年来,如何减少肝脏损伤,尽最大可能做到对肝脏的保护并且提高患者预后,一直是肝脏手术中研究的热点以及难点。近年来,对于LIRI具体机制的相关研究不断增多,然而尚未完全阐明。本研究通过探索小鼠LIRI中miR-101的表达情况以及细胞自噬活性的变化来探讨miR-101介导自噬在小鼠LIRI中的作用,进而揭示miR-101在LIRI中自噬调节的潜在功能和机制,以期为LIRI的临床治疗和研究提供一种新的思路。方法:建立小鼠肝脏节段性（70%肝叶夹闭）缺血以及再灌注损伤模型,血生化指标检测小鼠血清中转氨酶（ALT、AST）含量的变化,HE染色观察小鼠肝脏组织病理学损伤变化,TUNEL试剂盒检测小鼠肝脏细胞凋亡情况,免疫组化观察小鼠肝脏细胞增殖与凋亡情况,qRT-PCR检测各组miR-101、AMPK mRNA、mTOR mRNA 的变化情况,Western Blot 检测各组 AMPK、mTOR、p-mTOR、P62、Caspase-3 与 LC3 的表... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：90 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．１各组小鼠血清ＡＳＴ／ＡＬＴ水平??

时间的加长逐渐加重，与Ｓｈａｍ组相比，在再灌注１２?ｈ时损伤最为严重（尸＜０．００１?），??再灌注２４?ｈ时损伤有所缓解。通过Ｓｕｚｕｋｉ病理学评分量化了缺血／再灌注诱导的??肝损伤情况，结果差异有统计学意义（Ｐ＜〇．〇〇ｌ，见图１．２）。证明小鼠肝脏发生??缺血／再灌注后损伤情况随着再灌注时间的延长而不断加重，在再灌注１２?ｈ时病??理损伤最为严重，再灌注２４?ｈ由于肝脏部分细胞增殖，损伤又有所减轻。??Ｓｈａｍ?ＩＲ＝２ｈ?ＩＲ＝６ｈ?ＩＲ＝１２ｈ?ＩＲ＝２４ｈ??〇?１０．１??ｌ??０＾?＞．?＊＊＊??＾３?６－?丁?＊＊＊??ｆＬｉｉｌｉ??Ｗ?Ｓｈａｍ?ＩＲ＝２ｈ?ＩＲ＝６ｈ?ＩＲ＝１２ｈ?ＩＲ＝２４ｈ??与?Ｓｈａｍ?组相比：０．０５，＊＊Ｐ＜?０．０１，＊＊＊Ｐ＜?０．００１??图１．２各组小鼠肝脏病理学改变以及Ｓｕｚｕｋｉ病理学评分（ＨＥ，ｘ２００）??１．２．?３免疫组织化学检测各组ＰＣＮＡ以及Ｃａｓｐａｓｅ－３表达结果??免疫组化检测ＬＩＲＩ后肝细胞的增殖和凋亡情况发现，与Ｓｈａｍ组相比再灌??注各组增殖标志物ＰＣＮＡ的核内表达明显下降，在再灌注１２?ｈ表达降低最明显??（尸＜?０．００１），再灌注２４ｈ表达有所回升（Ｐ＜?０．０１）。与Ｓｈａｍ组相比，凋亡标志??物Ｃａｓｐａｓｅ－３的胞质表达在再灌注各组肝细胞中逐渐增加

核染为蓝色，结果示，与Ｓｈａｍ组相比再灌注各组凋亡细胞数量随着再灌注时间??的延长逐渐增加，其中再灌注１２ｈ时凋亡最为严重（尸＜０．００１），再灌注２４ｈ凋??亡有所减轻（尸＜０．０５，见图１．４）。通过ＴＵＮＥＬ的检测更进一步证实了随着再灌??注时间的延长凋亡逐渐增加。??１９??

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2899341