间充质干细胞的免疫调控在治疗肝衰竭中的作用及机制探讨
发布时间：2020-12-05 15:03
间充质干细胞（Mesenchymal stem cells,MSCs）是具有自我复制和多向分化潜能的一类多能干细胞。目前成人骨髓是MSCs的主要来源。由于骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells, BM-MSCs）获取须行骨髓穿刺术,给供者造成一定的痛苦,且BM-MSCs的增殖和分化潜能随着供者年龄的增大而下降,因此人们把目光投向了脐带间充质干细胞（umbilical cord mesenchymal stem cells, UC-MSCs）.本文通过对MSCs生物学特征、免疫学特性及其在临床上的初步应用,争取为临床治疗慢性肝衰竭找到一条有效的途径。本文第一部分首先建立从小鼠骨髓和从人脐带中分离纯化MSCs的方法,然后分别研究它们的生物学特征和免疫学特性。结果显示,两种来源不同MSCs,形态相似,小鼠BM-MSCs表达CD44,Sca-1,不表达CD45,CD34, CD11c,CD11b,H-2,I-A,而UC-MSCs表达CD73、CD59、HLA-A,B,C、CD44,不表达CD31、CD34、CD45、CD80、CD83、CD86、...
【文章来源】：苏州大学江苏省
【文章页数】：99 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
C57BL/6骨髓来源的间充质干细胞图1-1：为普通倒置显微镜下观察结果，放大倍数均为100×
图 1-2：C57BL/6 骨髓来源的间充质干细胞表面标志鉴定图 1-2 注：其中细线所示为同型对照的荧光强度，粗线所示为表面标志的荧光强度。结果显示 CD45，CD34， CD11c，CD11b，H-2，I-A 阴性，CD44，Sca-1 阳性3、小鼠 BM-MSCs 的细胞分化结果小鼠 BM-MSCs 经诱导第 14~20 天后分别向成脂细胞和成骨细胞分化。在成骨细胞中可见大小不一的红色颗粒（Alizarin Red S 染色）（图 1-3 B），提示有矿化基质沉积，而对照组（图 1-3 A）Alizarin Red S 染色阴性。成脂细胞中（图 1-3 D）可见胞浆内脂滴形成，油红-O 染色阳性，而而对照组（图 1-3 C）油红-O 染色阴性。
图 1-3：小鼠骨髓来源的间充质干细胞分化形态观察图 1-3 注：所有图片为普通倒置显微镜下观察结果，放大倍数均为 100×。图中显示细胞为第五代的小鼠骨髓来源的间充质干细胞. 脂肪分化为 Oil Red O 染色；成骨分化为 Alizarin Red S 染色。A 图及 B 图分别为成骨分化的对照组和成骨分化组. 图及 D 图分别为脂肪分化的对照组和脂肪分化组.第二节 人脐带间充质干细胞的分离、培养及生物学性状研究一、实验试剂和耗材1、材料与设备DMEM 高糖培养基 GIBICO 公司胎牛血清 FBS GIBICO 公司氯化钠 Amresco 公司
【参考文献】：
期刊论文
[1]慢性肝功能衰竭时骨髓间充质干细胞胞膜CXCR4的表达及影响因素[J]. 黄小平,秦爱兰,赵卫峰,江敏华,罗二平,吴绍宏,甘建和. 中国组织工程研究与临床康复. 2009(40)
[2]肝衰竭最新研究热点和展望[J]. 王宇明. 内科急危重症杂志. 2009(03)
[3]自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期肝硬化[J]. 王娟,邵丽春,郭庆,孔欣,朱丹,李晓惠. 中国组织工程研究与临床康复. 2007(46)
[4]肝衰竭诊疗指南[J]. 李兰娟. 中华内科杂志. 2006(12)
[5]介入治疗儿童先天性心脏病586例[J]. 王震,解启莲,张密林,高磊,额尔敦高娃,谭慧莲,刘凌,朱晓丽. 实用儿科临床杂志. 2006(19)
[6]脐血间质干细胞的基础研究和应用进展[J]. 曹勇,宋来君,杨波. 郑州大学学报(医学版). 2006(02)
[7]人MBL糖识别域在大肠杆菌中的表达、纯化及鉴定[J]. 卢晓,朱平,张丽芸,刘莹,陈政良. 免疫学杂志. 2005(06)
[8]人脐带血间充质干细胞体外诱导分化为心肌细胞的实验研究[J]. 汤天军,杨波,杨汉东,张有顺,胡礼仪,李东锋,张继红. 实用医学杂志. 2005(21)
[9]先天性心脏病介入治疗的严重并发症分析及其防治[J]. 蒋世良,黄连军,徐仲英,赵世华,凌坚,郑宏,张戈军,张岩,戴汝平,刘延玲,王云. 中国循环杂志. 2005(01)
[10]四氯化碳综合法诱导大鼠肝硬化模型方法的探讨[J]. 金峰,袁芳,薛建设,张捷,张志坚,余英豪. 福建医药杂志. 2003(05)
博士论文
[1]骨髓间充质干细胞移植对急性肝衰竭大鼠肠源性内毒素血症的治疗作用及机制研究[D]. 郝彦琴.山西医科大学 2010
本文编号：2899642
【文章来源】：苏州大学江苏省
【文章页数】：99 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
C57BL/6骨髓来源的间充质干细胞图1-1：为普通倒置显微镜下观察结果，放大倍数均为100×
图 1-2：C57BL/6 骨髓来源的间充质干细胞表面标志鉴定图 1-2 注：其中细线所示为同型对照的荧光强度，粗线所示为表面标志的荧光强度。结果显示 CD45，CD34， CD11c，CD11b，H-2，I-A 阴性，CD44，Sca-1 阳性3、小鼠 BM-MSCs 的细胞分化结果小鼠 BM-MSCs 经诱导第 14~20 天后分别向成脂细胞和成骨细胞分化。在成骨细胞中可见大小不一的红色颗粒（Alizarin Red S 染色）（图 1-3 B），提示有矿化基质沉积，而对照组（图 1-3 A）Alizarin Red S 染色阴性。成脂细胞中（图 1-3 D）可见胞浆内脂滴形成，油红-O 染色阳性，而而对照组（图 1-3 C）油红-O 染色阴性。
图 1-3：小鼠骨髓来源的间充质干细胞分化形态观察图 1-3 注：所有图片为普通倒置显微镜下观察结果，放大倍数均为 100×。图中显示细胞为第五代的小鼠骨髓来源的间充质干细胞. 脂肪分化为 Oil Red O 染色；成骨分化为 Alizarin Red S 染色。A 图及 B 图分别为成骨分化的对照组和成骨分化组. 图及 D 图分别为脂肪分化的对照组和脂肪分化组.第二节 人脐带间充质干细胞的分离、培养及生物学性状研究一、实验试剂和耗材1、材料与设备DMEM 高糖培养基 GIBICO 公司胎牛血清 FBS GIBICO 公司氯化钠 Amresco 公司
【参考文献】：
期刊论文
[1]慢性肝功能衰竭时骨髓间充质干细胞胞膜CXCR4的表达及影响因素[J]. 黄小平,秦爱兰,赵卫峰,江敏华,罗二平,吴绍宏,甘建和. 中国组织工程研究与临床康复. 2009(40)
[2]肝衰竭最新研究热点和展望[J]. 王宇明. 内科急危重症杂志. 2009(03)
[3]自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期肝硬化[J]. 王娟,邵丽春,郭庆,孔欣,朱丹,李晓惠. 中国组织工程研究与临床康复. 2007(46)
[4]肝衰竭诊疗指南[J]. 李兰娟. 中华内科杂志. 2006(12)
[5]介入治疗儿童先天性心脏病586例[J]. 王震,解启莲,张密林,高磊,额尔敦高娃,谭慧莲,刘凌,朱晓丽. 实用儿科临床杂志. 2006(19)
[6]脐血间质干细胞的基础研究和应用进展[J]. 曹勇,宋来君,杨波. 郑州大学学报(医学版). 2006(02)
[7]人MBL糖识别域在大肠杆菌中的表达、纯化及鉴定[J]. 卢晓,朱平,张丽芸,刘莹,陈政良. 免疫学杂志. 2005(06)
[8]人脐带血间充质干细胞体外诱导分化为心肌细胞的实验研究[J]. 汤天军,杨波,杨汉东,张有顺,胡礼仪,李东锋,张继红. 实用医学杂志. 2005(21)
[9]先天性心脏病介入治疗的严重并发症分析及其防治[J]. 蒋世良,黄连军,徐仲英,赵世华,凌坚,郑宏,张戈军,张岩,戴汝平,刘延玲,王云. 中国循环杂志. 2005(01)
[10]四氯化碳综合法诱导大鼠肝硬化模型方法的探讨[J]. 金峰,袁芳,薛建设,张捷,张志坚,余英豪. 福建医药杂志. 2003(05)
博士论文
[1]骨髓间充质干细胞移植对急性肝衰竭大鼠肠源性内毒素血症的治疗作用及机制研究[D]. 郝彦琴.山西医科大学 2010
本文编号：2899642
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