HucMSC-Ex调控巨噬细胞中IL-7的表达修复炎症性肠病的机制研究
发布时间：2020-12-09 21:34
目的:建立人脐带间充质干细胞来源的外泌体（hucMSC-Ex）修复DSS诱导的小鼠炎症性肠病（IBD）模型,明确hucMSC-Ex修复IBD的作用,探讨hucMSC-Ex通过下调巨噬细胞中IL-7的表达修复IBD的作用机制。方法:构建hucMSC-Ex修复DSS诱导BALB/c小鼠IBD模型。将雄性BALB/c小鼠随机分为3组,分别为阴性对照组、DSS诱导的小鼠IBD模型组和DSS+hucMSC-Ex组。每天称量小鼠体重、观察小鼠的粪便变化以及病理分析等评价IBD变化的指标;第11天处死小鼠,收集结肠、脾脏组织做进一步研究。观察小鼠的脾脏及结肠的大体观,提取RNA和蛋白等标本,采用QRT-PCR方法检测TNF-α、IL-1β、IL-6以及IL-10等mRNA的表达水平,H&E染色结果分析结肠粘膜和脾脏组织损伤程度,评价hucMSC-Ex修复炎症性肠病的效果。采用QRT-PCR和免疫组化检测iNOS和CD206在三组小鼠结肠和脾脏组织中的表达,分析hucMSC-Ex修复DSS诱导小鼠IBD时巨噬细胞浸润的数量以及分泌相关细胞因子的变化。通过western-blot、免疫组织化学和...
【文章来源】：江苏大学江苏省
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
HcuMSC-Ex的分析鉴定A:透射电子显微镜检测hucMSC-Ex的分离纯化，标尺:100nm;B:NanoSight纳米颗粒跟踪分析仪检测hucMSC-Ex直径大小为40~100nm;C:Western-blot检测hucMSC-Ex相关表面
图 3.2 HucMSC-Ex 移植后在 IBD 小鼠组织的定位A: 用动物活体成像系统检测 ICG 标记 12h 的 hucMSC-Ex; B: ICG 标记 12h 的 hucMSC-Ex尾静脉注射进入 IBD 小鼠并在活体动物成像系统下检测（ = 3）; C: 动物活体成像系统检测用 ICG 标记的 hucMSC-Ex 处理的 IBD 小鼠结肠，脾脏和肝脏组织。Figure 3.2 Location in the IBD mice tissue after translation of hucMSC-ExA: Representative images of hucMSC-Ex labeled with ICG for 12 hours were detected under liveanimal imaging system. B: The IBD mice received intravenous injection of ICG-exosomes for 12hours and were detected under live animal imaging system ( = 3). C: The colon tissues, spleens,and livers of IBD mice treated with ICG-exosomes were detected under live animal imagingsystem.3.4 讨论1983 年，有研究发现在网织红细胞成熟过程中微囊泡的分泌，最主要的微囊泡是 MV 和 exosome[104]。随着对 exosome 的不断研究，发现 exosome 是由多
鼠 IBD 模型组织形态和蛋白水平的变化趋势人脐带 MSC 移植修复 DSS 诱导 BALB/c 小鼠 IBD 模型，选别作为阴性对照组、DSS 诱导的小鼠 IBD 模型组、DSSC-Ex 组和 DSS 诱导损伤+hucMSC 组。阴性对照组小鼠饮用高SS 诱导的小鼠 IBD 模型组、DSS 诱导损伤+hucMSC-Ex 组和cMSC 组饮用高压灭菌纯净水配制的 3%DSS 水，且 DSSC-Ex 组从饮用 3%DSS 水的第 5 天、第 8 天、第 11 天每只小鼠脐带 MSC 来源的 exosome，同时 DSS 诱导损伤+hucMSC 组当观察到阳性组小鼠有明显便血以及体重减轻等症状时，断颈先每天称量小鼠体重，发现正常组小鼠体重不断上升，损伤组，而在第 5 天开始经 hucMSC 和 hucMSC-Ex 作用后，小鼠体渐上升（图 4.1）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Diet and nutritional factors in inflammatory bowel diseases[J]. Danuta Owczarek,Tomasz Rodacki,Renata Domaga?a-Rodacka,Dorota Cibor,Tomasz Mach. World Journal of Gastroenterology. 2016(03)
[2]Mesenchymal stem cells alleviate TNBS-induced colitis by modulating inflammatory and autoimmune responses[J]. Qian-Qian Chen,Li Yan,Chang-Zheng Wang,Wei-Hua Wang,Hui Shi,Bin-Bin Su,Qing-Huan Zeng,Hai-Tao Du,Jun Wan. World Journal of Gastroenterology. 2013(29)
[3]Colorectal cancer in inflammatory bowel disease:What is the real magnitude of the risk?[J]. Jessica K Dyson,Matthew D Rutter. World Journal of Gastroenterology. 2012(29)
本文编号：2907510
【文章来源】：江苏大学江苏省
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
HcuMSC-Ex的分析鉴定A:透射电子显微镜检测hucMSC-Ex的分离纯化，标尺:100nm;B:NanoSight纳米颗粒跟踪分析仪检测hucMSC-Ex直径大小为40~100nm;C:Western-blot检测hucMSC-Ex相关表面
图 3.2 HucMSC-Ex 移植后在 IBD 小鼠组织的定位A: 用动物活体成像系统检测 ICG 标记 12h 的 hucMSC-Ex; B: ICG 标记 12h 的 hucMSC-Ex尾静脉注射进入 IBD 小鼠并在活体动物成像系统下检测（ = 3）; C: 动物活体成像系统检测用 ICG 标记的 hucMSC-Ex 处理的 IBD 小鼠结肠，脾脏和肝脏组织。Figure 3.2 Location in the IBD mice tissue after translation of hucMSC-ExA: Representative images of hucMSC-Ex labeled with ICG for 12 hours were detected under liveanimal imaging system. B: The IBD mice received intravenous injection of ICG-exosomes for 12hours and were detected under live animal imaging system ( = 3). C: The colon tissues, spleens,and livers of IBD mice treated with ICG-exosomes were detected under live animal imagingsystem.3.4 讨论1983 年，有研究发现在网织红细胞成熟过程中微囊泡的分泌，最主要的微囊泡是 MV 和 exosome[104]。随着对 exosome 的不断研究，发现 exosome 是由多
鼠 IBD 模型组织形态和蛋白水平的变化趋势人脐带 MSC 移植修复 DSS 诱导 BALB/c 小鼠 IBD 模型，选别作为阴性对照组、DSS 诱导的小鼠 IBD 模型组、DSSC-Ex 组和 DSS 诱导损伤+hucMSC 组。阴性对照组小鼠饮用高SS 诱导的小鼠 IBD 模型组、DSS 诱导损伤+hucMSC-Ex 组和cMSC 组饮用高压灭菌纯净水配制的 3%DSS 水，且 DSSC-Ex 组从饮用 3%DSS 水的第 5 天、第 8 天、第 11 天每只小鼠脐带 MSC 来源的 exosome，同时 DSS 诱导损伤+hucMSC 组当观察到阳性组小鼠有明显便血以及体重减轻等症状时，断颈先每天称量小鼠体重，发现正常组小鼠体重不断上升，损伤组，而在第 5 天开始经 hucMSC 和 hucMSC-Ex 作用后，小鼠体渐上升（图 4.1）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Diet and nutritional factors in inflammatory bowel diseases[J]. Danuta Owczarek,Tomasz Rodacki,Renata Domaga?a-Rodacka,Dorota Cibor,Tomasz Mach. World Journal of Gastroenterology. 2016(03)
[2]Mesenchymal stem cells alleviate TNBS-induced colitis by modulating inflammatory and autoimmune responses[J]. Qian-Qian Chen,Li Yan,Chang-Zheng Wang,Wei-Hua Wang,Hui Shi,Bin-Bin Su,Qing-Huan Zeng,Hai-Tao Du,Jun Wan. World Journal of Gastroenterology. 2013(29)
[3]Colorectal cancer in inflammatory bowel disease:What is the real magnitude of the risk?[J]. Jessica K Dyson,Matthew D Rutter. World Journal of Gastroenterology. 2012(29)
本文编号：2907510
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/xiaohjib/2907510.html
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