MANF特异性调控四氯化碳诱导的肝纤维化小鼠脾脏巨噬细胞的分化

发布时间：2020-12-12 03:26

　　脾脏免疫细胞,尤其是巨噬细胞（Macrophages,Mφ）,在肝纤维化中发挥了重要的作用。已经有研究表明中脑星形胶质细胞来源的神经营养因子（Mesencephalicastrocyte-derived neurotrophic factor,MANF）在视网膜中的免疫调控作用,然而MANF是如何影响肝纤维化的脾脏免疫细胞目前仍不清楚。在本研究中,我们在野生型（Wild type,WT）小鼠和单核巨噬细胞特异性敲除MANF（Mono-macrophage-specific MANF knockout,Mφ MANF-/-）小鼠,用四氯化碳（CarbonTetrachloride,CCL4）构建了肝纤维化模型,在该模型上观察了脾脏中巨噬细胞的变化。结果发现,与WT小鼠比较,MφMANF-/-可引起小鼠脾脏中M1型巨噬细胞增多。而在肝纤维化时,与WT小鼠比较,MφMANF--可引起小鼠脾脏中M2型巨噬细胞和浆细胞增多。无论是在正常还是肝纤维化情况下,MANF对于T细胞和B细胞的数量都没有影响。我们的研究结果表明,MANF对不同类型免疫细胞的调控具有差异性,并且MANF可以特异性的调控脾脏巨... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．ＷＴ小鼠和Ｍ０ＭＡＮＦ＂？小鼠的肝组织病理特征（ＨＥ染色）??

图２．Ｍ０ＭＡＮＦ＂－加重小鼠肝纤维化（天狼星红染色）??＇＂

我们从Ｍ０?ＭＡＮＰＭ、鼠腹腔中提取巨噬细胞，将腹腔巨噬细胞培养２４?ｈ之后，??一部分细胞用于提取蛋白进行Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ实验，另一部分细胞进行免疫荧光实验??（图３和４）。???Ｓｐｌｅｅｎ???ＣＤ６８?ＭＡＮＦ?ＤＡＰＩ?ＭＥＲＧＥ??囊■■■■??图３．免疫荧光法鉴定小鼠巨噬细胞中ＭＡＮＦ敲除情况（免疫荧光法）??Ｆｉｇ?３．?Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＭＡＮＦ?ｋｎｏｃｋｏｕｔ?ｉｎ?Ｍｅ?ＭＡＮＦ－／＂?ｍｉｃｅ．?Ｄｏｕｂｌｅ－ｌａｂｅｌｅｄ??ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｗａｓ?ｕｓｅｄ?ｔｏ?ｄｅｔｅｃｔ?ＭＡＮＦ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ?ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ?ｗｉｔｈ??ａｎｔｉ－ＣＤ６８?（ｇｒｅｅｎ）?ａｎｄ?ａｎｔｉ－ＭＡＮＦ?（ｒｅｄ）．?Ｔｈｅ?ｎｕｃｌｅｉ?ｗｅｒｅ?ｓｔａｉｎｅｄ?ｗｉｔｈ?ＤＡＰＩ?（Ｂｌｕｅ）．?Ｓｃａｌｅ?ｂａｒ?ｉｓ?２０?｜ｉｍ．??２３??


本文编号：2911768