TLR3及其相关细胞因子在Bewo细胞抗HBV感染中的作用

发布时间：2020-12-13 02:06

　　目的：①了解人胎盘滋养层细胞系Bewo细胞HBV感染与TLR3蛋白表达的关系；②探讨HBV刺激的Bewo细胞TLR3与其信号转导过程相关细胞因子表达的关系；③探讨TLR3和相关细胞因子在Bewo细胞抗HBV中的作用。方法：（1）培养人胎盘滋养层细胞系Bewo细胞,分为PolyI:C（TLR3配体）刺激组及对照组Bewo细胞,采用FAC（流式细胞技术）测定的TLR3表达；（2）采用100μl HBV DNA含量为5.0×106 （copies/ml）的血清与Bewo细胞共培养作为HBV感染方法,设立三组：空白对照组,HBV刺激组,PolyI:C+HBV刺激组。于HBV刺激8 h、16 h、24 h、48h后收集培养上清及细胞进行以下实验：①FACS测定空白对照组、HBV刺激组和PolyI::C+HBV刺激组Bewo细胞TLR3的表达以及不同刺激时间点的TLR3表达变化；②用ELISA法（酶联免疫吸附法）检测HBV刺激组和PolyI:C+HBV刺激组细胞培养液中IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-β的含量；③用FQ-PCR（荧光定量PCR）检测HBV刺激组及PolyI:C+... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

Polyl:C刺激对BewoBewo细胞TLR3蛋白的表达

~~~HBV刺激组 组 PPPolyl:C+HBv刺激组 组图1一 16Polyl:C对不同时间点HBV刺激Bewo细胞TLR3蛋白表达的影响(a)...对照组 组...HBV刺激组 组口口Polyl:C+HBV刺激组 组图1一 17Pofyl:C对不同时间点HBv刺激Bewo细胞TLR3蛋白表达的影响(b)4:讨论 4.1HBV刺激Bewo细胞TLR3蛋白的表达的研究丁LR3是较公认的与病毒感染关系较为密切的一种病原体模式识别受体，在抗病毒免疫反应中发挥重要作用[’51，其原理为病毒复制时产生的双链RNA(dsRNA)是丁LR3的配体，下LR3能够辨识当病毒在感染的细胞内复制产生dsRNA，产生抗病毒反应，导致天然免疫系统活化I’“l。课题组前期研究已经证实Bewo细胞HBv刺激前后TLR3m刚A的表达差异有统计学意义，TLR3可能与HBV感染有关，本实验从蛋白水平表明与正常对照组相比，Bewo细胞与HBV共培养后TLR3表达量上升

~~~HBV刺激组 组 PPPolyl:C+HBv刺激组 组图1一 16Polyl:C对不同时间点HBV刺激Bewo细胞TLR3蛋白表达的影响(a)...对照组 组...HBV刺激组 组口口Polyl:C+HBV刺激组 组图1一 17Pofyl:C对不同时间点HBv刺激Bewo细胞TLR3蛋白表达的影响(b)4:讨论 4.1HBV刺激Bewo细胞TLR3蛋白的表达的研究丁LR3是较公认的与病毒感染关系较为密切的一种病原体模式识别受体，在抗病毒免疫反应中发挥重要作用[’51，其原理为病毒复制时产生的双链RNA(dsRNA)是丁LR3的配体，下LR3能够辨识当病毒在感染的细胞内复制产生dsRNA，产生抗病毒反应，导致天然免疫系统活化I’“l。课题组前期研究已经证实Bewo细胞HBv刺激前后TLR3m刚A的表达差异有统计学意义，TLR3可能与HBV感染有关，本实验从蛋白水平表明与正常对照组相比，Bewo细胞与HBV共培养后TLR3表达量上升

【参考文献】：
期刊论文
[1]胎盘滋养层细胞的感染和凋亡与HBV的宫内传播机制[J]. 白菡,张琳,何丽霞,冯国和,石理兰,窦晓光,赵桂珍.  世界华人消化杂志. 2007(15)
[2]Toll样受体3介导呼吸道合胞病毒感染人肺上皮细胞的炎性反应及其信号转导通路[J]. 云云,黄升海.  中国组织工程研究与临床康复. 2007(21)
[3]乙肝病毒标志物阳性血清感染胎盘滋养层细胞的体外研究[J]. 张磊,邵晨,王安辉,门可,张景霞,邵中军,闫永平,徐德忠,许文娟.  中国全科医学. 2007(09)
[4]正常和HBsAg阳性孕妇胎盘中TLR3检测分析[J]. 原琛利,王素萍,宋秀霞.  中国公共卫生. 2007(03)
[5]HBsAg阳性孕妇胎盘HBV感染状况及危险因素[J]. 李铁钢,王素萍,李淑珍,王效军,冯永亮,薛淑莲,双洁玉,渠轶群.  中国公共卫生. 2005(02)

博士论文
[1]Toll样受体3与HBV感染和HBV宫内感染的关系及其作用机制的研究[D]. 宋秀霞.山西医科大学 2008



本文编号：2913687