外源性硫化氢对大鼠结肠平滑肌细胞L-型钙通道的调节作用
发布时间：2021-01-14 10:52
背景:硫化氢（H2S）,作为一种气体信号分子,能在大鼠结肠组织内源性产生,也可以通过肠道细菌代谢产生。外源性和内源性H2S都在肠道发挥重要作用,如降低内脏敏感性,调节肠道Cajal细胞的活动,调节肠道动力等。L-型钙通道在结肠平滑肌层和黏膜下层组织中都有表达。该通道参与肠道平滑肌收缩和细胞兴奋性调节。研究发现一些肠道动力疾病存在L-型钙通道的表达异常。因此,L-型钙通道可能是肠道动力障碍疾病的潜在治疗靶点。H2S可以调控L-型钙通道,但其作用因组织不同或动物种属不同而存在差异。我们前期研究结果提示外源性H2S抑制大鼠结肠平滑肌细胞L-型钙通道的激活,但具体分子机制仍未明确。硫氢化钠（NaHS）和二烯丙基三硫化物（DATS）均作为H2S外源性供体,用于实验研究。本研究主要探讨NaHS和DATS作用于结肠平滑肌细胞L-型钙通道的可能机制以及对结肠动力的相关影响。第一部分 硫氢化钠对大鼠结肠平滑肌细胞L-型钙通道的调节机制目的:探讨硫氢化钠（NaHS）对结肠平滑肌细胞L-型钙通道的直接调节作用及可能机制。方法:选取健康雄性Wistar大鼠中段结肠组织,胶原酶消化法急性分离平滑肌细胞。采用全细...
【文章来源】：武汉大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：83 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．２急性分离的结肠平滑肌细胞镜下观（４００Ｘ）??
外源性硫化氢对大鼠结肠平滑肌细胞Ｌ－型钙通道的调节作用验结果??鼠结肠分段及平滑肌细胞的特点??近端结肠起始于盲肠末端，特征性的黏膜走向与纵轴成４５°，有近端结肠有一个派伊尔结，为集合淋巴小结。中段结肠被认为是至距第二个派伊尔结向下ｌｃｍ处。中段结肠有较小的纵向排列的结肠是被认为从中结肠末端延伸到第三个派伊尔结的地方，终止近（图１．１）。??、？、一－?ｗ－－－??？
中加入ＮａＨＳ，使终浓度为３００?ｕＭ，孵育３分钟，记录电流。??以刺激电压为Ｘ轴，峰电流密度为Ｙ轴，作电流－电压（Ｉ－Ｖ）曲线。３００?ｕ?Ｍ?ＮａＨＳ??使Ｉ－Ｖ曲线明显右移（图１．３?Ｃ）。给药前Ｌ－型钙通道峰电流在ＯｍＶ刺激电压时??出现，３００?ｕＭＮａＨＳ作用后需要去极化到＋２０ｍＶ达到峰值。ＯｍＶ刺激电压时给予??３００?ｕＭ?ＮａＨＳ后电流密度明显减小，从－２．５４±０．４１?ｐＡ／ｐＦ降低到－１．３１?±０．３４??ｐＡ／ｐＦ?（Ｐ＜０．?０５，?ｖｓ．?ｎｏｒｍａｌ，ｎ＝６）（图?１．?３?Ａ，Ｂ），而在整个刺激时程中，＋２０ｍＶ??刺激电压时峰电流密度增大到－４．?１６土０．６２?ｐＡ／ｐＦ?（图１．３?Ｂ，Ｃ）。??为了观测ＮａＨＳ对Ｌ－型钙通道稳态激活的影响，用Ｂｏｌｔｚｍａｎｎ方程进行拟合，??Ｇ／Ｇｒａｘ?＝?ｌ／［ｌ＋ｅｘｐ（ＶＴ?－?Ｖ１／２／ｋ：）］，用?１／１＿?代替?Ｇ／Ｇ＾?Ｉ／Ｉｍｘ表示各个刺激电??压下峰电流值除以整个刺激时程的峰电流值，ＶＴ表示去极化刺激电压，Ｖ１／２代表??半数激活电压
【参考文献】：
期刊论文
[1]外源性硫化氢对人宫颈癌HeLa细胞的影响及作用机制[J]. 冯晓冰,陈建国,杨翼鹰,陈景福,甄育兰. 山东医药. 2016(37)
[2]硫化氢及其合成酶在膀胱癌细胞株中的表达及其作用[J]. 宋志强,沈海山,王文佳,吴建臣,李然伟,李胜文. 吉林大学学报(医学版). 2016(05)
[3]Hydrogen sulfide-induced enhancement of gastric fundus smooth muscle tone is mediated by voltagedependent potassium and calcium channels in mice[J]. Xiang-Min Meng,Xu Huang,Chun-Mei Zhang,Dong-Hai Liu,Hong-Li Lu,Young-chul Kim,Wen-Xie Xu. World Journal of Gastroenterology. 2015(16)
[4]外源性硫化氢通过PI3K/Akt信号通路诱导人卵巢癌细胞凋亡[J]. 周建斌,盛顺良,周寿红,欧阳新平,唐艳艳,何平平. 中国妇幼保健. 2013(30)
[5]外源性H2S通过激活KATP通道减轻大鼠胃缺血再灌注引起的胃黏膜损伤[J]. 邹吉贺,乔伟丽,王光明,马鸿基,祁友键,孙红,闫长栋. 生理学报. 2012(01)
[6]大蒜素对大鼠心室肌细胞L-型钙通道的影响[J]. 邓春玉,庄宁宁,单志新,钱卫民,阮小薇,吴书林,林曙光. 中药药理与临床. 2005(03)
硕士论文
[1]硫化氢对健康雄性大鼠胃运动的影响及其机制研究[D]. 叶艳芳.山东大学 2009
本文编号：2976768
【文章来源】：武汉大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：83 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．２急性分离的结肠平滑肌细胞镜下观（４００Ｘ）??
外源性硫化氢对大鼠结肠平滑肌细胞Ｌ－型钙通道的调节作用验结果??鼠结肠分段及平滑肌细胞的特点??近端结肠起始于盲肠末端，特征性的黏膜走向与纵轴成４５°，有近端结肠有一个派伊尔结，为集合淋巴小结。中段结肠被认为是至距第二个派伊尔结向下ｌｃｍ处。中段结肠有较小的纵向排列的结肠是被认为从中结肠末端延伸到第三个派伊尔结的地方，终止近（图１．１）。??、？、一－?ｗ－－－??？
中加入ＮａＨＳ，使终浓度为３００?ｕＭ，孵育３分钟，记录电流。??以刺激电压为Ｘ轴，峰电流密度为Ｙ轴，作电流－电压（Ｉ－Ｖ）曲线。３００?ｕ?Ｍ?ＮａＨＳ??使Ｉ－Ｖ曲线明显右移（图１．３?Ｃ）。给药前Ｌ－型钙通道峰电流在ＯｍＶ刺激电压时??出现，３００?ｕＭＮａＨＳ作用后需要去极化到＋２０ｍＶ达到峰值。ＯｍＶ刺激电压时给予??３００?ｕＭ?ＮａＨＳ后电流密度明显减小，从－２．５４±０．４１?ｐＡ／ｐＦ降低到－１．３１?±０．３４??ｐＡ／ｐＦ?（Ｐ＜０．?０５，?ｖｓ．?ｎｏｒｍａｌ，ｎ＝６）（图?１．?３?Ａ，Ｂ），而在整个刺激时程中，＋２０ｍＶ??刺激电压时峰电流密度增大到－４．?１６土０．６２?ｐＡ／ｐＦ?（图１．３?Ｂ，Ｃ）。??为了观测ＮａＨＳ对Ｌ－型钙通道稳态激活的影响，用Ｂｏｌｔｚｍａｎｎ方程进行拟合，??Ｇ／Ｇｒａｘ?＝?ｌ／［ｌ＋ｅｘｐ（ＶＴ?－?Ｖ１／２／ｋ：）］，用?１／１＿?代替?Ｇ／Ｇ＾?Ｉ／Ｉｍｘ表示各个刺激电??压下峰电流值除以整个刺激时程的峰电流值，ＶＴ表示去极化刺激电压，Ｖ１／２代表??半数激活电压
【参考文献】：
期刊论文
[1]外源性硫化氢对人宫颈癌HeLa细胞的影响及作用机制[J]. 冯晓冰,陈建国,杨翼鹰,陈景福,甄育兰. 山东医药. 2016(37)
[2]硫化氢及其合成酶在膀胱癌细胞株中的表达及其作用[J]. 宋志强,沈海山,王文佳,吴建臣,李然伟,李胜文. 吉林大学学报(医学版). 2016(05)
[3]Hydrogen sulfide-induced enhancement of gastric fundus smooth muscle tone is mediated by voltagedependent potassium and calcium channels in mice[J]. Xiang-Min Meng,Xu Huang,Chun-Mei Zhang,Dong-Hai Liu,Hong-Li Lu,Young-chul Kim,Wen-Xie Xu. World Journal of Gastroenterology. 2015(16)
[4]外源性硫化氢通过PI3K/Akt信号通路诱导人卵巢癌细胞凋亡[J]. 周建斌,盛顺良,周寿红,欧阳新平,唐艳艳,何平平. 中国妇幼保健. 2013(30)
[5]外源性H2S通过激活KATP通道减轻大鼠胃缺血再灌注引起的胃黏膜损伤[J]. 邹吉贺,乔伟丽,王光明,马鸿基,祁友键,孙红,闫长栋. 生理学报. 2012(01)
[6]大蒜素对大鼠心室肌细胞L-型钙通道的影响[J]. 邓春玉,庄宁宁,单志新,钱卫民,阮小薇,吴书林,林曙光. 中药药理与临床. 2005(03)
硕士论文
[1]硫化氢对健康雄性大鼠胃运动的影响及其机制研究[D]. 叶艳芳.山东大学 2009
本文编号：2976768
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