HucMSCs调控巨噬细胞15-LOX-1表达促进炎症性肠病修复的机制研究

发布时间：2021-01-21 13:13

　　目的:通过建立人脐带间质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,huc MSCs）修复葡聚糖硫酸钠（Dextran Sulfate Sodium Salt,DSS）诱导的小鼠炎症性肠病（inflammatory bowel disease,IBD）模型以及白喉毒素（diphtheria toxin,DT）诱导的巨噬细胞清除模型,明确巨噬细胞在huc MSCs修复IBD中的作用,探讨huc MSCs调控巨噬细胞修复IBD的作用机制,以提高huc MSCs治疗IBD的疗效。方法:1)将纯合子CD11b-DTR转基因小鼠进行配笼繁殖,使用聚合酶链式反应（PCR）技术和琼脂糖凝胶电泳技术筛选出纯合子小鼠用于后续实验。2)选取6周雄性CD11b-DTR转基因小鼠,预先饥饿24h后腹腔注射DT（给药浓度为25ng/g）以构建巨噬细胞清除模型。24h后提取小鼠腹腔巨噬细胞,进行F4/80、CD11b抗体染色,并使用流式细胞仪检测F4/80、CD11b双阳性细胞,分析其比率。3)选取6周、20g左右的雄性CD11b-DTR转基因小鼠,饮用含3%D... 

【文章来源】：江苏大学江苏省

【文章页数】：87 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

建立巨噬细胞清除模型

江苏大学硕士学位论文组小鼠巨噬细胞清除后，小鼠体重减轻程度明显提高（图 2.2B）但 DAI 有所降低，第七天后 DSS 组小鼠便血明显加剧（图 2.2C）。DT+DSS 组小鼠结直肠长度与 DSS 组相比无显著差异，但脾脏体积略小于 DSS 组（图 2.2D）。同时 H&E染色结果显示，DSS 组小鼠肠黏膜和脾脏结节结构均十分紊乱，而 DT 处理后，DSS 诱导的 IBD 小鼠其结直肠组织和脾脏结节结构完整性均得到一定程度的重建，但紊乱依然存在（图 2.2E）。上述结果证明，巨噬细胞清除后 DSS 诱导的IBD 发生发展会有所改变。

HucMSCs 调控巨噬细胞 15-LOX-1 表达促进炎症性肠病修复的机制研究Figure 2.2 Macrophage depletion affected the development of DSS induced IBD The design of model group. (B) The body weight loss of mice in each group, ***P<0.001. (C DAI of mice in each group, ***P<0.001. (D) The colon lengths and spleen size of mice in group. (E) H&E staining of the tissues of mice (100×)..3. 巨噬细胞清除影响 IBD 小鼠结直肠、脾脏炎症因子表达水平上述结果在组织学水平证明了巨噬细胞清除会影响 IBD 的发生发展。为进验证这一结论，使用 qRT-PCR 进一步检测了各组小鼠结直肠与脾脏中炎症(TNF-α、IL-1β、IL-6）表达水平。实验结果显示，巨噬细胞清除后，IBD结直肠与脾脏中大部分炎症因子的表达有所降低。综上所述，巨噬细胞清除然炎症依然存在，但 DSS 诱导的 IBD 有所缓解，其发生发展有所改变。换，巨噬细胞参与了 DSS 诱导的 IBD 的发生发展。

【参考文献】：
期刊论文
[1]Mesenchymal stem cells-derived exosomal microRNAs contribute to wound inflammation[J]. Dongdong Ti,Haojie Hao,Xiaobing Fu,Weidong Han.  Science China（Life Sciences）. 2016(12)
[2]Diet and nutritional factors in inflammatory bowel diseases[J]. Danuta Owczarek,Tomasz Rodacki,Renata Domaga?a-Rodacka,Dorota Cibor,Tomasz Mach.  World Journal of Gastroenterology. 2016(03)



本文编号：2991230