IL-22经Wnt/β-catenin通路抑制肝星状细胞致纤维化作用

发布时间：2021-02-02 04:56

　　目的:研究IL-22抑制HSC致肝纤维化的作用和机制,探索Wnt/β-catenin通路在肝星状细胞（HSC）激活过程中的作用。方法:采用TGF-β1激活HSC,荧光定量PCR和Western blot检测细胞激活过程中β-catenin、α-SMA的mRNA和蛋白表达变化情况。应用不同浓度和不同时间的重组大鼠IL-22刺激大鼠HSC,CCK8法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率。采用TGF-β1预处理HSC,再用最适浓度IL-22干预,对比干预前后HSC增殖情况,并检测β-catenin、α-SMA的mRNA和蛋白表达变化情况。结果:TGF-β1激活HSC后,β-catenin、α-SMA的mRNA和蛋白表达水平显著升高（P<0.05）。IL-22以浓度依赖性和时间依赖性抑制HSC增殖（P<0.05）,并降低β-catenin、α-SMA的mRNA和蛋白表达水平（P<0.05）,但对HSC凋亡率无显著影响（P>0.05）。IL-22可以显著抑制TGF-β1诱导的HSC激活,并显著降低β-catenin、α-SMA的mRNA和蛋白表达水平（P<0.0... 

【文章来源】：中国免疫学杂志. 2017,33(04)北大核心

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【部分图文】：

TGF-β1促进肝星状细胞β-catenin和α-SMA表达Fig．1TGF-β1promotesHSCtosecretβ-cateninand

?.5、5ng/ml浓度的TGF-β1干预HSC48h，检测干预后细胞内β-catenin和α-SMA的mRNA和蛋白水平变化，结果显示β-catenin和α-SMA的mRNA和蛋白水平均随着TGF-β1浓度增加而升高，见图1A、B，提示HSC激活过程中伴随着Wnt/β-catenin通路激活和α-SMA表达改变。图1TGF-β1促进肝星状细胞β-catenin和α-SMA表达Fig．1TGF-β1promotesHSCtosecretβ-cateninandα-SMANote:A.mRNAlevels;B.Proteinlevels;Therewasasignificantdiffer-encesofmRNAandproteinlevelsbetweenthe5ng/mland0ng/mlofTGF-β1group，*.P＜0.05.图2IL-22抑制肝星状细胞增殖Fig．2IL-22inhibitsproliferationofHSCNote:A.Concentrationdependentmanner;B.Timedependentmanner;Thecellproliferationrateswassignificantlydecreasedin750pg/mland1000pg/mlgroupcomparedwith0pg/mlgroup，andalsoremarkablydecreasedin48hgroupcomparedwith12hgroupafterIL-22intervention，*.P＜0.05.2.2IL-22抑制HSC的增殖能力分别使用0、250、500、750、1000pg/ml浓度IL-22干预HSC48h后，观察细胞的增殖情况，结果显示HSC增殖率随着IL-22浓度增加呈下降趋势，到750pg/ml时的细胞增殖率显著大于0pg/ml(P＜0.05)，见图2A;再以1000pg/ml浓度IL-22分别干预HSC12、24、36、48h，观察细胞的增殖和凋亡情况，结果显示HSC增殖率随IL-22浓度增加呈下降趋势，在干预后48h最显著(P＜0.05)，见图2B。HSC凋亡率随着IL-22浓度增加呈升高趋势，但各个浓度组间差异无统计学意义(P＞0.05)，见图3A;且IL-22干预的各时间段之间细胞凋亡率差异亦无统计学意义(P＞0.05)，见图3B。2.3IL-22抑制TGF-β1激活的HSC的增殖以1000pg/ml浓度IL-22干预HSC48h后，与未干预的HSC相比，干预后HSC增殖率显

稍ず?8h最显著(P＜0.05)，见图2B。HSC凋亡率随着IL-22浓度增加呈升高趋势，但各个浓度组间差异无统计学意义(P＞0.05)，见图3A;且IL-22干预的各时间段之间细胞凋亡率差异亦无统计学意义(P＞0.05)，见图3B。2.3IL-22抑制TGF-β1激活的HSC的增殖以1000pg/ml浓度IL-22干预HSC48h后，与未干预的HSC相比，干预后HSC增殖率显著下降，差异有统计学意义(P＜0.05);采用5ng/ml浓度的TGF-β1预处理HSC24h，再给予1000pg/ml浓度的IL-22干预HSC48h，结果显示(见图4)，TGF-β1干预HSC后细胞激活，细胞增殖率明显升高;激活后的图3IL-22不影响肝星状细胞凋亡Fig．3IL-22hasnosignificanteffectonapoptosisofHSCNote:A.Differentconcentration;B.Differenttime.图4不同TGF-β1/IL-22组合干预HSC后细胞增殖率变化情况Fig．4CellproliferationratesofHSCtreatedwithdifferentcombinationofTGF-β1andIL-22Note:IL-22significantlyinhibitsproliferationofHSCinbothTGF-β1negativeandpositivegroup，*.P＜0.05.·504·中国免疫学杂志2017年第33卷

【参考文献】：
期刊论文
[1]Wnt5a作用及信号转导通路研究进展[J]. 卜海激,朱明华.  中华病理学杂志. 2015 (07)
[2]Interleukin-22 ameliorates liver fibrogenesis by attenuating hepatic stellate cell activation and downregulating the levels of inflammatory cytokines[J]. Dong-Hong Lu,Xiao-Yun Guo,Shan-Yu Qin,Wei Luo,Xiao-Li Huang,Mei Chen,Jia-Xu Wang,Shi-Jia Ma,Xian-Wen Yang,Hai-Xing Jiang.  World Journal of Gastroenterology. 2015(05)



本文编号：3014093