阻塞性黄疸TGR5激活抑制内皮祖细胞成血管活性

发布时间：2021-02-12 21:01

　　【研究目的】阻塞性黄疸存在着多种病理生理改变,本课题组前期研究发现阻塞性黄疸动物存在血管内皮的损伤及创伤修复延迟。血管新生是创伤修复及手术后伤口修复的重要环节,但是阻塞性黄疸是否直接抑制了创伤修复未见报道;而又是何种因素在血管内皮损伤中发挥作用也尚未清楚。既往有关创伤修复及血管新生的报道也多与内皮祖细胞相关,但多与血管新生经典VEGF信号通路相关;本研究旨在对阻塞性黄疸、胆汁酸与其膜受体对内皮祖细胞在缺血损伤修复中的作用进行研究。【研究方法】本课题的主要研究方法为:（1）分析阻塞性黄疸对皮损创伤伤口修复的影响,采用免疫荧光伤口处的血管新生情况;（2）采用缺血损伤的经典模型股动脉结扎分析阻塞性黄疸对缺血损伤修复的影响;（3）分别观察胆汁酸与胆红素对股动脉结扎后缺血损伤修复的影响;（4）体外分离培养原代内皮祖细胞并采用免疫荧光和流式细胞术等多种方法进行鉴定;（5）采用小干扰RNA对内皮祖细胞胆汁酸核受体FXR与膜受体TGR5分别进行干扰并采用Western blotting验证,然后采用胆汁酸进行孵育,观察内皮祖细胞的迁移与成管能力;（6）原代内皮祖细胞采用胆汁酸进行孵育后,PCR检测多种... 

【文章来源】：福建医科大学福建省

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
前言
1 实验材料
    1.1 .实验动物
    1.2 实验细胞
    1.3 实验仪器设备和耗材
    1.4 试剂配剂
    1.5 主要试剂配方
2 实验方法
    2.1 小鼠皮损创伤动物模型建立
    2.2 小鼠股动脉结扎模型建立
    2.3 流式细胞术
    2.4 激光多普勒血流扫描
    2.5 免疫荧光染色
    2.6 免疫组织化学染色
    2.7 免疫蛋白印记分析
    2.8 实时定量荧光PCR
    2.9 原代细胞分离培养
    2.10 小干扰RNA干扰实验
    2.11 细胞划痕实验
    2.12 细胞成管实验
    2.13 细胞Transwell实验
    2.14 细胞回输实验
    2.15 统计分析
3 实验结果
    3.1 阻塞性黄疸小鼠存在皮损创伤术后修复延迟现象
    3.2 阻塞性黄疸抑制股动脉结扎后血管新生
    3.3 胆汁酸而非胆红素抑制股动脉结扎术后血流灌注与组织血管密度
    3.4 体外分离培养内皮祖细胞并鉴定
    3.5 胆汁酸作用于内皮祖细胞胆汁酸膜受体 TGR5 抑制内皮祖细胞迁移、分化与成管能力。
    3.6 胆汁酸孵育抑制内皮祖细胞各种促血管新生因子表达
4 讨论
5 结论
6 参考文献
7 综述
    综述参考文献
9 致谢



本文编号：3031423