植物乳杆菌、两歧双歧杆菌联合丹参多糖对非酒精性脂肪性肝病的防治作用及机制研究
发布时间：2021-03-04 09:06
研究背景:非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是指无过量饮酒史,以肝实质细胞出现弥漫性脂肪浸润、堆积为特征的慢性病。益生菌和中药均可调节肠道微生态、降低胆固醇水平。丹参多糖是从中药丹参中提取的一类天然高分子化合物,具有抗炎、免疫调节、抗氧化和抗衰老等生物学功能,但其能否增强益生菌对NAFLD的改善作用尚不明确。目的:1.从健康人肠道微生物中筛选出对降胆固醇和甘油三酯清除能力强的益生菌。2.探讨益生菌联合丹参多糖对NAFLD小鼠脂质代谢紊乱和肝脏病理学损伤的保护效果。3.探讨益生菌联合丹参多糖干预对NAFLD小鼠炎症反应、肠道菌群和肠粘膜屏障完整性的影响及可能机制。方法:1.从20名健康人粪便样本中分离菌株,分别检测降胆固醇和甘油三酯的效率,并对具有较好降脂能力的候选菌株进行一系列模拟人消化液环境的实验,进一步筛选,并使用16S rDNA测序技术鉴定。2.将小鼠随机分为正常饮食组（ND）、高脂饮食组（HFD）、益生菌组（LB）和益生菌联合丹参多糖组（LBM）,ND组和HFD组灌胃生理盐水,LB组降脂益生菌灌胃,LBM组益生菌联合丹参多糖。3.计算Lee’s指数和肝指数,血生化检测血脂指标。4...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：136 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．３候选菌株核酸电泳结果??Ｆｉｕｒｅ?１．３?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｎｕｃｌｅｉｃ?ａｃｉｄ?ｅｌｅｃｔｒｏｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｃａｎｄｉｄａｔｅ?ｓｔｒａｉｎｓ??
?博士学位论文???３．５益生菌最佳比例的体外优化??通过上述实验，我们发现植物乳杆菌和两歧双歧杆菌有较强的胆汁酸和甘??油三酯清除能力，且两两株菌株均对胃酸、胆盐、胃蛋白酶、胰蛋白酶有较强??的耐受力，以及和肠上皮细胞表面受体结合的能力，显示了具备开发为益生菌??制剂的潜力。为了进一步提高益生菌的降胆固醇和甘油三酯能力，我们将不同??比例的植物乳杆菌和两歧双歧杆菌分别进行降胆固醇和降甘油三酯实验，发现??当植物乳杆菌与两歧双歧杆菌比例为１：２时，其降胆固醇和降甘油三酯的能力最??强［ＣｘＴ＝胆固醇降解率（％）?ｘ甘油三酯降解率（％）］。具体结果见图１．７。??０．６－??：：：§??：ｉｌｌｌｌｉ??０?ｕ?一??３：１?２：１?１：１?１：２?１：３?１：４??ＬｐＸｒＢｂＶ??图１．７不同比例的植物乳杆菌和两歧双歧杆菌对胆固醇和甘油三酯的降解能力??Ｆｉｇｕｒｅ?１．７?Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｓ?ｏｆ?Ｌ．?ｐｌａｎｔａｒｕｍ?ａｎｄ?Ｂ．?ｂｉｆｕｌｕｍ?ｏｎ?ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ?ａｎｄ??ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ?ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ?ｃａｐａｃｉｔｙ??４讨论??高脂血症（Ｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａ，?ＨＬＰ）是人体脂质代谢紊乱出现的异常反应，??其特征是血浆中ＴＣ、ＴＧ、ＬＤＬ－Ｃ三项检验值增高，而ＨＤＬ－Ｃ检验值降低［５３］。??胆固醇稳态在维持血脂水平中起着重要的作用。血清胆固醇水平受饮食习惯、??激素水平、疾病状态、遗传因素和运动锻炼的影响。大量研究表明，胆固醇代??谢紊乱是心血管疾病（如动脉粥样硬化、高血压、冠心病）和代谢性疾病（糖??２３??
ＦＤ＋Ｃ．ｍｉｌｉｔａｒｉｓ??．＊５?ＨＦＤ＋Ｍ－ｃｈａｒａｎｔｉａ?Ｌ．??２?ＨＦＤ＋Ｐ．ｌｉｎｔｅｕｓ??１?ＨＦＤ＋Ｌ．ｂａｒｂａｒｕｍ??｜?ＨＦＤ＋ｗａｔｅｒ?Ｋ．?＇?：、?．??＾?Ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｈ（?＾?＇?＇；?？？?＿??？?？?？?＊?＊?１?＊?＊?４?ｋ?１?＊?４?＊?ｋ?＊?？?＊?？?？?？?Ｊ?１?＊?１?１?１?１?Ｍ?＊?＊?＊?？?ｋ?＊?？?？?１?１??－８?－６?－４?－２?０??ＩＳｌ??图２．１植物多糖对小鼠胰岛素敏感性的影响??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ?ｏｎ?Ｉｎｓｕｌｉｎ?Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ?Ｉｎｄｅｘ?ｉｎ?ＮＡＦＬＤ?ｍｉｃｅ??３．２丹参多糖对ＮＡＦＬＤ模型小鼠胰岛素敏感指数的影响??不同浓度的丹参多糖对长期高脂饮食诱导的ＮＡＦＬＤ小鼠胰岛素抵抗结果??如图２．２所示，与ＮＤ组相比，ＨＦＤ组胰岛素敏感性显著性升（Ｐ＜０．０１）。与??ＨＦＤ组相比，２０?ｍｇ／ｋｇ丹参多糖治疗组胰岛素敏感性降低，但无显著性差异，??３０?ｍｇ／ｋｇ、４０?ｍｇ／ｋｇ、５０?ｍｇ／ｋｇ和６０?ｍｇ／ｋｇ丹参多糖治疗组胰岛素敏感性显著性??降低，且５０?ｍｇ／ｋｇ丹参多糖干预效果最好，因此，后期实验选用丹参多糖进行??研宄。??ＨＦＤ－ｉ－６０?ｍｇ／ｋｇ／ｄａｖ?Ｍ－??ＨＦＤ４－５０?ｉｉｉｇ／ｋｇ／ｄａｖ?Ｍ－?ｉ￣??ＨＦＤｈ－４０?ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ?Ｍ?－?Ｉ￣￣??ＨＦＤ＋３０?ｍｇ／ｋｇ／ｄａｖ?Ｍ?－?Ｉ￣??ＨＦＤ＋２０?ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ?Ｍ?－?Ｉ￣
【参考文献】：
期刊论文
[1]黄芪多糖对黄嘌呤氧化酶诱导的肺癌A549细胞自噬及PI3K/AKT信号通路的影响[J]. 王雪林,李杨,刘丹,王彦君,明海霞. 中国药理学通报. 2019(12)
[2]黄芪多糖诱导淋巴细胞增殖及肿瘤细胞杀伤作用的研究[J]. 廖大忠. 四川中医. 2019(11)
[3]具减肥功效的益生菌研究进展[J]. 陈懿玲,陈泽钊,张革. 中国微生态学杂志. 2019(11)
[4]Regulatory effect of a Chinese herbal medicine formula on nonalcoholic fatty liver disease[J]. Jia-Min Yang,Yan Sun,Min Wang,Xin-Lei Zhang,Shu-Jing Zhang,Yu-Shan Gao,Lin Chen,Meng-Yao Wu,Lu Zhou,Yu-Mei Zhou,Yue Wang,Feng-Jie Zheng,Yu-Hang Li. World Journal of Gastroenterology. 2019(34)
[5]Prolonged high-fat-diet feeding promotes non-alcoholic fatty liver disease and alters gut microbiota in mice[J]. Kandy T Velázquez,Reilly T Enos,Jackie E Bader,Alexander T Sougiannis,Meredith S Carson,Ioulia Chatzistamou,James A Carson,Prakash S Nagarkatti,Mitzi Nagarkatti,E Angela Murphy. World Journal of Hepatology. 2019(08)
[6]Dendrobium sonia polysaccharide regulates immunity and restores the dysbiosis of the gut microbiota of the cyclophosphamide-induced immunosuppressed mice[J]. LIU Wei,YAN Ran,ZHANG Liang. Chinese Journal of Natural Medicines. 2019(08)
[7]非酒精性脂肪性肝病发病机制研究进展——聚焦“巨噬细胞及其分子机制”[J]. 王晓晓,饶慧瑛,刘峰. 医学综述. 2019(15)
[8]贯筋藤多糖的提取及其单糖组分分析[J]. 施娅楠,谢文祥,陶亮,黄艾祥. 食品研究与开发. 2019(11)
[9]基于数据挖掘和生物信息分析探讨非酒精性脂肪肝用药规律及作用机制[J]. 丁静,张斌,王培劼,何国浓,魏冬梅,丁佳璐,王邦才. 中国中药杂志. 2019(08)
[10]菊粉复配灵芝多糖对HepG2细胞胰岛素抵抗的调节作用[J]. 刘亚萍,李雨蒙,王梦,张文菱子,张泽生. 中国食品添加剂. 2018(12)
博士论文
[1]益生菌联合益生元防治小鼠非酒精性脂肪肝的作用及机制研究[D]. 姚芳芳.郑州大学 2017
硕士论文
[1]益生乳双歧杆菌V9对高脂饮食诱导的大鼠非酒精性脂肪性肝病的改善作用及机制研究[D]. 刘春妍.内蒙古农业大学 2018
[2]丹参多糖对小鼠免疫性肝损伤的炎症调节机制研究[D]. 韩超.河北农业大学 2018
[3]糖尿病及其他因素与帕金森病的相关性研究[D]. 叶泽明.广州医科大学 2018
[4]肠缺血再灌注刺激下GSNO在调控肠粘膜屏障功能中的作用及机制研究[D]. 彭科.第三军医大学 2015
[5]NAFLD患者肠道菌群改变与膳食因素及血清LPS、IL-18、IL-1β的相关性研究[D]. 陈艳丽.安徽医科大学 2015
[6]红雪茶及其多糖降脂保肝作用的实验研究[D]. 毛贵元.广西医科大学 2012
[7]丹参多糖的提取及生物活性的研究[D]. 吴从平.山东农业大学 2010
本文编号：3062944
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：136 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．３候选菌株核酸电泳结果??Ｆｉｕｒｅ?１．３?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｎｕｃｌｅｉｃ?ａｃｉｄ?ｅｌｅｃｔｒｏｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｃａｎｄｉｄａｔｅ?ｓｔｒａｉｎｓ??
?博士学位论文???３．５益生菌最佳比例的体外优化??通过上述实验，我们发现植物乳杆菌和两歧双歧杆菌有较强的胆汁酸和甘??油三酯清除能力，且两两株菌株均对胃酸、胆盐、胃蛋白酶、胰蛋白酶有较强??的耐受力，以及和肠上皮细胞表面受体结合的能力，显示了具备开发为益生菌??制剂的潜力。为了进一步提高益生菌的降胆固醇和甘油三酯能力，我们将不同??比例的植物乳杆菌和两歧双歧杆菌分别进行降胆固醇和降甘油三酯实验，发现??当植物乳杆菌与两歧双歧杆菌比例为１：２时，其降胆固醇和降甘油三酯的能力最??强［ＣｘＴ＝胆固醇降解率（％）?ｘ甘油三酯降解率（％）］。具体结果见图１．７。??０．６－??：：：§??：ｉｌｌｌｌｉ??０?ｕ?一??３：１?２：１?１：１?１：２?１：３?１：４??ＬｐＸｒＢｂＶ??图１．７不同比例的植物乳杆菌和两歧双歧杆菌对胆固醇和甘油三酯的降解能力??Ｆｉｇｕｒｅ?１．７?Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｓ?ｏｆ?Ｌ．?ｐｌａｎｔａｒｕｍ?ａｎｄ?Ｂ．?ｂｉｆｕｌｕｍ?ｏｎ?ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ?ａｎｄ??ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ?ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ?ｃａｐａｃｉｔｙ??４讨论??高脂血症（Ｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａ，?ＨＬＰ）是人体脂质代谢紊乱出现的异常反应，??其特征是血浆中ＴＣ、ＴＧ、ＬＤＬ－Ｃ三项检验值增高，而ＨＤＬ－Ｃ检验值降低［５３］。??胆固醇稳态在维持血脂水平中起着重要的作用。血清胆固醇水平受饮食习惯、??激素水平、疾病状态、遗传因素和运动锻炼的影响。大量研究表明，胆固醇代??谢紊乱是心血管疾病（如动脉粥样硬化、高血压、冠心病）和代谢性疾病（糖??２３??
ＦＤ＋Ｃ．ｍｉｌｉｔａｒｉｓ??．＊５?ＨＦＤ＋Ｍ－ｃｈａｒａｎｔｉａ?Ｌ．??２?ＨＦＤ＋Ｐ．ｌｉｎｔｅｕｓ??１?ＨＦＤ＋Ｌ．ｂａｒｂａｒｕｍ??｜?ＨＦＤ＋ｗａｔｅｒ?Ｋ．?＇?：、?．??＾?Ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｈ（?＾?＇?＇；?？？?＿??？?？?？?＊?＊?１?＊?＊?４?ｋ?１?＊?４?＊?ｋ?＊?？?＊?？?？?？?Ｊ?１?＊?１?１?１?１?Ｍ?＊?＊?＊?？?ｋ?＊?？?？?１?１??－８?－６?－４?－２?０??ＩＳｌ??图２．１植物多糖对小鼠胰岛素敏感性的影响??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ?ｏｎ?Ｉｎｓｕｌｉｎ?Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ?Ｉｎｄｅｘ?ｉｎ?ＮＡＦＬＤ?ｍｉｃｅ??３．２丹参多糖对ＮＡＦＬＤ模型小鼠胰岛素敏感指数的影响??不同浓度的丹参多糖对长期高脂饮食诱导的ＮＡＦＬＤ小鼠胰岛素抵抗结果??如图２．２所示，与ＮＤ组相比，ＨＦＤ组胰岛素敏感性显著性升（Ｐ＜０．０１）。与??ＨＦＤ组相比，２０?ｍｇ／ｋｇ丹参多糖治疗组胰岛素敏感性降低，但无显著性差异，??３０?ｍｇ／ｋｇ、４０?ｍｇ／ｋｇ、５０?ｍｇ／ｋｇ和６０?ｍｇ／ｋｇ丹参多糖治疗组胰岛素敏感性显著性??降低，且５０?ｍｇ／ｋｇ丹参多糖干预效果最好，因此，后期实验选用丹参多糖进行??研宄。??ＨＦＤ－ｉ－６０?ｍｇ／ｋｇ／ｄａｖ?Ｍ－??ＨＦＤ４－５０?ｉｉｉｇ／ｋｇ／ｄａｖ?Ｍ－?ｉ￣??ＨＦＤｈ－４０?ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ?Ｍ?－?Ｉ￣￣??ＨＦＤ＋３０?ｍｇ／ｋｇ／ｄａｖ?Ｍ?－?Ｉ￣??ＨＦＤ＋２０?ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ?Ｍ?－?Ｉ￣
【参考文献】：
期刊论文
[1]黄芪多糖对黄嘌呤氧化酶诱导的肺癌A549细胞自噬及PI3K/AKT信号通路的影响[J]. 王雪林,李杨,刘丹,王彦君,明海霞. 中国药理学通报. 2019(12)
[2]黄芪多糖诱导淋巴细胞增殖及肿瘤细胞杀伤作用的研究[J]. 廖大忠. 四川中医. 2019(11)
[3]具减肥功效的益生菌研究进展[J]. 陈懿玲,陈泽钊,张革. 中国微生态学杂志. 2019(11)
[4]Regulatory effect of a Chinese herbal medicine formula on nonalcoholic fatty liver disease[J]. Jia-Min Yang,Yan Sun,Min Wang,Xin-Lei Zhang,Shu-Jing Zhang,Yu-Shan Gao,Lin Chen,Meng-Yao Wu,Lu Zhou,Yu-Mei Zhou,Yue Wang,Feng-Jie Zheng,Yu-Hang Li. World Journal of Gastroenterology. 2019(34)
[5]Prolonged high-fat-diet feeding promotes non-alcoholic fatty liver disease and alters gut microbiota in mice[J]. Kandy T Velázquez,Reilly T Enos,Jackie E Bader,Alexander T Sougiannis,Meredith S Carson,Ioulia Chatzistamou,James A Carson,Prakash S Nagarkatti,Mitzi Nagarkatti,E Angela Murphy. World Journal of Hepatology. 2019(08)
[6]Dendrobium sonia polysaccharide regulates immunity and restores the dysbiosis of the gut microbiota of the cyclophosphamide-induced immunosuppressed mice[J]. LIU Wei,YAN Ran,ZHANG Liang. Chinese Journal of Natural Medicines. 2019(08)
[7]非酒精性脂肪性肝病发病机制研究进展——聚焦“巨噬细胞及其分子机制”[J]. 王晓晓,饶慧瑛,刘峰. 医学综述. 2019(15)
[8]贯筋藤多糖的提取及其单糖组分分析[J]. 施娅楠,谢文祥,陶亮,黄艾祥. 食品研究与开发. 2019(11)
[9]基于数据挖掘和生物信息分析探讨非酒精性脂肪肝用药规律及作用机制[J]. 丁静,张斌,王培劼,何国浓,魏冬梅,丁佳璐,王邦才. 中国中药杂志. 2019(08)
[10]菊粉复配灵芝多糖对HepG2细胞胰岛素抵抗的调节作用[J]. 刘亚萍,李雨蒙,王梦,张文菱子,张泽生. 中国食品添加剂. 2018(12)
博士论文
[1]益生菌联合益生元防治小鼠非酒精性脂肪肝的作用及机制研究[D]. 姚芳芳.郑州大学 2017
硕士论文
[1]益生乳双歧杆菌V9对高脂饮食诱导的大鼠非酒精性脂肪性肝病的改善作用及机制研究[D]. 刘春妍.内蒙古农业大学 2018
[2]丹参多糖对小鼠免疫性肝损伤的炎症调节机制研究[D]. 韩超.河北农业大学 2018
[3]糖尿病及其他因素与帕金森病的相关性研究[D]. 叶泽明.广州医科大学 2018
[4]肠缺血再灌注刺激下GSNO在调控肠粘膜屏障功能中的作用及机制研究[D]. 彭科.第三军医大学 2015
[5]NAFLD患者肠道菌群改变与膳食因素及血清LPS、IL-18、IL-1β的相关性研究[D]. 陈艳丽.安徽医科大学 2015
[6]红雪茶及其多糖降脂保肝作用的实验研究[D]. 毛贵元.广西医科大学 2012
[7]丹参多糖的提取及生物活性的研究[D]. 吴从平.山东农业大学 2010
本文编号：3062944
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