肝泡型包虫病合并胆道侵犯胆汁中外泌体研究

发布时间：2021-03-11 11:48

　　目的:检测肝泡型包虫病合并胆道侵犯患者胆汁中外泌体miRNAs的表达情况,寻找胆道侵犯生物标记物,为后期研究胆道侵犯机制奠定基础。方法:收集2017年8月至2018年10月就诊于青海大学附属医院、诊断为肝泡型包虫病的病人胆汁样本共12例,观察组（胆道侵犯组）与对照组（非胆道侵犯组）各6例。经超速离心法提取、WB检测及透射电镜观察联合鉴定胆汁中的外泌体结构后,采用Trizol法提取外泌体总RNA,再经miRNAs表达谱芯片实验检测并寻找差异表达的miRNAs。根据差异miRNAs预测胆道侵犯靶基因,并进行通路富集分析。结果:经超速离心法提取的各胆汁样本中外泌体浓度均可满足WB检测及miRNAs表达谱芯片上样要求。经芯片实验,观察组与对照组比较,共有74个差异表达的miRNAs,其中9个表达上调,65个表达下调。根据差异miRNAs预测到45个胆道侵犯靶基因,如AFF3、STK4、PIK3R1等。经Pathway分析,靶基因主要富集在Pathways in cancer（肿瘤发生）、Phosphatidylinositol signaling system（磷脂酰肌醇信号系统）、PTEN等... 

【文章来源】：青海大学青海省 211工程院校

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

超速离心法提取胆汁中外泌体流程图

Biotin HSR RNA Labeling Kit 各试剂s 的生物信息分析分析过程包括：芯片数据的质量评价的功能分析等内容。A 组相对于 B 组数 Fold Change=对照组观察组；若组。以|Fold Change|>2 作为显著性差 miRNAs，在 Targetscan，miRNA.O测，选取 Count 数（即该基因在数据iRNA 的靶基因，以提高可信度。以 FD-value 经 Fisher 精确检验后，再经 Be性指标，进行 Pathway 分析及 GO 注

WB检测各特异性蛋白条带

【参考文献】：
期刊论文
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[2]全国重点寄生虫病的防控形势与挑战[J]. 严俊,胡桃,雷正龙.  中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2015(06)
[3]原发性肝癌侵犯胆道的ERCP特征[J]. 王锦波,何振平,陈维亮.  实用医药杂志. 2004(11)
[4]原发性肝癌侵犯胆道的诊断及治疗[J]. 王锦波,何振平.  肝胆外科杂志. 1999(03)



本文编号：3076407