青藤碱联合骨髓间充质干细胞治疗Con A诱导大鼠免疫性肝损伤的研究
发布时间：2021-03-25 21:02
目的:本实验研究了青藤碱与骨髓间充质干细胞合用是否能治疗Con A诱导的免疫性肝损伤模型,并试图阐述其可能的机制,为青藤碱联合骨髓间充质干细胞治疗免疫性肝炎的应用提供理论依据。方法:1.Con A诱导急性免疫性肝损伤大鼠模型的构建Wistar雌性大鼠42只,随机分为6组,N组为正常对照组,A、B、C、D、E尾静脉分别注射4mg/kg、8mg/kg、16mg/kg,30mg/kg、40mg/kg刀豆蛋白A,第8小时腹主动脉血,全自动生化仪检测检测ALT、AST、ALB,ELISA检测IL-2、IL-10、IFN-γ、TNF-α,肝组织留取行HE染色;Wistar大鼠21只,随机分为正常对照组,腹腔注射组,尾静脉注射组,每组7只,尾静脉注射组和腹腔注射组分别尾静脉和腹腔注射最佳Con A,比较大鼠血清ALT、AST、ALB。2.青藤碱通过免疫调节保护Con A诱导的大鼠急性免疫性肝损伤疗效观察雌性wistar大鼠49只,随机分为6组,模型组、正常组、SIN组（A 60mg/kg、B 90mg/kg、C 120mg/kg、D 150mg/kg）组,每组7只,除正常组外,其余各组均尾静脉注射最...
【文章来源】：广州中医药大学广东省
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
肝组织病理学形态(HEX100)
孵育 30min.ml 冷的 PBS 后 1000rpm 离心 5min，弃去上清，重复操作量 100ul 体积的 PBS 重悬细胞，并上机检测并分析。计学方法 SPSS17.0 统计软件，计量资料结果以（ x s）表示，符合两独立样本 T 检验，多组间比较采用单因素方差分析。1 大鼠 BMSCs 培养及鉴定镜下可观察到：显微镜下可观察到：当原代细胞被接种至培量呈悬浮状的圆形细胞；接种后 24h，部分细胞逐渐贴壁伸梭形；细胞培养 72h 后，细胞形态呈梭形，部分呈纺锤形，的细胞集落形成；细胞培养 4d 后，可见细胞数量逐渐增多野内可见部分细胞围绕中心呈放射状，可见典型的细胞集落 5-7d 后，可见大小不等的细胞球形成；细胞培养 9-10d 后核，数量增多，生长可达 80-90%融合，平行排列呈游祸状梭形为主，可传代。传代后细胞贴壁迅速，2h 即可见明显为梭形；6-7d 后细胞基本融合，即可传下一代。3 代以后细胞样贴壁生长，细胞纯度提高，异质性明显减少。具有 M
生的肝细胞结节，中央静脉周围小区域肝血窦充血明显，肝狄氏间隙中枯否氏细胞增生明显，小叶结构完整，未见假小叶形成。见图 4.图4 各组大鼠肝脏病理组织的变化（HE×200）备注：A正常组、B模型组、 C地塞米松磷酸钠组、 D青藤碱组E间充质干细胞组、 F青藤碱+间充质干细胞组4.3.3 各组大鼠 ALT、AST、ALB、TBIL 的变化与正常组相比，模型组各组大鼠 ALT、AST、TBIL 显著升高（P<0.05）,ALB 降低（P<0.05）；与 SIN 组相比，SIN+BMSCs 组 ALT、AST、TBIL 下降（P<0.05），ALB 未见明显变化（P>0.05）；与 BMSCs 组，SIN+BMSCs 组 ALT、AST、TBIL 显著下降（P<0.05）,ALB 上升（P<0.05），见图 5
【参考文献】：
期刊论文
[1]中药对干细胞诱导分化影响的研究进展[J]. 肖笑枭,王志强,梁锐. 时珍国医国药. 2017(11)
[2]肝细胞程序性坏死在肝损伤中的研究进展[J]. 贾岩,金欢欢,李蒙蒙,王玲,王飞虾,张晨曦,张峰,郑仕中. 中国药理学通报. 2017(12)
[3]氧化苦参碱通过免疫调节保护刀豆蛋白A诱导的小鼠免疫性肝损伤[J]. 桑秀秀,王睿林,韩延忠,崔鹤蓉,尹萍,贺兰芝,刘慧敏,刘士敬,肖小河,柏兆方. 中国实验方剂学杂志. 2017(06)
[4]黄芪多糖在免疫调节方面的最新研究进展[J]. 李钦,胡继宏,高博,李海东,宋爽,杨丽霞. 中国实验方剂学杂志. 2017(02)
[5]间充质干细胞在免疫调节过程中的作用与应用进展[J]. 易桥,卢燕勤,黄宏宇,周典,刘欧胜. 中国组织工程研究. 2016(41)
[6]生物人工肝研究进展[J]. 高义萌,孙露露,惠利健. 生命科学. 2016(08)
[7]恩替卡韦联合或序贯干扰素治疗慢性乙型肝炎的现状、问题与前景[J]. 顾生旺,吴德平,李荣清. 世界华人消化杂志. 2016(18)
[8]糖皮质激素阻止肝衰竭发生与发展的机制[J]. 张辉艳,张绪清. 胃肠病学和肝病学杂志. 2016(05)
[9]自身免疫性肝病临床诊治研究进展[J]. 艾月梅,严玉娟,邢益平. 实用肝脏病杂志. 2016(03)
[10]刀豆蛋白A诱导的C57BL/6J小鼠急性免疫性肝损伤模型的研究[J]. 李红,于慧杰,盛国光. 中西医结合肝病杂志. 2016(02)
博士论文
[1]中药对骨髓间充质干细胞免疫调节作用干预的实验研究[D]. 郑杰.广州中医药大学 2006
硕士论文
[1]IFN-α在NK细胞抗小鼠肝纤维化作用中的机制[D]. 林晓瑾.福建医科大学 2015
[2]慢性乙型肝炎患者外周血细胞因子（IFN-γ和IL-4）水平与肝损伤的关系[D]. 周蔚.蚌埠医学院 2011
本文编号：3100324
【文章来源】：广州中医药大学广东省
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
肝组织病理学形态(HEX100)
孵育 30min.ml 冷的 PBS 后 1000rpm 离心 5min，弃去上清，重复操作量 100ul 体积的 PBS 重悬细胞，并上机检测并分析。计学方法 SPSS17.0 统计软件，计量资料结果以（ x s）表示，符合两独立样本 T 检验，多组间比较采用单因素方差分析。1 大鼠 BMSCs 培养及鉴定镜下可观察到：显微镜下可观察到：当原代细胞被接种至培量呈悬浮状的圆形细胞；接种后 24h，部分细胞逐渐贴壁伸梭形；细胞培养 72h 后，细胞形态呈梭形，部分呈纺锤形，的细胞集落形成；细胞培养 4d 后，可见细胞数量逐渐增多野内可见部分细胞围绕中心呈放射状，可见典型的细胞集落 5-7d 后，可见大小不等的细胞球形成；细胞培养 9-10d 后核，数量增多，生长可达 80-90%融合，平行排列呈游祸状梭形为主，可传代。传代后细胞贴壁迅速，2h 即可见明显为梭形；6-7d 后细胞基本融合，即可传下一代。3 代以后细胞样贴壁生长，细胞纯度提高，异质性明显减少。具有 M
生的肝细胞结节，中央静脉周围小区域肝血窦充血明显，肝狄氏间隙中枯否氏细胞增生明显，小叶结构完整，未见假小叶形成。见图 4.图4 各组大鼠肝脏病理组织的变化（HE×200）备注：A正常组、B模型组、 C地塞米松磷酸钠组、 D青藤碱组E间充质干细胞组、 F青藤碱+间充质干细胞组4.3.3 各组大鼠 ALT、AST、ALB、TBIL 的变化与正常组相比，模型组各组大鼠 ALT、AST、TBIL 显著升高（P<0.05）,ALB 降低（P<0.05）；与 SIN 组相比，SIN+BMSCs 组 ALT、AST、TBIL 下降（P<0.05），ALB 未见明显变化（P>0.05）；与 BMSCs 组，SIN+BMSCs 组 ALT、AST、TBIL 显著下降（P<0.05）,ALB 上升（P<0.05），见图 5
【参考文献】：
期刊论文
[1]中药对干细胞诱导分化影响的研究进展[J]. 肖笑枭,王志强,梁锐. 时珍国医国药. 2017(11)
[2]肝细胞程序性坏死在肝损伤中的研究进展[J]. 贾岩,金欢欢,李蒙蒙,王玲,王飞虾,张晨曦,张峰,郑仕中. 中国药理学通报. 2017(12)
[3]氧化苦参碱通过免疫调节保护刀豆蛋白A诱导的小鼠免疫性肝损伤[J]. 桑秀秀,王睿林,韩延忠,崔鹤蓉,尹萍,贺兰芝,刘慧敏,刘士敬,肖小河,柏兆方. 中国实验方剂学杂志. 2017(06)
[4]黄芪多糖在免疫调节方面的最新研究进展[J]. 李钦,胡继宏,高博,李海东,宋爽,杨丽霞. 中国实验方剂学杂志. 2017(02)
[5]间充质干细胞在免疫调节过程中的作用与应用进展[J]. 易桥,卢燕勤,黄宏宇,周典,刘欧胜. 中国组织工程研究. 2016(41)
[6]生物人工肝研究进展[J]. 高义萌,孙露露,惠利健. 生命科学. 2016(08)
[7]恩替卡韦联合或序贯干扰素治疗慢性乙型肝炎的现状、问题与前景[J]. 顾生旺,吴德平,李荣清. 世界华人消化杂志. 2016(18)
[8]糖皮质激素阻止肝衰竭发生与发展的机制[J]. 张辉艳,张绪清. 胃肠病学和肝病学杂志. 2016(05)
[9]自身免疫性肝病临床诊治研究进展[J]. 艾月梅,严玉娟,邢益平. 实用肝脏病杂志. 2016(03)
[10]刀豆蛋白A诱导的C57BL/6J小鼠急性免疫性肝损伤模型的研究[J]. 李红,于慧杰,盛国光. 中西医结合肝病杂志. 2016(02)
博士论文
[1]中药对骨髓间充质干细胞免疫调节作用干预的实验研究[D]. 郑杰.广州中医药大学 2006
硕士论文
[1]IFN-α在NK细胞抗小鼠肝纤维化作用中的机制[D]. 林晓瑾.福建医科大学 2015
[2]慢性乙型肝炎患者外周血细胞因子（IFN-γ和IL-4）水平与肝损伤的关系[D]. 周蔚.蚌埠医学院 2011
本文编号：3100324
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/xiaohjib/3100324.html
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