大鼠TGF-β 3 基因的克隆及其对肝星状细胞TGF-β 1 和I型胶原合成的影响

发布时间：2021-04-08 06:10

　　第一部分大鼠转化生长因子-β₃基因的克隆及其在肝星状细胞中的表达目的:克隆大鼠TGF-β₃基因并观察其在转染肝星状细胞株（HSC-T6）后的表达情况。方法:采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）从大鼠成骨细胞中扩增出特异性片段,经酶切鉴定证实为大鼠TGF-β₃cDNA,将此片段插入pcDNA3.1（+）表达载体,构建得到pcDNA3.1（+）-TGF-β₃重组质粒。应用阳离子脂质体介导的基因转移技术将TGF-β₃表达载体导入HSC-T6,在转染24h、48h、72h后,用荧光定量PCR法进行瞬时表达的检测。结果:①重组真核表达载体pcDNA3.1（+）-TGF-β₃经限制性内切酶NheI、XbaI酶切,电泳后显示1.2kb的TGF-β₃目的片段和5.4kb的pcDNA3.1（+）载体片段,经测序证实酶切片段与GenBank中登记的TGF-β₃序列相同,证实pcDNA3.1（+）-TGF-β₃

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

重组质粒结构示意图

【参考文献】：
期刊论文
[1]转化生长因子-β3对增生性瘢痕成纤维细胞的生物学作用（英文）[J]. 唐世杰,胡素銮,王玉银,申纪奎.  中国临床康复. 2004(17)
[2]结缔组织生长因子及其在胰腺纤维化中的作用机制[J]. 孙蕴伟,袁耀宗.  胰腺病学. 2003(02)



本文编号：3125010