寡聚脱氧核苷酸对小鼠急性酒精性肝损伤的影响

发布时间：2021-04-10 02:28

　　酒精性肝病已经成为我国第二大肝病。有研究表明，酒精导致的肝损伤与天然免疫的激活及炎性细胞因子的产生有关。目前认为，Toll样受体（Toll-likereceptor, TLR）4与酒精性肝损伤关系密切，我们考虑，既然TLR4与其配体的相互作用在酒精性肝损伤中发挥着重要作用，那么其它TLR与其配体的作用是否也会影响酒精性肝损伤呢？而且，酒精会导致肝细胞的凋亡或坏死，那么肝细胞释放出来的DNA是否会通过与肝脏内细胞的TLR9结合从而影响酒精性肝损伤呢？酒精可致肠粘膜渗透性增加，肠道内的细菌DNA是否也会进入肝脏并通过TLR9对肝损伤有影响呢？基于以上考虑及本课题组在免疫调节方面积累的大量工作基础，我们通过给灌酒小鼠腹腔注射TLR9的配体——人工合成的含CpG基序的单链脱氧寡核苷酸（CpG ODN），来研究肝脏内TLR9与其配体的相互作用对酒精性肝损伤的影响。我们选用雄性ICR小鼠作为研究对象，通过给小鼠按7g/kg50%乙醇溶液灌胃的方法制造急性酒精性肝损伤模型，以血清中谷丙转氨酶（ALT）水平及肝脏病理变化作为衡量肝损伤的指标。我们首先选择了本科室自行研制的一种C型CpG ODN—YW0... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：139 页

【学位级别】：博士

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提要
中文摘要
Abstract
前言
第1章 文献回顾
    1.1 酒精性肝损伤
        1.1.1 酒精性肝病
        1.1.2 酒精性肝损伤的影响因素
        1.1.3 酒精导致肝损伤的可能机理
    1.2 寡聚脱氧核苷酸（ODN）
        1.2.1 CpG ODN
        1.2.2 抑制性 ODN（sODN，suppressive ODN）
第2章 材料和方法
    2.1 主要材料和仪器
        2.1.1 ODN
        2.1.2 试剂
        2.1.3 细胞和细胞株
        2.1.4 病毒
        2.1.5 实验动物
    2.2 主要方法
        2.2.1 ODN 的配制、定量及内毒素检测
        2.2.2 酒精溶液的配制
        2.2.3 动物实验
        2.2.4 血清 ALT 水平的检测
        2.2.5 肝脏病理学分析
        2.2.6 MDA 含量的检测
        2.2.7 血清中 TNF-α含量的检测
        2.2.8 肝组织 TNF-α表达水平的检测
        2.2.9 肝组织中 TLR9, TLR4, IFN-α, IFN-β及 TNF-α的检测
        2.2.10 VSV 病毒保护实验
        2.2.11 MTT
        2.2.12 统计分析
第3章 结果
    3.1 小鼠急性酒精性肝损伤模型的建立
    3.2 CpG ODN 对小鼠急性酒精性肝损伤的影响
        3.2.1 灌酒的同时给予 C 型 CpG ODN 对小鼠急性酒精性肝损伤的影响
        3.2.2 灌酒前给予 C 型 CpG ODN 对小鼠急性酒精性肝损伤的影响
        3.2.3 灌酒后给予 CpG ODN 对小鼠急性酒精性肝损伤的影响
        3.2.4 不同剂量的 2216 对小鼠急性酒精性肝损伤的影响
        3.2.5 2216 的不同给药途径对小鼠急性酒精性肝损伤的影响
        3.2.6 不同型别 CpG ODN 对小鼠急性酒精性肝损伤的不同作用的可能机制
    3.3 抑制性 ODN 对小鼠急性酒精性肝损伤的影响
        3.3.1 灌酒的同时给予抑制性 ODN—MT01 对小鼠急性酒精性肝损伤的影响
        3.3.2 灌酒前给予 MT01 对小鼠急性酒精性肝损伤的影响
        3.3.3 灌酒后给予抑制性 ODN 对小鼠急性酒精性肝损伤的影响
        3.3.4 MT01 减轻小鼠急性酒精性肝损伤的机制探讨
第4章 讨论
    4.1 酒精性肝损伤动物模型的选取及评判指标
    4.2 CpG ODN 对小鼠急性酒精性肝损伤的影响
    4.3 抑制性 ODN 对小鼠急性酒精性肝损伤的影响
    4.4 展望
结论
参考文献
作者简介及在学期间所取得的科研成果
致谢



本文编号：3128774