人源静息态胰腺星状细胞的改良分离方法

发布时间：2021-04-11 00:07

　　背景:胰腺星状细胞（Pancreatic stellate cells,PSCs）是一种位于胰腺小叶和腺泡周围区域之间的间质细胞。在正常胰腺组织中,PSCs的主要功能是储脂,富含脂滴,内含大量维生素A,增殖缓慢,呈静息态表型。在各种理化因素的刺激下,PSCs激活后可以转化为肌成纤维细胞样细胞。而活化的胰腺星状细胞作为胰腺导管癌（Pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC）和慢性胰腺炎（Chronic pancreatitis,CP）中胰腺纤维化进程中的主要间质细胞,分泌大量细胞外基质（extracellular matrix,ECM）,加速了胰腺疾病的发生发展。随着近年来PSCs领域研究的不断推进,最新的证据发现,PSCs在内分泌细胞功能,胰岛纤维化和糖尿病中也起着重要作用。然而,人源静息态的胰腺星状细胞分离由于胰腺组织的自溶性导致原代细胞成活率和分离成功率不够稳定,所以我们在现有PSCs原代分离的技术上,进一步简化优化了方案,为能够更好的推进胰腺星状细胞领域的研究提供了实验依据。目的:探讨一种简便、高产的人静息态胰腺星状细胞（Normal Pancre... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

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【学位级别】：硕士

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NPSCs的分离和培养

安徽医科大学硕士学位论文A：Percoll 密度梯度离心分层B：NPSCs 分离后活细胞计数（200×）C：新鲜分离的 NPSCs 细胞形态（200×）D：培养 12 小时后逐渐贴壁的 NPSCs 细胞形态（200×）缩略词：NPSCs（normal pancreatic stellate cells，静息态胰腺星状细胞）Figure 1 Isolation and culture of NPSCs.(A) Percoll density gradient centrifugation layering;(B) cell count after isolation (200×);(C) the cell morphology of freshly isolated NPSCs (200×);(D) cell morphology of NPSCs gradually adhering after 12 hours of culture (200×)Abbreviation: NPSC, normal pancreatic stellate cell.

培养时段的 PSCs 活化相关标志物蛋白表达量的新鲜分离体外培养 3 天的 NPSCs；10d 组细胞为PSCsPSCs（normal pancreatic stellate cells，静息态胰腺tellate cells，活化态胰腺星状细胞）；Vimentin（GFAP（胶质细胞酸性蛋白）；Desmin（结蛋白ctivation-related indicator expression of differenion.ns: APSCs, activated pancreatic stellate cells; NPSCs; PSCs, pancreatic stellate cells; 3 d, freshly isolatedAPSCs cultured for 10 days; GFAP, glial fibrillary

【参考文献】：
期刊论文
[1]Shattering the castle walls: Anti-stromal therapy for pancreatic cancer[J]. Ozkan Kanat,Hulya Ertas.  World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2018(08)
[2]Pancreatic stellate cell: Pandora’s box for pancreatic disease biology[J]. Ratnakar R Bynigeri,Aparna Jakkampudi,Ramaiah Jangala,Chivukula Subramanyam,Mitnala Sasikala,G Venkat Rao,D Nageshwar Reddy,Rupjyoti Talukdar.  World Journal of Gastroenterology. 2017(03)
[3]腹主动脉灌注法分离胰腺星状细胞及其培养、鉴定[J]. 周龙安,杨桂元,钱祝银.  南京医科大学学报(自然科学版). 2007(01)
[4]大鼠胰星状细胞的分离与培养[J]. 贾一韬,李兆申.  胰腺病学. 2003(03)



本文编号：3130581