利拉鲁肽通过miR-124a/ATGL/Sirt1信号通路改善非酒精性脂肪性肝病的机制研究
发布时间：2021-04-17 23:01
目的:由于肥胖和2型糖尿病（T2DM）的流行,非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的发病率逐年增高,目前已成为慢性肝脏疾病的主要病因。有效治疗NAFLD不但可以减少终末期肝病发病率,而且可以降低T2DM大血管和微血管并发症及心血管疾病死亡率,因此,对于NAFLD的防治刻不容缓。近年来,越来越多的研究表明胰高血糖素样肽-1受体激动剂（GLP-1Ra）利拉鲁肽可以安全有效的改善NAFLD,然而其潜在机制尚未阐明。本研究以高脂饮食（HFD）诱导的NAFLD小鼠和棕榈酸（PA）诱导脂肪变的人肝细胞系（HL-7702）为研究对象,旨在探讨高脂对肝脏脂质代谢的关键酶—脂肪甘油三酯脂肪酶（ATGL）的影响,并探究其在NAFLD发生和发展中的重要作用;通过RNA芯片和生物数据库筛选出影响ATGL表达的miR-124a,进一步应用细胞转染技术验证miR-124a是否通过抑制ATGL/Sirt1信号通路进而影响肝细胞内脂质代谢和炎症反应;并且应用利拉鲁肽干预NAFLD小鼠和PA诱导的脂肪变的肝细胞,进一步探讨利拉鲁肽是否通过miR-124a/ATGL/Sirt1信号通路改善NAFLD。方法:1.以HFD诱导的...
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：85 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
正常和高脂饮食组小鼠体重和血脂指标
天津医科大学硕士学位论文1.2.2 NAFLD 小鼠动物模型的建立HFD 12 周末，处死小鼠，获取小鼠肝脏组织，制作肝脏冰冻切片后，H和油红 O 染色显示 HFD 小鼠肝脏内脂质沉积明显高于 chow 组。定量检测肝脏内脂质含量，HFD 小鼠肝脏内甘油、TG 和 TC 均明显高于 chow 组小鼠，差异均具有统计学意义（P < 0.05）（如图 2A-D）。由于肝脏内脂质沉积可诱导炎症反应的发生，并进一步促进 NAFLD 向 NASH 进展，因此我们检测了肝脏内炎性指标。免疫组织化学染色显示巨噬细胞标记物 CD68 在 HFD 组小鼠肝脏中的表达明显高于 chow 组小鼠。qRT-PCR 进一步检测发现，HFD 组小鼠肝脏中的炎性因子 IL-1β、TNF-α和 NF-κB p65 的表达量均明显高于 chow 组小鼠，差异均具有统计学意义（P < 0.05）（如图 2E-F）。
图 3 两组小鼠肝脏内脂质代谢相关基因的比较1.2.4 ATGL 在脂肪变肝脏组织中表达下降提取上述两组小鼠肝脏组织蛋白样品，western blot 进一步检测肝脏中 ATGL的蛋白表达，结果显示，与 chow 小鼠相比，HFD 组小鼠肝脏中 ATGL 蛋白表达明显下降，差异具有统计学意义（P < 0.05）（如图 4A）。肝脏组织 ATGL 免疫荧光结果显示 chow 小鼠肝脏中 ATGL 表达量明显高于 HFD 小鼠，差异具有统计学意义（P < 0.05），与 western blot 检测结果一致（如图 4B）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]miRNA-103: Molecular link between insulin resistance and nonalcoholic fatty liver disease[J]. Qian Xu,Ying Li,Yong-Fang Shang,Hui-Ling Wang,Min-Xiu Yao. World Journal of Gastroenterology. 2015(02)
[2]Circulating microRNAs in patients with non-alcoholic fatty liver disease[J]. Serkan Dogan,Gokmen Zararsiz,Sebnem Gursoy,Kadri Guven,Omer Ozbakir,Munis Dundar,Mehmet Yucesoy. World Journal of Hepatology. 2014(08)
[3]Current status and agenda in the diagnosis of nonalcoholic steatohepatitis in Japan[J]. Yoshio Sumida,Yuichiro Eguchi,Masafumi Ono. World Journal of Hepatology. 2010(10)
本文编号：3144295
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：85 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
正常和高脂饮食组小鼠体重和血脂指标
天津医科大学硕士学位论文1.2.2 NAFLD 小鼠动物模型的建立HFD 12 周末，处死小鼠，获取小鼠肝脏组织，制作肝脏冰冻切片后，H和油红 O 染色显示 HFD 小鼠肝脏内脂质沉积明显高于 chow 组。定量检测肝脏内脂质含量，HFD 小鼠肝脏内甘油、TG 和 TC 均明显高于 chow 组小鼠，差异均具有统计学意义（P < 0.05）（如图 2A-D）。由于肝脏内脂质沉积可诱导炎症反应的发生，并进一步促进 NAFLD 向 NASH 进展，因此我们检测了肝脏内炎性指标。免疫组织化学染色显示巨噬细胞标记物 CD68 在 HFD 组小鼠肝脏中的表达明显高于 chow 组小鼠。qRT-PCR 进一步检测发现，HFD 组小鼠肝脏中的炎性因子 IL-1β、TNF-α和 NF-κB p65 的表达量均明显高于 chow 组小鼠，差异均具有统计学意义（P < 0.05）（如图 2E-F）。
图 3 两组小鼠肝脏内脂质代谢相关基因的比较1.2.4 ATGL 在脂肪变肝脏组织中表达下降提取上述两组小鼠肝脏组织蛋白样品，western blot 进一步检测肝脏中 ATGL的蛋白表达，结果显示，与 chow 小鼠相比，HFD 组小鼠肝脏中 ATGL 蛋白表达明显下降，差异具有统计学意义（P < 0.05）（如图 4A）。肝脏组织 ATGL 免疫荧光结果显示 chow 小鼠肝脏中 ATGL 表达量明显高于 HFD 小鼠，差异具有统计学意义（P < 0.05），与 western blot 检测结果一致（如图 4B）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]miRNA-103: Molecular link between insulin resistance and nonalcoholic fatty liver disease[J]. Qian Xu,Ying Li,Yong-Fang Shang,Hui-Ling Wang,Min-Xiu Yao. World Journal of Gastroenterology. 2015(02)
[2]Circulating microRNAs in patients with non-alcoholic fatty liver disease[J]. Serkan Dogan,Gokmen Zararsiz,Sebnem Gursoy,Kadri Guven,Omer Ozbakir,Munis Dundar,Mehmet Yucesoy. World Journal of Hepatology. 2014(08)
[3]Current status and agenda in the diagnosis of nonalcoholic steatohepatitis in Japan[J]. Yoshio Sumida,Yuichiro Eguchi,Masafumi Ono. World Journal of Hepatology. 2010(10)
本文编号：3144295
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/xiaohjib/3144295.html
最近更新
教材专著
