NOX4/ROS和RhoA/ROCK1信号通路在肝纤维化中的作用及熊果酸的干预靶点

发布时间：2021-04-22 03:08

　　背景:NADPH氧化酶（NOX）,特别是丰富存在于肝星状细胞（HSCs）中的NOX4及其产生的活性氧簇（ROS）诱导氧化应激参与肝纤维化的发生发展。RhoA及其效应分子ROCK1为调节肌动蛋白细胞骨架和细胞形态异质性的关键因子,在HSCs活化转化为肌成纤维母细胞过程中发挥了重要作用。近年研究表明,NOX4/ROS可作为上游分子调控RhoA/ROCK1的表达,诱导肺纤维化的发生发展;而在肾纤维化进程中,两者关系相反。目前两者在肝纤维化中是否存在上述关系或其他调控作用未见报道。我们既往体外研究表明熊果酸（UA）可通过抑制HSCs中NOX4/ROS的活化,下调RhoA同源基因家族成员Rac1的表达,逆转肝纤维化。但UA体内干预对RhoA/ROCK1的作用未见报道。本课题利用肝纤维化小鼠、NOX4基因敲除(NOX4^-/-)肝纤维化小鼠、加拿大麻素（AP）及UA干预的肝纤维化小鼠,探索NOX4/ROS和RhoA/ROCK1在肝纤维化中的作用及两者的上下游关系,并观察UA是否可抑制NOX4/ROS和RhoA/ROCK1信号通路从而逆转肝纤维化。目的:初步探索NOX4/ROS和... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
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中英文缩略词表
第1章 引言
第2章 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要仪器
    2.2 研究方法
        2.2.1 主要溶液配制
        2.2.2 实验分组、肝纤维化模型制备及药物处理
        2.2.3 检测小鼠肝功能
        2.2.4 肝脏组织病理学检查
        2.2.5 比色法检测肝脏组织羟脯氨酸含量
        2.2.6 TBA法检测肝脏组织MDA含量
        2.2.7 Westernblot检测肝脏组织NOX4、RhoA、ROCK1 及纤维化相关蛋白表达
-/-小鼠子代是否为纯合子">        2.2.8 半定量PCR实验验证NOX4^-/-小鼠子代是否为纯合子
        2.2.9 实时荧光定量PCR检测肝脏组织NOX4、RhoA、ROCK1 mRNA表达
    2.3 统计学处理
第3章 结果
    3.1 肝纤维化小鼠肝脏NOX4 及其介导的氧化应激与RhoA、ROCK1 表达
        3.1.1 肝纤维化小鼠肝组织NOX4 蛋白与氧化应激产物MDA表达
        3.1.2 肝纤维化小鼠肝组织RhoA、ROCK1 蛋白表达
-/-及AP干预对小鼠肝纤维化的影响">    3.2 NOX4^-/-及AP干预对小鼠肝纤维化的影响
-/-小鼠子代验证">        3.2.1 纯合子NOX4^-/-小鼠子代验证
-/-及AP干预对小鼠肝组织胶原纤维及羟脯氨酸含量的影响">        3.2.2 NOX4^-/-及AP干预对小鼠肝组织胶原纤维及羟脯氨酸含量的影响
-/-及AP干预对小鼠肝功能及氧化应激的影响">        3.2.3 NOX4^-/-及AP干预对小鼠肝功能及氧化应激的影响
-/-及AP干预对小鼠肝纤维化相关蛋白的影响">        3.2.4 NOX4^-/-及AP干预对小鼠肝纤维化相关蛋白的影响
-/-及AP干预对小鼠肝组织RhoA/ROCK1 的影响">    3.3 NOX4^-/-及AP干预对小鼠肝组织RhoA/ROCK1 的影响
-/-及AP干预对肝组织RhoA、ROCK1 mRNA的影响">        3.3.1 NOX4^-/-及AP干预对肝组织RhoA、ROCK1 mRNA的影响
-/-及AP干预对肝组织RhoA、ROCK1 蛋白的影响">        3.3.2 NOX4^-/-及AP干预对肝组织RhoA、ROCK1 蛋白的影响
    3.4 熊果酸对肝纤维化小鼠肝细胞凋亡与HSCs活化的影响
    3.5 熊果酸对肝纤维化小鼠肝脏NOX4 及其介导的氧化应激的影响
        3.5.1 熊果酸对肝纤维化小鼠肝组织NOX4 mRNA的影响
        3.5.2 熊果酸对肝纤维化小鼠肝组织NOX4 蛋白的影响
        3.5.3 熊果酸对肝纤维化小鼠肝组织氧化应激的影响
-/-小鼠肝纤维化及Rho A/ROCK1 信号通路的影响">    3.6 熊果酸对NOX4^-/-小鼠肝纤维化及Rho A/ROCK1 信号通路的影响
-/-肝纤维化小鼠肝脏组织病理及羟脯氨酸含量的影响">        3.6.1 熊果酸对NOX4^-/-肝纤维化小鼠肝脏组织病理及羟脯氨酸含量的影响
-/-肝纤维化小鼠RhoA、ROCK1mRNA的影响">        3.6.2 熊果酸对NOX4^-/-肝纤维化小鼠RhoA、ROCK1mRNA的影响
-/-肝纤维化小鼠RhoA、ROCK1 蛋白的影响">        3.6.3 熊果酸对NOX4^-/-肝纤维化小鼠RhoA、ROCK1 蛋白的影响
第4章 讨论
    4.1 NOX4/ROS信号通路对肝纤维化的影响
    4.2 RhoA/ROCK1 信号通路对肝纤维化的影响
    4.3 NOX4/ROS与 RhoA/ROCK1 信号通路的相互调控作用
    4.4 熊果酸逆转肝纤维化的作用机制及分子靶点
第5章 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 展望
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]熊果酸抑制肝纤维化的研究进展[J]. 江家鹏,黄菊芳,张扬武.  大众科技. 2020(05)



本文编号：3153038