IBD中MicroRNA-141靶点调控及治疗研究

发布时间：2021-04-22 20:08

　　炎症性肠炎（IBD）是胃肠道一种慢性、易复发的自身免疫性疾病,细胞因子平衡失调所致的免疫异常是IBD的重要发病机制。深入研究IBD中重要细胞因子的调控过程不论对IBD发病机理的认识还是对IBD的治疗都具有非常重要的意义。近年来研究发现miRNA对免疫系统具有调控作用,能够微调控免疫反应过程,但是miRNA在IBD中对细胞因子的调控机制尚未得到深入的阐明。本论文在TNBS诱导的小鼠IBD模型中,通过miRNA芯片技术和生物信息学分析等方法建立IBD小鼠miRNA差异表达谱；从细胞因子的生物学功能出发,利用TargetScan、Miranda和PicTar三个软件预测调控趋化因子CXCL12的miR-141；并深入研究miR-141在IBD发生中的作用。我们应用荧光素酶报告系统在体外研究发现,miR-141能直接作用于CXCL12的3’-UTR的种子序列,同时我们提取结肠上皮细胞对其mRNA水平和蛋白水平进行验证,体内研究发现炎症性结肠组织中miRNA-141表达和CXCL12蛋白的表达无论在小鼠肠炎模型以及CD病人的结肠组织中表达均呈负相关,这些结果提示miR-141可通过调控趋化因子C... 

【文章来源】：南京大学江苏省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
综述部分
    一、炎症性肠炎的概述
        1 炎症性肠炎简介
        2 炎症性肠炎致病机理
        3 炎症性肠炎治疗现状
        4 炎症性肠炎的动物模型
    二、炎症性肠炎中的microRNA概述
        1 microRNA概述
        2 microRNA与炎症性肠炎
        3 microRNA与疾病治疗
    三、趋化因子在炎症性肠炎中的作用
        1 趋化因子概述
    参考文献
实验部分
    一、引言
    二、实验仪器和材料
        1 实验仪器
        2 实验材料
    三、实验方法
        1 TNBS小鼠模型构建及给药处理
        2 TNBS模型小鼠血清microRNA谱的测定
        3 TNBS小鼠模型结肠组织芯片及Q-PCR验证
        4 microRNA靶点的理论预测
        5 荧光素酶报告载体构建
        6 细胞转染实验
        7 细胞迁移实验
        8 Elisa实验
        9 免疫荧光染色
        10 结肠上皮细胞提取（螯合剂法）
        11 TNBS诱导肠炎小鼠的治疗
        12 结肠组织HE病理分析
        13 髓过氧化物酶（MPO）活性测定
    四、实验结果和讨论
        1 TNBS诱导的结肠炎小鼠模型的构建结果
        2 microRNA表达谱测定结果
        3. miR-141与靶点CXCL12的表达相关性
        4 趋化实验
        5 miRNA-141对TNBS结肠炎小鼠的治疗结果
    五、小结
已发表的论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]CXCR4 antagonist AMD3100 attenuates colonic damage in mice with experimental colitis[J]. Xian-Ming Xia,Fang-Yu Wang,Wen-An Xu,Zhen-Kai Wang,Jiong Liu,You-Ke Lu,Xin-Xin Jin,Heng Lu,Yun-Zhu Shen,Department of Gastroenterology and Hepatology,Jinling Hospital,Nanjing 210002,Jiangsu Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2010(23)



本文编号：3154391