siRNA沉默Smad3对肝星状细胞增殖与凋亡的影响及其机制研究

发布时间：2021-04-23 21:19

　　目的:观察Smad3小干扰RNA（siRNA-Smad3）沉默肝星状细胞（HSCs）Smad3基因对肝星状细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法:肝星状细胞株HSCs-T6分为3组:空白对照组、阴性对照组、siR-NA-Smad3转染组。siRNA-Smad3转染HSCs细胞株,转染不同时间后,CCK-8检测HSCs增殖的变化,流式细胞术检测HSCs凋亡的变化,免疫细胞化学法检测HSCs凋亡相关蛋白P53和Bcl-2表达的变化。结果:（1）24 h、48 h、72 h siRNA-Smad3转染组HSCs增殖受到显著抑制且凋亡明显增多（P<0.01）。（2）转染48 h后,siRNA-Smad3转染组P53蛋白表达显著增多,Bcl-2蛋白表达显著减少（P<0.01）。结论:siRNA-Smad3沉默Smad3基因可以在一定时间内显著抑制HSCs的增殖并诱导其凋亡,其可能通过上调凋亡相关蛋白P53表达、下调Bcl-2的表达来发挥诱导凋亡的作用;Smad3沉默有望成为抗肝纤维化治疗的一个新途径。 

【文章来源】：中国病理生理杂志. 2011,27(07)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
材 料 和 方 法
    1 材料和主要试剂
        1.1 细胞株和主要试剂
        1.2 siRNA的合成
    2 方法
        2.1 HSCs-T6细胞株的培养及转染
        2.2 CCK-8检测细胞的增殖抑制率
        2.3 Annexin V/PI双标法流式细胞仪检测细胞凋亡率
        2.4 免疫细胞化学染色法 （PowerVision二步法） 检测P53和Bcl-2蛋白表达
    3 统计学处理
结 果
    1 siRNA-Smad3转染对HSCs增殖抑制的影响
    2 siRNA-Smad3转染对HSCs凋亡的影响
    3 siRNA-Smad3转染对HSCs P53、Bcl-2蛋白表达的影响
        3.1 P53蛋白的表达
        3.2 Bcl-2蛋白的表达
        3.3 免疫细胞化学染色图像分析
讨 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]siRNA沉默Smad3对人KFB细胞增殖、凋亡及合成MMP3的影响[J]. 刘波,张恒术,果磊.  免疫学杂志. 2009(03)
[2]姜黄素诱导肝星状细胞凋亡的相关分子机制的初步研究[J]. 舒建昌,何雅军,吕霞,沈雁,潘洁,叶国荣.  中华消化杂志. 2006(11)
[3]丹芍化纤胶囊治疗大鼠肝纤维化后肝星状细胞凋亡及细胞周期的变化[J]. 杨勤,罗新华,耿晓霞,谢汝佳,韩冰,李诚秀,程明亮.  中国病理生理杂志. 2005(05)
[4]抗肝纤维化治疗的趋势[J]. 张定凤.  中华肝脏病杂志. 2007 (10)



本文编号：3156059