利用杆状病毒表达载体系统制备HBV核心颗粒

发布时间：2021-04-26 17:29

　　目的利用杆状病毒表达载体系统（Baculovirus expression vector system,BEVS）制备HBV核心颗粒,以用于新型抗病毒药物体外抗病毒活性的实验研究。方法构建含有乙型肝炎病毒聚合酶基因（HBV P基因）和核心蛋白基因（HBV C基因）的重组质粒pFastbac Dual-P-C,转化大肠杆菌DH10Bac进行转座,提取重组Bacmid DNA转染昆虫细胞,获得含有HBV P基因和C基因的重组杆状病毒。用重组杆状病毒感染昆虫Sf9细胞进行蛋白表达,然后通过免疫共沉淀纯化目的蛋白,行SDS-PAGE电泳与银染及RT-PCR检测各成分。结果成功构建了含HBV P基因和C基因的重组杆状病毒,且能在昆虫细胞中表达目的蛋白并进行纯化,纯化产物中含HBV聚合酶、核心蛋白和RNA。结论利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统,能成功地构建出含HBV P基因和C基因的重组杆状病毒,在昆虫细胞中进行表达,并纯化出HBV核心颗粒,为进一步研究新型抗HBV药物的作用机制等奠定了基础。 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：44 页

【学位级别】：硕士

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二、结果
三、讨论
参考文献
综述
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本文编号：3161817