具有抗幽门螺杆菌感染作用乳杆菌的筛选及其临床效果评价

发布时间：2021-04-27 13:39

　　幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H.pylori）感染是消化性胃溃疡、慢性胃炎和胃癌等多种消化道疾病的重要致病因素,根除H.pylori是预防胃肠道疾病的有效手段。而目前的疗法频繁使用抗生素,H.pylori出现的抗药性以及患者的不良反应大大降低了其治疗有效性。大量细胞和动物实验证明乳杆菌具有拮抗H.pylori并降低其定殖的作用效果,然而相关的临床研究数量较少,且主要集中在国外商业菌株如鼠李糖乳杆菌GG。因此,本研究拟通过体外体内实验筛选潜在抗H.pylori感染的菌株,并评价其临床作用效果,以期开发可用于干预治疗H.pylori感染的自主知识产权乳杆菌。首先评价了98株乳杆菌体外抑菌能力和降低H.pylori粘附胃上皮细胞的作用效果,发现其中66株乳杆菌有不同程度的抑菌作用（抑菌圈直径在9.41-13.88 mm之间）,其中9株乳杆菌能显著降低H.pylori粘附（粘附率降低值在24.76%-31.26%之间）。选取了7株可有效抑菌和降低H.pylori粘附的乳杆菌,并进一步结合16S rRNA扩.增子测序和实时荧光定量PCR技术考察其在小鼠胃部的定殖能力。结果... 

【文章来源】：江南大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
中英文缩写词对照表
1 绪论
    1.1 幽门螺杆菌及其潜在致病效应
        1.1.1 H.pylori的生理特性和致病机制
        1.1.2 H.pylori感染的临床影响
        1.1.3 H.pylori感染的防治策略
    1.2 乳杆菌抗H.pylori感染的研究进展
        1.2.1 乳杆菌抗H.pylori感染的体外实验研究
        1.2.2 乳杆菌抗H.pylori感染的动物实验研究
        1.2.3 乳杆菌抗H.pylori感染的临床实验研究
    1.3 乳杆菌抗H.pylori感染的机理研究
        1.3.1 抑制H.pylori生长
        1.3.2 抑制H.pylori粘附
        1.3.3 降低H.pylori体内定殖
        1.3.4 其他机理
    1.4 研究内容与意义
        1.4.1 立题背景与意义
        1.4.2 主要研究内容
2 材料与方法
    2.1 实验材料与设备
        2.1.1 实验菌株和细胞株
        2.1.2 实验动物
        2.1.3 主要试剂
        2.1.4 主要设备
    2.2 体外实验方法
        2.2.1 实验菌株的保藏和培养
        2.2.2 乳杆菌抑菌效果的测定
        2.2.3 乳杆菌抑制H.pylori粘附能力的测定
        2.2.4 细胞IL-8分泌量的测定
        2.2.5 乳杆菌下调H.pylori毒力因子表达的测定
        2.2.6 抗生素对乳杆菌最低抑制浓度的测定
        2.2.7 乳杆菌安全性预测
    2.3 动物实验方法
        2.3.1 灌胃菌株的制备
        2.3.2 动物实验设计
        2.3.3 乳杆菌在胃部定殖量的测定
        2.3.4 乳杆菌在胃部丰度变化的测定
    2.4 临床实验方法
        2.4.1 临床病例选择标准
        2.4.2 实验分组与设计
        2.4.3 实验产品及其活菌数的测定
        2.4.4 临床指标的测定
    2.5 数据统计与分析
3 结果与讨论
    3.1 拮抗H.pylori乳杆菌的体外初筛
        3.1.1 乳杆菌对H.pylori生长的抑制作用
        3.1.2 乳杆菌对H.pylori粘附AGS细胞的抑制作用
        3.1.3 复筛动物实验菌株的选择
    3.2 基于乳杆菌在小鼠胃部定殖能力对乳杆菌的复筛
        3.2.1 不同乳杆菌在小鼠胃部的定殖时间及定殖量变化情况
        3.2.2 小鼠胃部菌群中乳杆菌比例的变化及其对菌群组成的影响
    3.3 乳杆菌抗H.pylori感染的临床效果评价
        3.3.1 临床受试者基线信息
        3.3.2 实验产品活菌数变化情况
        3.3.3 乳杆菌干预对受试者体内H.pylori定殖量的影响
        3.3.4 乳杆菌干预对受试者GSRS评分的影响
        3.3.5 乳杆菌干预对受试者血清PG水平的影响
        3.3.6 乳杆菌干预对受试者血清炎症因子水平的影响
        3.3.7 乳杆菌干预对受试者肠道菌群的影响
        3.3.8 体外效果与临床效果的相关性分析
    3.4 乳杆菌安全性的初步评估
        3.4.1 乳杆菌的抗侵袭能力分析
        3.4.2 乳杆菌的潜在毒力基因分析
        3.4.3 乳杆菌的耐药基因分析
        3.4.4 乳杆菌的抗生素耐药性表型分析
主要结论与展望
致谢
参考文献
附录 Ⅰ:作者在攻读硕士学位期间发表的论文
附录 Ⅱ:实验相关图表


【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
[1]健康人群肠道中低丰度拟杆菌的筛选及生理作用研究[D]. 谭惠子.江南大学 2019

硕士论文
[1]植物乳杆菌CCFM8610缓解镉暴露诱导肠道损伤的效果评价及机制探究[D]. 吴江萍.江南大学 2019
[2]格氏乳杆菌与副格氏乳杆菌的筛选、基因组比较及安全性评价[D]. 周兴雅.江南大学 2019
[3]乳杆菌对幽门螺杆菌感染性胃炎中炎症因子的影响及机制[D]. 蒋杰.郑州大学 2018
[4]乳酸菌对空肠弯曲杆菌毒力基因表达的影响[D]. 张婷婷.江南大学 2016



本文编号：3163566