中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）在肠缺血—再灌注损伤中的作用研究

发布时间：2017-04-19 14:20

  本文关键词：中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）在肠缺血—再灌注损伤中的作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：【目的】探究中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是否参与了肠缺血-再灌注损伤过程并加剧了肠粘膜的损伤程度,探究可否通过降解中性粒细胞胞外诱捕网从而改善肠缺血-再灌注损伤程度。【方法】清洁级wistar大鼠54只,雌雄各半,采用随机数字表法随机分为对照组(A组,n=6)、缺血-再灌注组(B组,n=24)、缺血-再灌注+DNase-1注射组(C组,n=24),B组与C组又各分为再灌注2小时组、6小时组,12小时组和24小时4个亚组,每亚组各6只。A组开腹后即关腹,2小时后留取血液、小肠组织标本;B组开腹后夹闭肠系膜上动脉,1小时后松夹恢复灌注,采用抽杀法分别留取大鼠再灌注后2h、6h、12h、24h血液、小肠组织标本;C组于松夹前15min静脉注射DNase-1(10mg/KG体重),采用抽杀法留取大鼠再灌注后2h、6h、12h、24h血液及小肠组织标本。采用ELISA法分别测定大鼠血浆及肠组织匀浆中瓜氨酸化组蛋白H3(cit H3)、超氧化酶歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平和大鼠血浆中内毒素浓度;各组大鼠按照Chiu`s评分标准行小肠粘膜损伤程度病理评分。【结果】1.与A组相比,B组血浆和小肠组织中cit H3水平显著上升,除B-24h组外其余3个亚组结果均具有显著性差异(P0.01);B组各亚组血浆和小肠组织中TNF-α水平大幅上升,差异均有统计学意义(P0.01);B组各亚组血浆内毒素升高,差异均具有统计学意义(P0.01),且4个亚组水平均保持高位,差别不明显;B组各亚组血浆及小肠组织中SOD水平均显著降低,差异均具有统计学意义(P0.01),其中B-12h组血浆和肠组织中SOD水平均为各亚组最低;B组各亚组血浆及小肠组织中MDA水平大幅上升,结果均具有显著性差异,其中B-12h组血浆和小肠组织中MDA水平均为各亚组最高;B组各亚组肠粘膜损伤程度评分均显著上升,差异均具有统计学意义(P0.01),其中B-12h组评分为各亚组最高。2.与B组各亚组相比,C组各亚组血浆和小肠组织中cit H3水平降低,但C-6h组血浆cit H3水平与B-6h组相比、C-12h组小肠组织中cit H3水平与B-12h组相比、C-24h组血浆和小肠组织中cit H3水平与B-24h组相比差异均无统计学意义(P0.05);C组各亚组血浆和小肠组织中TNF-α水平明显降低,除C-24h组血浆TNF-α与B-24h组相比无统计学差异外(P0.05),其他各亚组无论血浆和小肠组织,其结果均具有显著的统计学差异(P0.01);C组各亚组血浆内毒素水平降低,除C-6h组外其余3个亚组与B组相对应亚组相比结果均具有显著性差异(P0.05),且整体水平为随再灌注时间增加而缓慢下降;C组各亚组血浆和小肠组织中SOD水平均较高,但除C-12h组血浆SOD水平与B-12h组相比无统计学差异外(P0.05),其余各亚组无论血浆和肠组织,与B组各亚组相比结果均具有显著性差异(P0.05);除C-6h组血浆MDA与B-6h组相比无差异(P0.05)外,C组其余亚组血浆和肠组织中MDA水平均明显下降,结果具有显著性差异(P0.01),其中C-6h组血浆和肠组织中MDA水平均为C组最高;C组各亚组小肠粘膜损伤评分均有所降低,但C-2h组和C-6h组与对应的B组亚组相比差异无统计学意义(P0.05),评分水平最高的为C-2h组。【结论】1.肠缺血-再灌注损伤时大鼠血浆和肠组织中cit H3明显上升。2.大鼠肠缺血-再灌注后12h过氧化损伤程度和肠粘膜损伤程度最严重。3.降解NETs后可以降低肠缺血-再灌注后过氧化损伤程度及肠粘膜损伤程度并加速其恢复。
【关键词】：中性粒细胞 中性粒细胞胞外诱捕网 瓜氨酸化组蛋白 肠缺血-再灌注损伤
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R574
【目录】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-9
• 第一章 前言9-11
• 第二章 实验材料与方法11-17
• 2.1 实验材料11-12
• 2.1.1 实验动物11
• 2.1.2 实验平台11
• 2.1.3 主要试剂11
• 2.1.4 实验仪器与耗材11-12
• 2.2 实验方法12-16
• 2.2.1 大鼠肠缺血-再灌注损伤的模型构建12
• 2.2.2 动物分组12-13
• 2.2.3 标本采集和处理13
• 2.2.4 血浆及肠匀浆液中cit H3水平测定13-14
• 2.2.5 血浆内毒素浓度测定14
• 2.2.6 血浆及肠匀浆液中TNF-α 水平测定14
• 2.2.7 血浆及肠匀浆液中SOD活力测定14-15
• 2.2.8 血浆及肠匀浆液中MDA水平测定15
• 2.2.9 肠匀浆液蛋白浓度测定15-16
• 2.2.10 小肠病理标本制作及评分16
• 2.3 数据统计16-17
• 第三章 实验结果17-31
• 3.1 各实验组大鼠血浆及小肠组织中cit H3水平17-19
• 3.2 各实验组大鼠血浆及小肠组织中TNF-α 水平19-21
• 3.3 各实验组大鼠血浆中内毒素水平21-22
• 3.4 各实验组大鼠血浆及小肠组织中SOD活力水平22-24
• 3.5 各实验组大鼠血浆及小肠组织中MDA水平24-26
• 3.6 各实验组大鼠小肠粘膜损伤程度26-30
• 3.7 肠IR损伤中机体过氧化损伤程度与再灌注时间的关系30-31
• 第四章 讨论31-38
• 第五章 结论38-39
• 参考文献39-42
• 缩略词表42-43
• 在学期间研究成果43-44
• 致谢44

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