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同种异体移植骨髓间充质干细胞治疗大鼠重症急性胰腺炎并发心

发布时间:2021-05-06 01:09
  目的:探讨同种异体移植骨髓间充质干细胞治疗大鼠重症急性胰腺炎并发心肌、肺损伤的价值及其机制,为临床应用骨髓间充质干细胞治疗重症急性胰腺炎心肌、肺损伤提供实验理论依据。方法:通过全骨髓贴壁法培养骨髓间充质干细胞(BMSCs)至第三代备用;经流式细胞术鉴定BMSCs。将90只健康雌性SD大鼠,体重200±20g,根据随机数字表法分为假手术组(S组)、模型组(SAP组)和治疗组(B组)。SAP组、B组采用胰腺被膜下多点注射4%牛磺胆酸钠(0.5ml/kg)复制SAP模型。造模后24h经大鼠尾静脉注射1mlBMSCs悬液(1.0×106个/mL)于S组和B组,而SAP组只注射1mlPBS。于移植后第1、7、14d通过腹主动脉放血法将大鼠分批处死,采集血清检测血淀粉酶(AMY)、肌酸激酶同工酶(CK-MB);用ELISA法检测血清TNF-a、IL-10;并将胰腺、心肌及肺组织置于4%中性甲醛溶液中固定,常规切片、HE染色;采用免疫组织化学方法检测心肺组织中TNF-a、IL-10的表达。结果:1、通过全骨髓贴壁法可提取骨髓间充质干细胞,10h后可见少许细胞贴壁,培养至第10天即可生长约90%融合,... 

【文章来源】:南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】:64 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
中英文缩略词对照表
第1章 引言
第2章 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 实验动物分组
        2.1.2 药品及试剂
        2.1.3 主要仪器及器材
    2.2 方法
        2.2.1 动物分组
        2.2.2 大鼠 BMSCs 的提取、分离、扩增、培养与鉴定
        2.2.3 重症急性胰腺炎模型的建立和骨髓间充质干细胞的移植
        2.2.4 标本的获取及处理
        2.2.5 血清淀粉酶和 CK-MB 检测
        2.2.6 血清 TNF-α的测定
        2.2.7 血清 IL-10 的测定
        2.2.8 BMSCs 的在体鉴定
        2.2.9 胰腺组织、肺脏组织、心脏组织病理学变化
        2.2.10 免疫组织化学染色
        2.2.11 统计方法
第3章 结果
    3.1 大鼠 BMSCs 的提取、分离、扩增、培养
    3.2 大鼠 BMSCs 的鉴定:流式细胞仪检测结果
    3.3 血清 AMY 及 CK-MB 的变化
    3.4 血清 TNF-α、IL-10 的变化
        3.4.1 血清 TNF-α的变化
        3.4.2 血清 IL-10 的变化
    3.5 BMSCs 在胰腺、肺脏、心脏组织中的定植
    3.6 胰腺、肺脏、心脏病理学观察
        3.6.1 胰腺组织病理学评价
        3.6.2 肺脏组织病理学评价
        3.6.3 心脏组织病理评分
    3.7 肺脏、心脏免疫组织化学染色评分
        3.7.1 肺脏 TNF-α、IL-10 免疫组织化学染色评分
        3.7.2 心脏 TNF-α、IL-10 免疫组织化学染色评分
第4章 讨论
    4.1 关于重症急性胰腺炎模型的制备
    4.2 重症急性胰腺炎并发肺脏损伤
    4.3 重症急性胰腺炎并发心脏损伤
    4.4 BMSCs 对大鼠 SAP 并发心肺损伤的保护作用
第5章 结论
致谢
参考文献
附图
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献



本文编号:3170941

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