自噬在肝纤维化中的作用及褪黑素干预研究

发布时间：2021-05-06 18:10

　　背景肝纤维化（hepatic fibrosis,HF）是一种以多种病因导致的慢性肝脏损害为基础、涉及多个信号转导通路而发生自我修复所产生的病理改变,其最终结局可发展为肝硬化甚至肝癌。大量研究表明,在HF发生的病理过程中,甚至是早期肝硬化阶段,经采取有效的防治措施后,其病理进程是有可能逆转的。研究证实,活化的肝星状细胞（hepatic stellate cell,HSCs）在HF发展的病理进程中起到举足轻重的作用。自噬（autophagy）,是真核细胞中广泛存在的一种代谢过程,正常细胞中,胞内衰老的细胞器及其他结构被自噬体吞噬并转运至线粒体进行β氧化,提供能量。在HSCs中,储存于内的脂滴被自噬体吞噬并转运至线粒体进行β氧化,为HSCs的活化提供能量。有研究结果显示,降低HSCs内自噬的水平,可降低肝纤维化程度。褪黑素（melatonin,MEL）,拥有抗氧化作用,课题组前期研究结果表明,MEL可通过抑制氧化应激及TGF-β/Smad信号通路从而发挥抗肝纤维化作用,而MEL对肝纤维化模型及HSCs中自噬作用的影响仍未完全清楚,本文旨在四氯化碳（carbon tetrachloride,C... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

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1.前言
2.材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 药物及试剂
        2.1.3 部分实验试剂制备方法
        2.1.4 部分实验设备和仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 CCl4诱导实验性肝纤维化大鼠模型的建立
        2.2.2 大鼠肝脏组织病理检查
        2.2.3 免疫组化法测定肝组织中肝星状细胞激活水平及自噬表达水平
        2.2.4 western blotting测定肝组织中肝星状细胞激活水平及自噬表达水平
        2.2.5q RT-PCR测定肝组织中自噬表达水平
        2.2.6 细胞培养
        2.2.7 MTT实验
        2.2.8 western blotting测定肝星状细胞激活水平及自噬表达水平
        2.2.9 qRT-PCR测定肝星状细胞中自噬表达水平
        2.2.10 统计学分析
3.结果
    3.1 褪黑素对肝纤维化大鼠模型中肝星状细胞的激活及自噬作用的影响
        3.1.1 大鼠肝脏病理实验结果
        3.1.2 免疫组化法测定肝组织中肝星状细胞激活水平及自噬表达水平
        3.1.3 western blotting法测定肝组织中肝星状细胞激活水平及自噬表达水平
        3.1.4 qRT-PCR测定肝纤维化组织中自噬表达水平
    3.2 褪黑素对肝星状细胞HSC-T6的激活及自噬作用的影响
        3.2.1 MTT法测定褪黑素对PDGF-BB激活的HSC-T6细胞增殖的影响
        3.2.2 western blotting测定HSCs激活水平、COLⅠ表达水平及自噬表达
        3.2.3 qRT-PCR测定褪黑素对肝星状细胞HSC-T6自噬表达水平的影响
4.讨论
    4.1 CCl4诱导的肝纤维化模型的建立
    4.2 HSCs与肝纤维化的关系
    4.3 自噬与肝纤维化的关系
    4.4 褪黑素对HF作用及其对自噬的影响
5.结论
参考文献
附录
致谢
综述
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]褪黑素抑制肝星状细胞增殖的机制研究[J]. 谢园园,洪汝涛,汪玉荣.  安徽医科大学学报. 2017(09)
[2]褪黑素对大鼠肝纤维化的保护作用及其对TGF-β1表达的影响[J]. 汪玉荣,洪汝涛,谢园园.  安徽医科大学学报. 2016(09)
[3]肝纤维化发生机制研究新进展[J]. 陈宵瑜,杨长青.  实用肝脏病杂志. 2016(01)
[4]腹腔注射低浓度四氯化碳建立小鼠肝纤维化模型[J]. 李少华,邱玲,程歆琦,李霁,杜顺达,毛一雷.  基础医学与临床. 2014(12)
[5]肝星型细胞分离方法和功能研究进展[J]. 李严严,姜颖.  生物工程学报. 2014(07)
[6]诱导活化肝星状细胞凋亡主要信号通路的研究进展[J]. 潘圆未,平键,徐列明.  临床肝胆病杂志. 2014(02)
[7]三种不同给药途径建立小鼠肝硬化模型的比较[J]. 田源,邓媛媛.  山地农业生物学报. 2012(05)
[8]大鼠肝纤维化模型建立及肝纤维化的检测[J]. 黄迪,古维立,胡志文,张帅,王成兴.  广州医药. 2012(05)
[9]褪黑素对大鼠肝纤维化的影响及部分机制研究[J]. 洪汝涛,许建明,沈继龙,梅俏,胡元生,罗庆礼.  中国药理学通报. 2012(08)
[10]Hepatitis B:Epidemiology and prevention in developing countries[J]. Elisabetta Franco,Barbara Bagnato,Maria Giulia Marino,Cristina Meleleo,Laura Serino,Laura Zaratti.  World Journal of Hepatology. 2012(03)



本文编号：3172390