甘草次酸，齐墩果酸选择性调节法呢醇X受体研究

发布时间：2021-05-10 05:19

　　核激素受体（Nuclear20hormone20receptors,20NHRs）是一类配体依赖性的转录因子,参与体内众多的生理过程。他们能与小分子配体结合而调节其靶基因表达。法尼酯衍生物X受体（Farnesoid20X20Receptor,20FXR）是核激素受体超家族成员之一。FXR具有典型的NHR家族结构。目前的研究发现FXR在调控胆汁酸、脂蛋白和葡萄糖代谢、肝再生、肠道细菌生长以及肝毒素应答反应等过程中扮演重要作用。FXR被视为体内胆汁酸感应器,通过调节胆汁酸合成限速酶cholesterol20720alpha-hydroxylase20（CYP7A1）活性而调控体内胆汁酸的稳态。在肝脏中,胆固醇被代谢形成胆汁酸。最近的研究发现胆汁酸不仅可以作为生理溶剂以有利于脂溶性维生素和脂肪的吸收、转运和分布,还可以作为信号分子以激活核受体并调节胆汁酸和胆固醇代谢。胆汁酸也具有细胞毒性,当胆汁酸在体内超过正常水平时,从而引起肝损伤,引起胆汁淤积,甚至肝癌。三萜类化合物广泛存在于植物界、中草药以及人们的饮食中。到目前,人们已发现超过4000种不同三萜类化合物。甘草次酸（Glycyrrheti... 

【文章来源】：中国科学技术大学安徽省 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
    1.1 核激素受体
        1.1.1 核激素受体分类
        1.1.2 核激素受体结构
            1.1.2.1 调节结构域（modulator）
            1.1.2.2 DNA结合结构域（DNA-binding domain, DBD）
            1.1.2.3 铰链区（hinge region）
            1.1.2.4 配体结合结构域（ligand-binding domain, LBD）
        1.1.3 核激素受体发生作用的机制
        1.1.4 法呢醇X受体（Farnesoid X Receptor, FXR）
            1.1.4.1 FXR基因分类
            1.1.4.2 FXR结构
            1.1.4.3 共调节因子（coregulator）
            1.1.4.4 FXR与胆汁酸代谢
            1.1.4.5 FXR与肝保护
            1.1.4.6 FXR与肝再生
            1.1.4.7 FXR与炎症反应
    1.2 三萜类化合物甘草次酸和齐墩果酸
        1.2.1 甘草次酸（6a）和甘草甜素（6b）
        1.2.2 齐墩果酸
第二章 前言
第三章 材料与方法
    3.1 材料
        3.1.1 质粒和细胞系
            3.1.1.1 质粒
            3.1.1.2 细胞系
        3.1.2 试剂
        3.1.3 仪器及耗材
        3.1.4 溶液
    3.2 方法
        3.2.1 质粒构建与表达
            3.2.1.1 质粒构建
            3.2.1.2 感受态制作
            3.2.1.3 转化
        3.2.2 细胞培养
            3.2.2.1 细胞复苏
            3.2.2.2 细胞传代
            3.2.2.3 细胞冻存
            3.2.2.4 细胞计数
            3.2.2.5 细胞活力检测
        3.2.3 瞬时转染
        3.2.4 实时定量PCR
            3.2.4.1 细胞总RNA提取
            3.2.4.2 逆转录PCR
        3.2.5 蛋白表达和纯化
            3.2.5.1 蛋白表达
            3.2.5.2 蛋白纯化
        3.2.6 BIAcore3000 分子间相互作用分析
        3.2.7 统计分析
第四章 结果与分析
    4.1 甘草次酸选择性调节FXR
        4.1.1 GL30 下调CDCA引起的FXR-LBD活性
        4.1.2 LC/MS分析甘草甜素（GL）成分
        4.1.3 β-GA对FXR-LBD活性的影响
        4.1.4 β-GA对其他核激素受体活性的影响
        4.1.5 FXR表达与纯化
        4.1.6 β-GA与FXR-LBD蛋白相互结合并且能部分地阻止FXR-LBD蛋白与共激活因子SRC-3 的相互作用
        4.1.7 β-GA对SHP启动子的影响
        4.1.8 β-GA对FXR靶基因的影响
        4.1.9 讨论
    4.2 OA是FXR选择性的调节子
        4.2.1 OA抑制FXR-LBD活性
        4.2.2 OA与FXR-LBD蛋白相互结合并且能部分地阻止FXR-LBD蛋白与共激活因子SRC-3 的相互作用
        4.2.3 OA对FXR靶基因的影响
        4.2.4 讨论
第五章 结论
参考文献
附录
致谢
攻读硕士学位期间取得的与学位论文相关的成果



本文编号：3178758