调控RhoA/ROCK1信号通路对HGF诱导的骨髓干细胞肝向分化的影响
发布时间：2021-05-19 14:28
目的:明确RhoA/ROCK1信号通路对骨髓干细胞（Bone marrow stem cells BMSCs）向肝细胞诱导分化的影响,为BMSCs肝向分化的调控机制提供一个新的切入靶点,也为临床更好的应用BMSCs移植治疗肝硬化提供理论依据。方法:1.构建pcDNA3.1（+）-RhoA,pLVX-shRNA1-RhoA载体,通过Lipofectamine?2000转染入BMSCs。体外培养BMSCs,进行分组:BMSCs细胞组（正常对照组）、pcDNA3.1（+）-HK组（过表达RhoA空载体组）、pcDNA3.1（+）-RhoA组（过表达RhoA组）、pLVX-shRNA1-HK组（沉默RhoA空载体组）、pLVX-shRNA1-RhoA组（沉默RhoA组）。2.细胞转染后,每组加入20ng/ml浓度的肝细胞生长因子（Hepatocyte growth factor HGF）体外诱导培养,运用MTT法检测细胞的增殖情况,绘制细胞生长曲线。用免疫荧光法检测各组BMSCs中肝细胞特异蛋白甲胎蛋白（AFP）的表达情况。Western blot技术检测各组BMSCs的相关蛋白RhoA、RO...
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
资金资助
摘要
Abstract
主要英文缩略语索引
第1章 前言
第2章 材料和方法
2.1 实验材料
2.1.1 细胞
2.1.2 实验试剂
2.1.3 主要仪器
2.2 试剂配制
2.3 实验方法
2.3.1 细胞培养
2.3.2 细胞分组
2.3.3 细胞转染
2.3.4 MTT检测细胞增殖
2.3.5 Western Blot检测
2.3.6 免疫荧光染色
2.4 实验结果统计学分析
第3章 实验结果
3.1 转染后不同时间段BMSCs的光镜下形态学改变
3.2 MTT检测调控RhoA对 BMSCs增殖的影响
3.3 调控RhoA基因对BMSCs内 RhoA/ROCK1 通路相关蛋白RhoA、ROCK1和p-MLC蛋白表达情况影响
3.4 AFP的免疫荧光表
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
文献综述
参考文献
硕士期间撰写论文及获奖情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]骨髓间充质干细胞诱导分化为肝细胞的方法及机制研究与进展[J]. 谢树才,张剑权,蒋锡丽,周帅. 中国组织工程研究. 2016(50)
[2]Y-27632对小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响[J]. 张磊,龚跃昆,赵学凌,周厚俊. 中国骨质疏松杂志. 2016(09)
[3]INPP4B基因在胃癌组织中的表达及意义[J]. 胡勤龙,王红兵,杨明. 世界华人消化杂志. 2016(16)
[4]Rho A/Rho kinase in spinal cord injury[J]. Xiangbing Wu,Xiao-ming Xu. Neural Regeneration Research. 2016(01)
[5]间充质干细胞分化为肝样细胞的研究进展[J]. 黄一凤,王甦. 胃肠病学和肝病学杂志. 2014(12)
[6]PI3K/Akt信号通路在骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化调控中的作用[J]. 王雪鹏,李茂强,边振宇,季成,何齐芳,姚旺祥,朱六龙. 中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志. 2014(03)
[7]HGF/SF-MET通路的基本原理[J]. 苏会玲,汤桂梅,范洪君,苏红慧,陈坤. 河北医药. 2013(21)
[8]体外诱导人骨髓间充质干细胞向肝系细胞分化过程中的基因表达谱变化[J]. 李蔚,张慧霞,樊红琨,段芳龄,马军. 胃肠病学和肝病学杂志. 2013(09)
[9]肝细胞生长因子的浓度和诱导时间对人骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的影响[J]. 潘兴南,魏开鹏. 肝脏. 2013(06)
[10]生长因子体外诱导骨髓间充质干细胞向肝样细胞的分化[J]. 陈鹏飞,魏文斌,谭远忠,胡晟. 中国组织工程研究. 2012(49)
博士论文
[1]酒精对人胚胎干细胞向肝细胞分化的影响[D]. 高伟.湖南大学 2015
[2]Rho GTP酶抑制剂辛伐他汀和Y27632调控小鼠胚胎干细胞心肌分化和自我更新机制研究[D]. 沈国芳.浙江大学 2014
[3]MAPK在骨髓间充质干细胞信号转导机制中的作用[D]. 聂黎黎.吉林大学 2013
硕士论文
[1]肝纤维化大鼠肝组织及血液微环境对人脐带间充质干细胞向肝细胞分化的影响[D]. 闫成.中国人民解放军医学院 2016
[2]红景天苷通过ERK1/2和PI3K/AKT/mTOR信号通路介导小鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞定向分化的研究[D]. 陈亚男.兰州大学 2014
[3]INPP4B和PTEN蛋白在肝细胞癌中的表达及其意义[D]. 张洋洋.郑州大学 2014
[4]RhoA相关GTP酶激活蛋白调控皮层神经元树突发育的研究[D]. 朱欣茹.复旦大学 2012
[5]Notch1信号在法舒地尔诱导MSCs向神经元样细胞分化过程中的作用[D]. 赵二义.郑州大学 2010
[6]脂筏在HGF/cMet活化细胞内信号转导通路中作用的研究[D]. 王蕾.大连医科大学 2007
本文编号：3195926
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
资金资助
摘要
Abstract
主要英文缩略语索引
第1章 前言
第2章 材料和方法
2.1 实验材料
2.1.1 细胞
2.1.2 实验试剂
2.1.3 主要仪器
2.2 试剂配制
2.3 实验方法
2.3.1 细胞培养
2.3.2 细胞分组
2.3.3 细胞转染
2.3.4 MTT检测细胞增殖
2.3.5 Western Blot检测
2.3.6 免疫荧光染色
2.4 实验结果统计学分析
第3章 实验结果
3.1 转染后不同时间段BMSCs的光镜下形态学改变
3.2 MTT检测调控RhoA对 BMSCs增殖的影响
3.3 调控RhoA基因对BMSCs内 RhoA/ROCK1 通路相关蛋白RhoA、ROCK1和p-MLC蛋白表达情况影响
3.4 AFP的免疫荧光表
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
文献综述
参考文献
硕士期间撰写论文及获奖情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]骨髓间充质干细胞诱导分化为肝细胞的方法及机制研究与进展[J]. 谢树才,张剑权,蒋锡丽,周帅. 中国组织工程研究. 2016(50)
[2]Y-27632对小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响[J]. 张磊,龚跃昆,赵学凌,周厚俊. 中国骨质疏松杂志. 2016(09)
[3]INPP4B基因在胃癌组织中的表达及意义[J]. 胡勤龙,王红兵,杨明. 世界华人消化杂志. 2016(16)
[4]Rho A/Rho kinase in spinal cord injury[J]. Xiangbing Wu,Xiao-ming Xu. Neural Regeneration Research. 2016(01)
[5]间充质干细胞分化为肝样细胞的研究进展[J]. 黄一凤,王甦. 胃肠病学和肝病学杂志. 2014(12)
[6]PI3K/Akt信号通路在骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化调控中的作用[J]. 王雪鹏,李茂强,边振宇,季成,何齐芳,姚旺祥,朱六龙. 中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志. 2014(03)
[7]HGF/SF-MET通路的基本原理[J]. 苏会玲,汤桂梅,范洪君,苏红慧,陈坤. 河北医药. 2013(21)
[8]体外诱导人骨髓间充质干细胞向肝系细胞分化过程中的基因表达谱变化[J]. 李蔚,张慧霞,樊红琨,段芳龄,马军. 胃肠病学和肝病学杂志. 2013(09)
[9]肝细胞生长因子的浓度和诱导时间对人骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的影响[J]. 潘兴南,魏开鹏. 肝脏. 2013(06)
[10]生长因子体外诱导骨髓间充质干细胞向肝样细胞的分化[J]. 陈鹏飞,魏文斌,谭远忠,胡晟. 中国组织工程研究. 2012(49)
博士论文
[1]酒精对人胚胎干细胞向肝细胞分化的影响[D]. 高伟.湖南大学 2015
[2]Rho GTP酶抑制剂辛伐他汀和Y27632调控小鼠胚胎干细胞心肌分化和自我更新机制研究[D]. 沈国芳.浙江大学 2014
[3]MAPK在骨髓间充质干细胞信号转导机制中的作用[D]. 聂黎黎.吉林大学 2013
硕士论文
[1]肝纤维化大鼠肝组织及血液微环境对人脐带间充质干细胞向肝细胞分化的影响[D]. 闫成.中国人民解放军医学院 2016
[2]红景天苷通过ERK1/2和PI3K/AKT/mTOR信号通路介导小鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞定向分化的研究[D]. 陈亚男.兰州大学 2014
[3]INPP4B和PTEN蛋白在肝细胞癌中的表达及其意义[D]. 张洋洋.郑州大学 2014
[4]RhoA相关GTP酶激活蛋白调控皮层神经元树突发育的研究[D]. 朱欣茹.复旦大学 2012
[5]Notch1信号在法舒地尔诱导MSCs向神经元样细胞分化过程中的作用[D]. 赵二义.郑州大学 2010
[6]脂筏在HGF/cMet活化细胞内信号转导通路中作用的研究[D]. 王蕾.大连医科大学 2007
本文编号：3195926
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/xiaohjib/3195926.html
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