SIGIRR和IL-1F5对肠上皮细胞TLR/IL-1信号传导通路的作用机制

发布时间：2021-05-21 02:51

　　研究背景和目的:SIGIRR是新近发现的TLR/IL-1R超家族成员之一,能够负性调控TLR/IL-1信号传导通路,并主要在调控胃肠道系统的炎症反应中起重要作用。IL-1F5是一新的IL-1家族成员,有研究发现通过其与SIGIRR相互作用可抑制LPS诱导的炎症反应。两者都是TLR/IL-1信号传导通路的负性调节因子,有望成为IBD治疗的新靶点。为此,通过本文研究了TLR/IL-1信号传导通路及其抑制因子SIGIRR和IL-1F5在LPS作用的肠上皮细胞中的变化,以及外源性SIGIRR和IL-1F5对上述细胞内TLR/IL-1信号传导通路的影响,并阐明其负性调节机制,为其用于IBD的治疗的体内研究提供实验依据。方法:1.实验分组具体如下:①对照组1:T84细胞;②对照组2:转染了空白对照质粒的T84细胞;③对照组3:转染了SIGIRR基因的T84细胞;④实验组1:T84细胞+1μg/ml LPS;⑤实验组2:转染了空白对照质粒的T84细胞+1μg/ml LPS;⑥实验组3:转染了SIGIRR基因的T84细胞+1μg/ml LPS;以上各组均包含5ng/ml IL-1F5预处理和未处理两部... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第1章 引言
第2章 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 细胞株
        2.1.2 细胞培养试验相关试剂
        2.1.3 仪器设备
        2.1.4 主要溶液
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞培养
        2.2.2 含质粒大肠杆菌的扩增和质粒提取
        2.2.3 IL-1F5 预处理
        2.2.4 脂质体法转染pUNO-hSIGIRR 质粒和pUNO 质粒
        2.2.5 LPS 处理
        2.2.6 RT-PCR 技术检测各组T84 细胞中SIGIRR、TLR2、TLR4和MyD88 mRNA 含量
        2.2.7 MTT 法检测IL-1F5 和LPS 作用细胞前后细胞增殖情况
    2.3 统计分析
第3章 结果
    3.1 提取质粒的PCR 鉴定结果
    3.2 SIGIRR 转染结果
    3.3 LPS 对各组T84 细胞内SIGIRR mRNA 表达的影响
    3.4 IL-1F5 对各组T84 细胞内SIGIRR mRNA 表达的影响
    3.5 LPS 对各组T84 细胞内TLR2 mRNA 表达的影响
    3.6 IL-1F5 对各组T84 细胞内TLR2 mRNA 表达的影响
    3.7 LPS 对各组T84 细胞内TLR4 mRNA 表达的影响
    3.8 IL-1F5 对各组T84 细胞内TLR4 mRNA 表达的影响
    3.9 LPS 对各组T84 细胞内MyD88 mRNA 表达的影响
    3.10 IL-1F5 对各组T84 细胞内MyD88 mRNA 表达的影响
    3.11 IL-1F5 和LPS 对 T84 细胞活力的影响
第4章 讨论
第5章 结论
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
附带综述


【参考文献】：
期刊论文
[1]Role of the intestinal barrier in inflammatory bowel disease[J]. Mike G Laukoetter,Porfirio Nava,Asma Nusrat.  World Journal of Gastroenterology. 2008(03)
[2]对我国炎症性肠病诊断治疗规范的共识意见[J]. 欧阳钦,胡品津,钱家鸣,郑家驹,胡仁伟.  胃肠病学. 2007(08)



本文编号：3198903