RNAi沉默COX-2对HSC细胞动力学及脂质代谢的影响

发布时间：2021-05-21 16:43

　　第一章COX-2基因shRNA干扰载体的构建及抗肝纤维化作用目的构建COX-2shRNA真核表达载体，并观察其抗肝纤维化作用。方法1.分别从TRC shRNA、origene shRNA数据库中选取1条大鼠COX2基因及2条人COX2基因序列，分别构建3个COX-2ShRNA真核表达载体，进行酶切鉴定和测序；2.脂质体介导重组质粒转染HSC-T6细胞株,荧光显微镜观察转染效率,RT-PCR检测COX-2mRNA表达, Western-Blot检测COX-2蛋白质表达；3.SD大鼠尾静脉注射腺病毒介导的重组质粒体内转染；12周末,处死大鼠；RT-PCR检测肝组织COX-2mRNA表达,免疫组织化学检测肝组织COX-2蛋白质表达, HE、MASSON染色分析纤维病变程度,图像分析仪测量肝组织纤维病变面积。结果1.酶切、测序、比对显示，COX2-shRNA-1,2,3序列成功插入目的载体，且序列完全正确；2.荧光显微镜观察显示COX-2shRNA1、COX-2shRNA2、COX-2shRNA3转染效率均在70%以上；3.RT-PCR和Western-Blot检测证实,转染后COX-2shR... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：168 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
主要英文缩略语索引
中文摘要
Abstract
绪言
    参考文献
第一章 COX-2 基因 shRNA 干扰载体的构建及抗肝纤维化作用
    前言
    材料与方法
    实验结果
    讨论
    结论
    参考文献
第二章 RNAi 沉默 COX-2 对 HSC 基因表达谱的影响
    前言
    材料与方法
    实验结果
    讨论
    结论
    参考文献
第三章 RNAi沉默COX-2对HSC细胞动力学及相关基因表达影响
    前言
    材料与方法
    实验结果
    讨论
    结论
    参考文献
第四章 RNAi沉默COX-2对HSC脂肪代谢及相关基因表达的影响
    前言
    材料和方法
    实验结果
    讨论
    结论
    参考文献
综述一
    参考文献
综述二
    参考文献
读博期间发表的主要论文及科研项目
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]pGC-silencer-U6/Neo/GFP/ABCG2真核表达质粒的构建及鉴定[J]. 俞艳萍,张松,孔维佳.  临床耳鼻咽喉头颈外科杂志. 2010(17)
[2]siRNA靶向Rac1真核表达载体的构建与效应检测[J]. 张美霞,吴静,辛梅,李娟娟,张军军,严密.  四川大学学报(医学版). 2009(06)
[3]基因产物功能分类系统[J]. 师红雯,黄原.  生命的化学. 2006(04)
[4]环氧合酶-2抑制剂尼美舒利对大鼠肝纤维化的影响[J]. 周筱艳,阳学风.  中华消化杂志. 2004(07)
[5]脂质对大鼠肝星状细胞低密度脂蛋白、高密度脂蛋白受体的影响[J]. 陆伦根,李继强,华静,茅益民,范竹萍,邱德凯.  中华肝脏病杂志. 2000(03)
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[7]Effects of Kupffer cells stimulated by triglyceride and very low-density lipoprotein on proliferation of rat hepatic stellate cells[J]. 陆伦根,曾民德,李继强,华静,范建高,范竹萍,邱德凯,萧树东.  Chinese Medical Journal. 1999(04)



本文编号：3200044