TSC1/TSC2调控人胚肺成纤维细胞HELF增殖及分化的研究

发布时间：2021-05-28 08:00

　　肺纤维化（pulmonary fibrosis, PF）是受多种因素调控的肺间质失常造成的,如肺部肿瘤的放疗与化疗等。肺纤维化的发生特别受大量细胞因子的影响。肺成纤维细胞在肺部结构与功能的形成与维持上有重要的作用。目前针对肺纤维化的治疗以糖皮质激素、细胞毒性药物为主要药物,但是效果不是很良好,副作用多。探讨肺纤维化的发病机制。研究治疗肺纤维化的可能的新靶点,是国内外药物研究的趋势。雷帕霉素靶蛋白（mTOR）是一种丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶,可以接受多种信号通路的信号刺激,激活转录并能促进细胞的生长与增殖。多篇文献报道,负调控mTOR可以负性调控纤维化。位于mTOR信号通路的上游的TSC1-TSC2肿瘤抑制因子,在基因表达正常的情况下可以负性调控哺乳动物雷帕霉素靶蛋白激酶,阻断该信号通路。TSC1的基因定位9q34.3, TSC2的基因定位于16P13.3[4,5],分别编码错构素及结节素。文献报道高水平的结节素可以负调控细胞增殖,并且低水平的结节素会加快细胞的增殖。错构素也可以负调控细胞增殖。最近研究发现,活化的雷帕霉素靶蛋白激酶信号通路可以促进肾成纤维细胞的激活,并且敲除TSC1基因的转... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

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1 前言
2 实验材料
    2.1 细胞系
    2.2 试剂
    2.3 仪器与设备
    2.4 溶液和试剂的配制
3 实验方法
    3.1 细胞培养
    3.2 pcDNA3-HA3-TSC1、pcDNA3-FLAG-TSC2、siRNA-MeCP2、pEGFP-C2-MeCP2转染HELF
    3.3 焦磷酸测序
    3.4 Western bloting法检测蛋白的表达
    3.5 流式细胞术检测各组HELF细胞周期
    3.6 数据处理
4 实验结果
    4.1 TGF-β1对HELF细胞的α-SMA与Collagen I蛋白的影响
    4.2 TGF-β1对HELF细胞TSC1,TSC2基因产物表达的影响
    4.3 过表达TSC1对HELF细胞α-SMA与Collagen I蛋白表达的
    4.4 过表达TSC2对HELF细胞α-SMA与Collagen I蛋白表达的影响
    4.5 TGF-β1对HELF细胞中TSC1、TSC2基因启动子区域的甲基化程度的影响
    4.6 5-azadC对TGF-β1诱导的HELF细胞TSC1与TSC2蛋白表达的影响
    4.7 MeCP2对HELF细胞增殖与分化的影响
5 讨论
结论
参考文献
致谢
附录
综述
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]TSC基因的生物学作用[J]. 徐智芳,王建祥.  医学分子生物学杂志. 2008(05)



本文编号：3207883