关于贲门失弛缓症发病及治疗过程中硫化氢作用的探讨
发布时间：2021-06-09 22:36
目的通过研究贲门失弛缓症患者的食管组织中硫化氢合成酶的表达情况、外源性硫化氢治疗贲门失弛缓症动物模型的相关机制初步探讨及治疗效果以及应用硫化氢供体（富露施）对贲门失弛缓症患者的治疗作用三个实验,探索贲门失弛缓症的发病过程中硫化氢可能扮演的角色以及硫化氢对于本病治疗作用的可行性。方法（1）随机选取贲门失弛缓症患者18例与鳞状细胞食管癌患者8例分别作为实验组与对照组进行实验。实验组患者于POEM术中通过内镜直视下获取食管组织标本,对照组则于食管切除术过程中获取标本;实验组取材部位从上至下依次为LES上4cm,2cm,LES及贲门四处,对照组则依照实验组取材大小取食管中段与LES部位。将实验组与对照组所获标本进行硫化氢合成酶胱硫醚-β-合酶（cystathionine-β-synthase,CBS）和胱硫醚-γ-裂解酶（cystathionine-γ-lyase,CSE）组化染色、Western Blot（WB）实验以及上述两种酶分别与神经特异性抗体sox-10的免疫荧光双染实验来观察CBS与CSE的表达情况;（2）取30只Balb/c小鼠随机分为造模组和对照组,记录初始体重。造模组给予水合...
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
贲门失弛缓症患者临床症状Eckardt评分标准食管高分辨率测压检查被检查者停用抑酸药、胃肠动力药等3-5天，禁食
图 2 不同浓度 10ml分离胶配置成分图⑦封闭：转膜后用事先配置好的 TBST 对 PVDF 膜进行清洗 3 次，每次 10分钟，清洗后放入抗体孵育盒，加入 5%脱脂牛奶做封闭液，室温下封闭 1 个小时；⑧一抗与二抗孵育：将弃去封闭液并且用 TBST 清洗后的 PVDF 膜加入到用牛奶稀释到适宜比例（按照一抗说明书）的一抗中，排尽气泡后封闭，4℃下摇床过夜 12 小时；弃去一抗，TBST 清洗 3 次后加入到标记好的二抗中室温环境下摇床孵育 1 小时；弃去二抗，TBST 清洗 PVDF 膜 3 次，每次 10 分钟；⑨显影定影：避光环境下取 ECL 试剂盒中 A、B 液各 0.5ml 配置 ECL 显色液，关闭显影夹后进行曝光显影定影的显色反应；将结果进行蛋白分子定量和光密度值分析，并通过软件分析条带灰度值来计算样本蛋白的相对表达量。1.1.5 硫化氢合成酶与 sox-10 在贲门失弛缓症患者中免疫荧光双染实验1.1.5.1 实验仪器食管高分辨率测压检查仪 Medical Measurement Systems恒温培养箱 上海跃进医疗器械
天津医科大学硕士学位论文为Ⅰ级 3 例，Ⅱ级 5 例，Ⅲ级 5 例，Ⅳ级 5 例；LES 上 2cm处表Ⅰ级 4 例，Ⅱ级 6 例，Ⅲ级 5 例，Ⅳ级 3 例；LES 上 4cm处表达级 10 例，Ⅱ级 5 例，Ⅲ级 3 例，Ⅳ级 0 例；与上述 LES 处表达得CBS 在贲门处、LES 上 2cm 处、LES 上 4cm处表达得分情况的差学意义（t 值分别为-4.61、-5.72、-8.04，P 值均<0.05）。CSE 在实贲门处表达结果分级为Ⅰ级 3 例，Ⅱ级 6 例，Ⅲ级 5 例，Ⅳ级 4 处表达结果分级为Ⅰ级 4 例，Ⅱ级 5 例，Ⅲ级 6 例，Ⅳ级 3 例；表达结果分级为Ⅰ级 11 例，Ⅱ级 5 例，Ⅲ级 2 例，Ⅳ级 0 例；与上得分情况相比，CSE 在贲门处、LES 上 2cm 处、LES 上 4cm处表差异均具有统计学意义（t 值分别为-5.17、-6.65、-9.22，P 值均<布情况见图 4。
【参考文献】：
期刊论文
[1]硫化氢在肺血管重塑中的调节机制及信号通路[J]. 李敏霞,陈亚红. 生理科学进展. 2018(01)
[2]Sox10和EDNRB在人胚胎肠神经系统发育中的表达[J]. 李颖,黄英,王大佳,王维林. 中国医科大学学报. 2014(03)
[3]Achalasia: A review of clinical diagnosis, epidemiology,treatment and outcomes[J]. Orla M O’Neill,Brian T Johnston,Helen G Coleman. World Journal of Gastroenterology. 2013(35)
[4]高分辨压力检测经口内镜下肌切开术治疗贲门失弛缓症的临床研究[J]. 郭海英,郑忠青,赵威,王邦茂,刘文天. 中华消化内镜杂志. 2013 (09)
[5]贲门失弛缓症的研究进展[J]. 王爽,刘冰熔. 世界华人消化杂志. 2013(01)
[6]贲门失弛缓症[J]. 周震宇,莫剑忠. 胃肠病学. 2011(12)
[7]Current clinical approach to achalasia[J]. Alexander J Eckardt,Volker F Eckardt. World Journal of Gastroenterology. 2009(32)
[8]食管的迷走神经分布特征及其在食管癌外科治疗中的意义[J]. 吴爱群,王立东,刘镇,党瑞山,常志伟,姬瑞娟,黄会龙,龚杰,刘保池,张传森. 中国临床解剖学杂志. 2007(02)
[9]硫化氢对低氧性肺动脉高压大鼠细胞因子的调节作用[J]. 孙华毅,王聪,王海英,涂家红,刘文莉,张春雨. 中华老年心脑血管病杂志. 2006(07)
[10]胃电起搏对糖尿病胃轻瘫大鼠胃电节律异常和胃排空延迟的治疗作用[J]. 刘劲松,乔娴,侯晓华,陈建德. 中华消化杂志. 2004(10)
本文编号：3221449
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
贲门失弛缓症患者临床症状Eckardt评分标准食管高分辨率测压检查被检查者停用抑酸药、胃肠动力药等3-5天，禁食
图 2 不同浓度 10ml分离胶配置成分图⑦封闭：转膜后用事先配置好的 TBST 对 PVDF 膜进行清洗 3 次，每次 10分钟，清洗后放入抗体孵育盒，加入 5%脱脂牛奶做封闭液，室温下封闭 1 个小时；⑧一抗与二抗孵育：将弃去封闭液并且用 TBST 清洗后的 PVDF 膜加入到用牛奶稀释到适宜比例（按照一抗说明书）的一抗中，排尽气泡后封闭，4℃下摇床过夜 12 小时；弃去一抗，TBST 清洗 3 次后加入到标记好的二抗中室温环境下摇床孵育 1 小时；弃去二抗，TBST 清洗 PVDF 膜 3 次，每次 10 分钟；⑨显影定影：避光环境下取 ECL 试剂盒中 A、B 液各 0.5ml 配置 ECL 显色液，关闭显影夹后进行曝光显影定影的显色反应；将结果进行蛋白分子定量和光密度值分析，并通过软件分析条带灰度值来计算样本蛋白的相对表达量。1.1.5 硫化氢合成酶与 sox-10 在贲门失弛缓症患者中免疫荧光双染实验1.1.5.1 实验仪器食管高分辨率测压检查仪 Medical Measurement Systems恒温培养箱 上海跃进医疗器械
天津医科大学硕士学位论文为Ⅰ级 3 例，Ⅱ级 5 例，Ⅲ级 5 例，Ⅳ级 5 例；LES 上 2cm处表Ⅰ级 4 例，Ⅱ级 6 例，Ⅲ级 5 例，Ⅳ级 3 例；LES 上 4cm处表达级 10 例，Ⅱ级 5 例，Ⅲ级 3 例，Ⅳ级 0 例；与上述 LES 处表达得CBS 在贲门处、LES 上 2cm 处、LES 上 4cm处表达得分情况的差学意义（t 值分别为-4.61、-5.72、-8.04，P 值均<0.05）。CSE 在实贲门处表达结果分级为Ⅰ级 3 例，Ⅱ级 6 例，Ⅲ级 5 例，Ⅳ级 4 处表达结果分级为Ⅰ级 4 例，Ⅱ级 5 例，Ⅲ级 6 例，Ⅳ级 3 例；表达结果分级为Ⅰ级 11 例，Ⅱ级 5 例，Ⅲ级 2 例，Ⅳ级 0 例；与上得分情况相比，CSE 在贲门处、LES 上 2cm 处、LES 上 4cm处表差异均具有统计学意义（t 值分别为-5.17、-6.65、-9.22，P 值均<布情况见图 4。
【参考文献】：
期刊论文
[1]硫化氢在肺血管重塑中的调节机制及信号通路[J]. 李敏霞,陈亚红. 生理科学进展. 2018(01)
[2]Sox10和EDNRB在人胚胎肠神经系统发育中的表达[J]. 李颖,黄英,王大佳,王维林. 中国医科大学学报. 2014(03)
[3]Achalasia: A review of clinical diagnosis, epidemiology,treatment and outcomes[J]. Orla M O’Neill,Brian T Johnston,Helen G Coleman. World Journal of Gastroenterology. 2013(35)
[4]高分辨压力检测经口内镜下肌切开术治疗贲门失弛缓症的临床研究[J]. 郭海英,郑忠青,赵威,王邦茂,刘文天. 中华消化内镜杂志. 2013 (09)
[5]贲门失弛缓症的研究进展[J]. 王爽,刘冰熔. 世界华人消化杂志. 2013(01)
[6]贲门失弛缓症[J]. 周震宇,莫剑忠. 胃肠病学. 2011(12)
[7]Current clinical approach to achalasia[J]. Alexander J Eckardt,Volker F Eckardt. World Journal of Gastroenterology. 2009(32)
[8]食管的迷走神经分布特征及其在食管癌外科治疗中的意义[J]. 吴爱群,王立东,刘镇,党瑞山,常志伟,姬瑞娟,黄会龙,龚杰,刘保池,张传森. 中国临床解剖学杂志. 2007(02)
[9]硫化氢对低氧性肺动脉高压大鼠细胞因子的调节作用[J]. 孙华毅,王聪,王海英,涂家红,刘文莉,张春雨. 中华老年心脑血管病杂志. 2006(07)
[10]胃电起搏对糖尿病胃轻瘫大鼠胃电节律异常和胃排空延迟的治疗作用[J]. 刘劲松,乔娴,侯晓华,陈建德. 中华消化杂志. 2004(10)
本文编号：3221449
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