乙型肝炎病毒抑制巨噬细胞TLR3、MDA-5和RIG-Ⅰ表达研究

发布时间：2021-07-06 13:30

　　目的：通过观察乙型肝炎病毒（HBV）与巨噬细胞上Toll样受体3（TLR3）、黑色素瘤分化相关基因5（MDA-5）、视黄酸诱导基因Ⅰ（RIG-Ⅰ）表达的相互作用,探讨HBV持续感染分子免疫机制。方法：以不同载量HBV刺激佛波酯（PMA）诱导的单核源巨噬细胞,实时定量PCR检测刺激2、4、12及24h后巨噬细胞Toll样受体3（TLR3）、黑色素瘤分化相关基因5（MDA-5）、视黄酸诱导基因Ⅰ（RIG-Ⅰ）表达；以poly I：C刺激与HBV共培养12h的巨噬细胞,酶联免疫吸附试验（ELISA）测定poly I：C刺激4h后培养上清液中β干扰素（IFN-β）的分泌水平。结果：不同病毒载量组巨噬细胞TLR3表达在2、4、12及24h较对照组下调,且病毒高载量组表达低于病毒低载量组（F值分别为123.64、24.49、6.69、7.63,均P<0.01）；MDA-5和RIG-Ⅰ在上述4个时间点的表达为病毒高载量组低于病毒低载量组（F值分别为36.44、48.57、46.59、12.77；67.68、74.54、18.31、26.16；均P<0.01）。IFN-β的表达为：阳性对照... 

【文章来源】：复旦大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图SPCR荧光探针法检测HBVDNA拷贝数

0叫!0晰!0印Qua爪勺!0印!0印图5PCR荧光探针法检测HBVDNA拷贝数6.ELIsA检测IFN一p标准曲线的建立依据检测试剂盒的操作步骤，建立IFN一p检测标准曲线，RZ一0.981，符验要求，(见图6)。

表达不同的是病毒低载量组MDA一5表达与对照组差异无统计学意义;各个时间点RIG一I的表达在各组差异也均有统计学意义，F值分别为67.68、74.54、18.31和26.16，P值均<0.01，其表达规律与MDA一5相似，(见图7)。9.ELISA检测IFN一p的表达4组不同载量HBv与巨噬细胞共培养12h后，分别加入 PolyLC(50雌/mL)刺激4h，同时设没有HBV预刺激仅 PolyLC刺激的巨噬细胞为阳性对照组，设PBs为阴性对照组。收集各组培养上清，ELISA检测IFN一p。

【参考文献】：
期刊论文
[1]乙型肝炎病毒表面抗原抑制TLR2和TLR4的激活[J]. 刘华,陈志翱,成玉明,袁正宏.  微生物与感染. 2008(02)
[2]慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞上Toll样受体的表达变化[J]. 陈明泉,施光峰,李谦,卢清,张琼华,秦刚,翁心华.  中华传染病杂志. 2007(12)



本文编号：3268332