人肝源性干细胞对小鼠急性肝损伤和酒精性脂肪肝保护作用的研究

发布时间：2021-07-14 05:29

　　目的探究人肝源性干细胞对酒精性脂肪肝保护作用及对刀豆蛋白A诱导急性肝损伤保护作用和机制。方法1.将88只C57BL/6小鼠随机分成空白对照组、模型组、实验组;模型组和实验组按人肝源性干细胞（HYX1）预处理后注射ConA时间不同又各自分成3小时、6小时、12小时、24小时、48小时组;空白对照组尾静脉注射PBS 200ul/只;模型组每只小鼠尾静脉注射ConA 12mg/kg+PBS 200ul,实验组每只小鼠尾静脉注射ConA 12mg/kg+腹腔移植人肝源性干细胞PBS混悬液200ul（20代）;各组于注射ConA 24小时后,取血检测ALT、AST、TBIL;每组肝脏标本HE染色观察病理学改变,并进行肝脏组织学评分。组间比较采用t检验,结果以`x±s表示,P<0.05为差异有统计学意义。2.根据注射刀豆蛋白A后处死小鼠时间点的不同随机将72只C57BL/6小鼠分成0小时、2小时、6小时、12小时、24小时五组,将只进行人肝源性干细胞干预的0小时组作为空白对照,余下每个时间点又分为模型组和干预组,每组8只。检测血清ALT、AST水平;酶联免疫吸附法（Elisa）检测血清TNF... 

【文章来源】：济南大学山东省

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

不同代数的成体人肝源性干细胞附注2.1：A:第10代人肝源性干细胞B:第25代人肝源性干细胞C:第50代人肝源性干细胞

图 2.2 各组肝脏损伤程度对比附注 2.2：C:空白对照组；M1：3 小时模型组；M2：6 小时模型组；M3：12 小时模型组；M4小时模型组；M5：48 小时模型组；E1：3 小时实验组；E2：6 小时实验组；E3：12 小时实验E4：24 小时实验组；E5：48 小时实验组2.3.4 小鼠肝脏组织病理学评分对各组小鼠进行肝脏组织病理评分[30]，每个时间点实验组得分均明显小于相应型组（P<0.05 或 P<0.01）。（表 2.4）表 2.4 Ishak 评分（ x ± s，分）时间点 模型组病理学评分 实验组病理评分3h 13.32±1.3 3.5±0.21**6h 12.67±0.81 2.01±0.4**12h 14.57±0.65 2.13±0.25**24h 13.21±1.06 4.7±0.5**48h 15.07±1.58 8.6±0.83*表注 2.4：**P<0.01，* P <0.05VS 相应模型组

3.3.1 肝脏功能血清学指标的检测从图中丙氨酸氨基转移酶（ALT）以及天冬氨酸氨基转移酶（AST)检测结果来看，仅移植人肝源性干细胞的空白对照组小鼠血清中 ALT、AST 水平与正常小鼠转氨酶相比无差异。空白对照组小鼠、2 小时急性肝损伤模型组小鼠、2 小时人肝源性干细胞干预组小鼠之间相互对比两种转氨酶水平均没有显著性差异（P>0.05）；12h、24h 刀豆蛋白A 诱导的模型组小鼠血清 ALT 和 AST 水平较空白对照组显著升高（P<0.01）；12 小时、24小时人肝源性干细胞干预组 ALT和AST水平较之相应刀豆蛋白A诱导的肝损伤组显著降低（P<0.05 或 P<0.01)。以上表明刀豆蛋白 A 建立小鼠肝损伤模型时，早期肝功能血清学指标并未出现显著改变，直到 6 小时后，刀豆蛋白 A 诱导的急性肝损伤组小鼠的肝脏转氨酶水平会明显增加。人肝源性干细胞预处理小鼠 12 小时后能明显改善小鼠肝损伤。（图 3.1）


本文编号：3283514