人胰液差异蛋白质组学研究
发布时间:2021-07-28 13:34
目的:优化用于人胰液蛋白质组研究的双向电泳方法,筛选胰液肿瘤标志物的侯选以及可能与发病机制相关的蛋白质。方法:比较多种因素对双向电泳图谱质量的影响。优化的双向电泳及图像分析方法选取差异表达蛋白质点,经质谱分析等鉴定。逆转录聚合酶链反应方法检测胰腺癌相关蛋白质在胰腺癌组织的基因表达。结果:1.获得了重复性好、分辨率高的胰液双向电泳图谱。2.鉴定了在胰腺癌或慢性胰腺炎患者胰液标本特异表达的7个蛋白质点。3.在胰腺癌患者胰液中鉴定的特异表达蛋白质可以在组织中获得基因表达水平的验证。结论:双向电泳结合质谱鉴定是胰液差异蛋白质组学研究的可靠平台。胰腺癌患者胰液中特异表达的蛋白质PSTI和TTR可能是胰液肿瘤标志物的侯选,本研究提示了慢性炎症与肿瘤发生机制可能联系的相关依据。
【文章来源】:中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校
【文章页数】:100 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
Bardofdr标准曲线及胰液样品蛋白质含量测定示例
65mMD竹,.05%PIG缓冲液)复溶是优化的标本制备方法,8。林g上样量可以在银染的分析凝胶(pH3一10,13cmPIG胶条)上见到约80一90个蛋白质点(图1.2b),重复性和分辨率都优于将胰液直接和泡胀液混合上样;而考染即使上样量达到100。“g也只能见到约30个点(图1.4)a;应用窄范围PIG胶条(pH4一7,13cm),140林g上样量可以在银染的分析凝胶上见到约1加个蛋白质点(图1.2c);将上样量提高到260林g并采用兼容Ms的银染方案所获得的图谱同样具有良好的重复性和分辨率(图1.3a)。3.不同病理状态的胰液标本都可应用本研究优化的2一DE方法获得稳定的图谱,它们均表现出一定程度的相似性(图1.3)。弓汾‘’,二+·‘…图1.1Bardofdr标准曲线及胰液样品蛋白质含量测定示例
慢性胰腺炎患者胰液标本微量制备胶的差异蛋白质点切取图像
【参考文献】:
期刊论文
[1]双向电泳-质谱技术筛选肝癌血清标记物[J]. 冯钜涛,刘银坤,MOHAMAD RADWAN ALMOFTI,代智,周海君,宋海燕,陆豪杰,汤钊猷. 生物化学与生物物理进展. 2005(07)
[2]胰液中肿瘤相关基因检测在胰腺癌诊断中的价值[J]. 李兆申,刘枫,周国雄,许国铭,屠振兴,孙振兴. 中华医学杂志. 2004(24)
[3]脑脊液双向电泳技术体系的建立[J]. 祁维平,刘师莲,秦延江,刘贤锡,王晓明,刘传华. 山东大学学报(医学版). 2004(01)
[4]小鼠肾脏组织的双向电泳[J]. 梁恒,邢建宇,刘希成,黄黎明. 西安交通大学学报. 2004(02)
[5]MALDI—TOF质谱仪关键技术及进展[J]. 赵晓光,薛燕,刘炳玉. 现代仪器. 2003(04)
[6]单纯十二指肠镜下收集胰液的方法与体会[J]. 陈兴玲,朱萱. 江西医药. 2002(05)
[7]胰液细胞抑癌蛋白表达检测在胰腺癌诊断中的价值[J]. 徐彤,陆星华,胡育新,钱家鸣,邹江,温小恒,穆静. 中国现代医学杂志. 2002(04)
[8]内镜下鼻胰管引流术临床应用初步研究[J]. 李兆申,周国雄,许国铭,孙振兴,龚燕芳,方裕强,刘枫,满晓华. 胃肠病学. 2001(04)
[9]蛋白质双向电泳图像分析[J]. 贾宇峰,林秋霞,郭尧君,郭鹞,刘少君. 生物化学与生物物理进展. 2001(02)
[10]胰腺癌患者胰液中K-ras基因突变的检测及其意义[J]. 龚晓明,陈元方,陈原稼,陆星华. 中华内科杂志. 1999(10)
本文编号:3308008
【文章来源】:中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校
【文章页数】:100 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
Bardofdr标准曲线及胰液样品蛋白质含量测定示例
65mMD竹,.05%PIG缓冲液)复溶是优化的标本制备方法,8。林g上样量可以在银染的分析凝胶(pH3一10,13cmPIG胶条)上见到约80一90个蛋白质点(图1.2b),重复性和分辨率都优于将胰液直接和泡胀液混合上样;而考染即使上样量达到100。“g也只能见到约30个点(图1.4)a;应用窄范围PIG胶条(pH4一7,13cm),140林g上样量可以在银染的分析凝胶上见到约1加个蛋白质点(图1.2c);将上样量提高到260林g并采用兼容Ms的银染方案所获得的图谱同样具有良好的重复性和分辨率(图1.3a)。3.不同病理状态的胰液标本都可应用本研究优化的2一DE方法获得稳定的图谱,它们均表现出一定程度的相似性(图1.3)。弓汾‘’,二+·‘…图1.1Bardofdr标准曲线及胰液样品蛋白质含量测定示例
慢性胰腺炎患者胰液标本微量制备胶的差异蛋白质点切取图像
【参考文献】:
期刊论文
[1]双向电泳-质谱技术筛选肝癌血清标记物[J]. 冯钜涛,刘银坤,MOHAMAD RADWAN ALMOFTI,代智,周海君,宋海燕,陆豪杰,汤钊猷. 生物化学与生物物理进展. 2005(07)
[2]胰液中肿瘤相关基因检测在胰腺癌诊断中的价值[J]. 李兆申,刘枫,周国雄,许国铭,屠振兴,孙振兴. 中华医学杂志. 2004(24)
[3]脑脊液双向电泳技术体系的建立[J]. 祁维平,刘师莲,秦延江,刘贤锡,王晓明,刘传华. 山东大学学报(医学版). 2004(01)
[4]小鼠肾脏组织的双向电泳[J]. 梁恒,邢建宇,刘希成,黄黎明. 西安交通大学学报. 2004(02)
[5]MALDI—TOF质谱仪关键技术及进展[J]. 赵晓光,薛燕,刘炳玉. 现代仪器. 2003(04)
[6]单纯十二指肠镜下收集胰液的方法与体会[J]. 陈兴玲,朱萱. 江西医药. 2002(05)
[7]胰液细胞抑癌蛋白表达检测在胰腺癌诊断中的价值[J]. 徐彤,陆星华,胡育新,钱家鸣,邹江,温小恒,穆静. 中国现代医学杂志. 2002(04)
[8]内镜下鼻胰管引流术临床应用初步研究[J]. 李兆申,周国雄,许国铭,孙振兴,龚燕芳,方裕强,刘枫,满晓华. 胃肠病学. 2001(04)
[9]蛋白质双向电泳图像分析[J]. 贾宇峰,林秋霞,郭尧君,郭鹞,刘少君. 生物化学与生物物理进展. 2001(02)
[10]胰腺癌患者胰液中K-ras基因突变的检测及其意义[J]. 龚晓明,陈元方,陈原稼,陆星华. 中华内科杂志. 1999(10)
本文编号:3308008
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/xiaohjib/3308008.html
最近更新
教材专著