通过原发性胆汁性胆管炎T细胞受体免疫组库的研究揭示E.coli在其致病机理的作用

发布时间：2021-07-31 04:25

　　研究背景与实验目的:原发性胆汁性胆管炎（Primary biliary cholangitis,PBC）是一种器官特异性自身免疫性肝病,其特征是存在抗线粒体抗体,炎症和小叶间胆管破坏。95%以上的PBC患者的血清中存在抗M2型线粒体抗体（Anti-mitochondrial antibody,AMA）,其所针对的抗原主要是线粒体中的丙酮酸脱氢酶E2亚基（PDC-E2）。虽然PBC疾病的发病机制尚未完全清楚,易感基因和环境危险因素在PBC的发生发展中发挥着重要的作用。对自身组织（抗原）丧失免疫耐受是PBC疾病发生的基础。T淋巴细胞在这一过程中发挥着关键性的作用。T细胞受体（T cell receptor,TCR）是T细胞表面的一种特异性受体,负责识别由主要组织相容性复合体（major histocompatibility complex,MHC）所呈递的抗原和介导免疫应答,是T细胞识别不同的抗原及被激活的中心环节。而TCR的抗原特异性主要由β受体链的高变互补决定区 3（complementary determining regions 3,CDR3）决定。我们研究 PBC患者的初始和记忆... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：116 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

测序结果的稳定性和可靠性评估

我们通过绘制散点图从整体水平分析ＰＢＣ患者组和正常对照组（Ｎｏｒｍａ丨??ｃｏｎｔｒｏｌ，?ＮＣ）外周血中ＣＤ４＋记忆细胞和ＣＤ『记忆细胞的ＴＣＲｐ?ＣＤＲ３核苷酸序??列的克隆扩增程度（图２）。我们发现无论是ＣＤ４＋记忆细胞还是ＣＤ８＋记忆细胞，??绝大部分ＴＣＲＰＣＤＲ３序列的频率较低，表明这些序列尚未经历大规模克隆性扩??增。而在每个个体的ＴＣＲｐＣＤＲ３图谱中都发现一些高频序列。总的来说，ＰＢＣ??患者的ＴＣＲＰＣＤＲ３核苷酸序列的克隆扩增程度与正常对照组没有显著差异

散点图展示ＰＢＣ患者与健康者的ＣＤ８＋记忆Ｔ细胞的克隆扩增程度。??我们采用３种评估方法比较ＰＢＣ患者组和正常对照组ＣＤ４＋记忆细胞和ＣＤ８’??记忆细胞的ＴＣＲｐＣＤＲ３免疫图谱的多样性（图３），发现克隆数／ＣＤＲ３总序列数??的百分比在?ＮＣ－４ＲＯ，?ＰＢＣ－４ＲＯ，?ＮＣ－８ＲＯ?和?ＰＢＣ－８ＲＯ?组分别为?４．４３?±?丨．５３％，?３．４５??±０．９９％，丨．０３土０．４０°／〇和丨．００±０．３２％。该值越大说明说明样本的多样性越大，反??之越小。结果表明ＰＢＣ患者组的ＴＣＲ（３ＣＤＲ３免疫图谱多祥性小于正常对照组，??但差异不显著。但无论在ＰＢＣ患者组还是正常对照组，ＣＤ４＋记忆细胞的多样性??远大于ＣＤ８＋记忆细胞的多样性。此外，ＣＤｔ记忆细胞的前Ｉ００位克隆的累计频??率为２０％，而在ＣＤ８＊记忆细胞中该累计频率达到６０％，进一步证明了?ＣＤ４＋记忆??细胞的ＴＣＲＰＣＤＲ３免疫图谱多样性较大，克隆扩增程度较小。香农墒分析也显示??了类似的结果。??１９??


本文编号：3312765